Mecanismo de regulação da eletroacupuntura do receptor potencial transitório vanilóide tipo 1 que melhora o prurido cutâneo em ratos com urticária

Li Jiquan ,  

Ma Tieming ,  

Wang Wei ,  

Chen Yiran ,  

Zhao Yan ,  

You Linxin ,  

Zhang Jingyu ,  

Wang Ying ,  

Lin Xingxing ,  

Zheng Qu ,  

Zhao Yeyu ,  

Li Sijia ,  

摘要

O objetivo é observar o efeito antipruriginoso da eletroacupuntura nos pontos "Quchi" e "Xuehai" no prurido cutâneo de ratos com urticária (UR), e analisar o mecanismo do efeito antipruriginoso com base nas proteínas relacionadas ao canal do receptor potencial transiente vaniloide tipo 1 (TRPV1). Métodos: prepararam-se anticorpos anti-OVA em 3 ratos machos SD por injeção conjunta de ovalbumina (OVA) com adjuvante de hidróxido de alumínio [Al(OH)3]. Utilizou-se o método da reação alérgica cutânea passiva (PCA) para estabelecer o modelo UR em 16 ratos machos SD, com injeção intradérmica de soro anti-OVA diluído nas costas, seguida de injeção intravenosa de OVA e azul de Evans para o desafio antigênico após 48 horas, com avaliação do modelo após 0,5 h. Os ratos com modelo bem-sucedido foram divididos aleatoriamente em grupo modelo e grupo de eletroacupuntura, 8 ratos em cada, e mais 8 ratos para o grupo normal. No segundo dia após a modelagem, os ratos do grupo de eletroacupuntura receberam tratamento bilateral de eletroacupuntura nos pontos "Quchi" e "Xuehai", 1 vez/dia, por 5 dias consecutivos. Registrou-se o número de coçadas na pele sensibilizada das costas antes e depois da intervenção, mediu-se a área das manchas azuis na pele sensibilizada das costas. A pele sensibilizada das costas foi coletada, determinou-se a quantidade de exsudato de azul de Evans pelo método colorimétrico, observaram-se alterações patológicas pela coloração HE, observou-se a ultraestrutura dos mastócitos (MC) pela microscopia eletrônica de transmissão, observou-se a morfologia dos MC e calculou-se a taxa de desgranulação pela coloração com azul de toluidina, mediu-se os níveis séricos de imunoglobulina E (IgE), histamina (HIS), 5-hidroxitriptamina (5-HT), e interleucinas (IL)-1β, IL-5 e IL-6 por ELISA, contou-se o número de células positivas para fosfatidilinositol-4,5-bisfosfato (PIP2) por imunohistoquímica, e mediu-se a expressão da proteína quinase C (PKC), p-PKC e TRPV1 na pele sensibilizada por Western blot. Resultados: em comparação com o grupo normal, o grupo modelo apresentou aumento significativo no número de coçadas, área das manchas azuis e exsudato de azul de Evans (P<0,01), com manifestações inflamatórias evidentes na pele sensibilizada, aumento dos grânulos basofílicos no citoplasma dos MC, danos nas membranas dos grânulos, diminuição da densidade interna dos grânulos, aumento da taxa de desgranulação dos MC (P<0,01), níveis séricos elevados de IgE, HIS, 5-HT, IL-1β, IL-5 e IL-6 (P<0,01), aumento no número de células positivas para PIP2 e expressão de PKC, TRPV1 e relação p-PKC/PKC (P<0,01). Comparado ao grupo modelo, o grupo de eletroacupuntura apresentou redução no número de coçadas, área das manchas azuis e exsudato (P<0,05, P<0,01), atenuação das manifestações inflamatórias, redução dos grânulos basofílicos nos MC, restauração da membrana dos grânulos, aumento da densidade interna dos grânulos, redução da taxa de desgranulação dos MC (P<0,01), diminuição dos níveis séricos de IgE, HIS, 5-HT, IL-1β, IL-5 e IL-6 (P<0,01), diminuição no número de células positivas para PIP2 e expressão de PKC, TRPV1 e relação p-PKC/PKC (P<0,01, P<0,05). Conclusão: a eletroacupuntura nos pontos "Quchi" e "Xuehai" pode melhorar o prurido cutâneo e as lesões da urticária em ratos UR, possivelmente associada à inibição das proteínas do canal TRPV1 da pele e à inibição da desgranulação dos MC, reduzindo assim a reação inflamatória local.

关键词

urticária; eletroacupuntura; receptor potencial transitório vanilóide tipo 1; prurido; mastócitos

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