Estudo do mecanismo pelo qual a eletroacupuntura melhora a sensibilização central em ratos com doença do refluxo gastroesofágico não erosiva do tipo desequilíbrio fígado-estômago baseado na via de sinalização NGF/TrkA

TANG Ming-jie ,  

LI Ying-hong ,  

ZHU Tian-yi ,  

XIE Zhong-qi ,  

ZHENG Shi-yi ,  

XU hang ,  

XU Lin-ling ,  

XU Ping-ping ,  

ZHANG Cai-rong ,  

CHEN Chao-ming ,  

摘要

O objetivo é observar o efeito da eletroacupuntura na sensibilização central em ratos com doença do refluxo gastroesofágico não erosiva (NERD) do tipo desequilíbrio fígado-estômago, e explorar seu mecanismo de ação. Métodos: ratos machos SD foram randomizados em grupo controle, grupo modelo, grupo eletroacupuntura e grupo medicamento ocidental, com 10 animais em cada grupo. Exceto pelo grupo controle, os outros três grupos receberam sensibilização básica (injeção intraperitoneal de ovoalbumina + hidróxido de alumínio como adjuvante) combinada com estímulo de aperto da cauda para construir modelo de NERD do tipo desequilíbrio fígado-estômago. O grupo eletroacupuntura recebeu eletroacupuntura nos pontos "Zhiyang", "Shendao", "Dazhui" e "Baihui", 30 minutos por sessão, uma vez ao dia, durante 2 semanas consecutivas. O grupo medicamento ocidental recebeu omeprazol (1,8 mg·kg-1) por gavagem, uma vez ao dia, durante 2 semanas consecutivas. Após a sensibilização básica e ao final da intervenção, foi realizado o teste de preferência por água açucarada, e o limiar do reflexo de retirada mecânica da pata (MWT) foi medido com o aparelho von Frey. Após a intervenção, foi realizado o experimento de reflexo de retirada da parede abdominal (AWR), e por fim o experimento de perfusão ácida esofágica; após a perfusão, os ratos foram sacrificados e amostras coletadas. A microscopia eletrônica de transmissão foi usada para observar a quantidade de vesículas sinápticas na medula espinhal e os espaços entre as células epiteliais da mucosa esofágica; o método ELISA para detectar os níveis séricos de gastrina (GAS) e motilina (MTL); o método Western blot para detectar a expressão proteica de NGF, TrkA, GluA1 e PSD95 na medula espinhal; a PCR em tempo real para detectar os níveis de expressão de mRNA de NGF e TrkA na medula espinhal; a imunofluorescência para detectar os níveis de expressão positiva de GluA1 e PSD95 na medula espinhal. Em comparação com o grupo controle, a taxa de preferência por água açucarada diminuiu no grupo modelo (P<0,01), o MWT diminuiu (P<0,01), as pontuações AWR aumentaram com pressões de 40, 60 e 80 mmHg (P<0,01), o limiar de dor visceral diminuiu (P<0,01), houve aumento significativo no número de vesículas sinápticas na medula espinhal, os espaços entre as células epiteliais da mucosa esofágica aumentaram significativamente, os níveis séricos de GAS e MTL diminuíram (P<0,01), a expressão proteica de NGF, TrkA, GluA1 e PSD95 na medula espinhal aumentou (P<0,01), a expressão de mRNA de NGF e TrkA aumentou (P<0,01), e a intensidade média de fluorescência das proteínas GluA1 e PSD95 aumentou (P<0,01). Em comparação com o grupo modelo, as taxas de preferência por água açucarada, MWT, limiar de dor visceral e níveis séricos de MTL aumentaram nos grupos de eletroacupuntura e medicamento ocidental (P<0,01, P<0,05), as pontuações AWR diminuíram a 40 mmHg (P<0,01, P<0,05), a expressão proteica de NGF, PSD95 e TrkA na medula espinhal diminuiu (P<0,01, P<0,05), e a expressão de mRNA de TrkA diminuiu (P<0,01, P<0,05). No grupo de eletroacupuntura, as pontuações AWR diminuíram a 60 e 80 mmHg (P<0,01), os níveis séricos de GAS aumentaram (P<0,01), a expressão de mRNA de NGF na medula espinhal diminuiu (P<0,01), e a intensidade média de fluorescência de GluA1 e PSD95 diminuiu (P<0,01). O número de vesículas sinápticas nos grupos de eletroacupuntura e medicamento ocidental diminuiu significativamente, e os espaços entre as células epiteliais da mucosa esofágica também tendem a se recuperar. Em comparação com o grupo de eletroacupuntura, o limiar de dor visceral e MWT diminuíram no grupo de medicamento ocidental (P<0,01). Conclusão: a eletroacupuntura pode aliviar a hipersensibilidade visceral em ratos com NERD tipo desequilíbrio fígado-estômago e reduzir a sensibilização central, sendo seu mecanismo possivelmente relacionado à inibição da via NGF/TrkA.

关键词

doença do refluxo gastroesofágico não erosiva; eletroacupuntura; hipersensibilidade visceral; sensibilização central; medula espinhal; via de sinalização NGF/TrkA

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