Estudo do mecanismo de ação da acupuntura elétrica na regulação das células T de memória CD8⁺ para inibir a recorrência da psoríase com base na via TRAF2/NF-κB

Li Xuejia ,  

Li Yongdan ,  

Liu Zhaolin ,  

Chen Haiming ,  

Chen Yuchao ,  

Liu Huazhen ,  

摘要

Objetivo: explorar o efeito terapêutico da acupuntura elétrica no modelo de recorrência da psoríase em camundongos, bem como investigar seu mecanismo de ação do ponto de vista da diferenciação de células T de memória e da via de sinalização do fator associado ao receptor do fator de necrose tumoral 2 (TRAF2)/fator nuclear κB (NF-κB). Métodos: camundongos BALB/c foram divididos em lotes para o modelo de recorrência e os experimentos de validação do mecanismo. O modelo de recorrência incluiu grupos: controle branco, modelo, acupuntura elétrica, metotrexato e acupuntura elétrica + metotrexato; para o experimento de validação, foram adicionados grupos de acupuntura elétrica + inibidor de NF-κB e acupuntura elétrica + agonista de NF-κB. O modelo de recorrência da psoríase foi induzido por aplicação dorsal de imiquimode (IMQ). A intervenção por acupuntura elétrica selecionou os pontos “曲池” e “足三里”, com ondas densas e dispersas, frequência de 2 Hz/30 Hz, intensidade de 1 mA, uma vez ao dia, durante 7 dias consecutivos, 15 minutos por vez. As alterações nas lesões cutâneas foram observadas e a área das lesões e o índice de gravidade da psoríase (PASI) foram avaliados; a coloração com hematoxilina-eosina (HE) avaliou as alterações histopatológicas do tecido cutâneo lesado; o conteúdo das interleucinas (IL)-6, IL-17A e fator de necrose tumoral α (TNF-α) foi medido por ELISA no tecido cutâneo lesado; a expressão do mRNA de IL-15, CXCL9, CXCL10, receptor CXCR3 foi detectada por PCR quantitativa em tempo real; a citometria de fluxo avaliou a proporção de células T residentes CD8⁺ e CD4⁺ (T_RM) no tecido lesado; o Western blot detectou a expressão das proteínas fosforiladas NF-κB p65 (p-NF-κB p65), NF-κB p52, TRAF2 fosforilado (p-TRAF2) e p38 MAPK fosforilado (p-p38 MAPK). Resultados: em comparação com o grupo controle branco, o grupo modelo apresentou aumentos significativos na pontuação PASI, conteúdo de IL-6, TNF-α, IL-17A, proporção de CD8⁺ e CD4⁺ T_RM, expressão de mRNA de IL-15, CXCL9, CXCL10, CXCR3 e expressão de p-TRAF2, p-NF-κB p65, NF-κB p52 (P <0,01, P <0,05). Em comparação com o grupo modelo, exceto a proporção de CD4⁺ T_RM, esses indicadores foram significativamente revertidos nos grupos acupuntura elétrica e acupuntura elétrica + metotrexato (P <0,01, P <0,05). Em comparação com o grupo metotrexato, esses indicadores (exceto IL-17A e proporção de CD4⁺ T_RM) diminuíram significativamente nos dois grupos de acupuntura elétrica (P <0,01, P <0,05). Em comparação com o grupo acupuntura elétrica, o grupo acupuntura elétrica + metotrexato apresentou reduções adicionais em CD8⁺CD103⁺ T_RM, mRNA CXCL9, CXCL10 e na proteína p-NF-κB p65 (P <0,01, P <0,05). No experimento de validação, em comparação com o grupo modelo, as lesões cutâneas, fatores inflamatórios, proporções de CD8⁺CD103⁺ T_RM e CD4⁺ T_RM, expressão de p-TRAF2, p-NF-κB p65 e expressão de mRNA de CXCL9, CXCL10 e CXCR3 melhoraram significativamente nos grupos acupuntura elétrica e acupuntura elétrica + inibidor de NF-κB (P <0,01, P <0,05). Em comparação com o grupo acupuntura elétrica, esses indicadores (exceto PASI) diminuíram ainda mais no grupo acupuntura elétrica + inibidor (P <0,01, P <0,05); e aumentaram significativamente no grupo acupuntura elétrica + agonista (P <0,01, P <0,05). Conclusão: a acupuntura elétrica pode melhorar efetivamente os sintomas de recorrência da psoríase, e seu mecanismo de ação pode estar relacionado à inibição da ativação da via de sinalização TRAF2/NF-κB e à regulação negativa específica do nível das células T de memória CD8⁺.

关键词

acupuntura elétrica; recorrência da psoríase; células T de memória; fator associado ao receptor do fator de necrose tumoral 2/via de sinalização do fator nuclear κB

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