Regulação da via AMPK/SIRT1/PGC-1α pela inserção de fios em pontos de acupuntura sobre o microbioma intestinal e resposta inflamatória em ratos com obesidade simples

Li Yong ,  

Ruan Chongjie ,  

Wang Wenyan ,  

Li Pei ,  

Liang Fengxia ,  

摘要

O objetivo é investigar os efeitos da inserção de agulhas com fios nos pontos de acupuntura sobre a microbiota intestinal, a resposta inflamatória e os mecanismos relacionados em ratos com obesidade simples. Métodos: foram utilizados ratos SD, onde se induziu um modelo de obesidade simples por meio de alimentação com dieta rica em gordura e foram aleatoriamente divididos em grupos: modelo, orlistat, inserção de fios, AICAR e inserção de fios + Compound C, com 8 ratos em cada grupo. Outros 8 ratos SD foram usados como grupo controle. No grupo de inserção de fios, os pontos "Zhongwan", "Guanyuan", "Zusanli" e "Fenglong" foram selecionados para a operação de inserção, uma vez por semana durante 4 semanas consecutivas; no grupo orlistat, os ratos receberam 0,048 g/kg de orlistat por via oral uma vez ao dia durante 4 semanas; no grupo AICAR, os ratos receberam uma injeção intravenosa na cauda de 50 mg/kg do ativador AMPK AICAR, uma vez ao dia durante 4 semanas; no grupo inserção de fios + Compound C, os ratos receberam simultaneamente a inserção de fios e uma injeção intravenosa de 250 μg/kg do inibidor AMPK Compound C. Mediram-se a massa corporal e o comprimento dos ratos, calculou-se o índice de Lee; mediram-se a glicemia de jejum (FPG), a insulina de jejum (FINS) e calculou-se o índice de resistência à insulina; analisou-se o conteúdo sérico de colesterol total (TC), triglicerídeos (TG), LDL-C e HDL-C por meio de analizador bioquímico; quantificaram-se os níveis séricos de TNF-α, IL-6, LPS e IL-10 pelo método ELISA; observaram-se alterações patológicas no tecido do cólon por coloração HE; detectou-se a expressão positiva das proteínas oclusina (Occludin) e claudina 1 (Claudin 1) no tecido do cólon por imunofluorescência; avaliou-se a abundância da microbiota intestinal por PCR; determinou-se a expressão das proteínas SIRT1 e PGC-1α no cólon e tecido adiposo por Western blot. Resultados: em comparação com o grupo controle, o grupo modelo apresentou aumento significativo na massa corporal, índice de Lee, níveis séricos de TC, TG, LDL-C, TNF-α, IL-6, LPS, FPG, FINS, índice de resistência à insulina e abundância de Enterococcus e Desulfovibrio (P<0,05); níveis séricos de IL-10 e HDL-C, abundância de Bifidobacterium, Lactobacillus e Akkermansia, intensidade de fluorescência de Occludin e Claudin 1, relação p-AMPK/AMPK e expressão de proteínas SIRT1 e PGC-1α no cólon e tecido adiposo foram reduzidos (P<0,05). Em comparação com o grupo modelo, os grupos orlistat, inserção de fios e AICAR apresentaram reduções significativas na massa corporal, índice de Lee, níveis séricos de TC, TG, LDL-C, TNF-α, IL-6, LPS, FPG, FINS, índice de resistência à insulina e abundância de Enterococcus e Desulfovibrio (P<0,05); além de aumentos nos níveis séricos de IL-10 e HDL-C, abundância de Bifidobacterium, Lactobacillus e Akkermansia, intensidade de fluorescência de Occludin e Claudin 1, relação p-AMPK/AMPK e expressão de proteínas SIRT1 e PGC-1α (P<0,05). Comparado ao grupo inserção de fios, o grupo inserção de fios + Compound C apresentou aumentos na massa corporal, índice de Lee, níveis séricos de TC, TG, LDL-C, TNF-α, IL-6, LPS, FPG, FINS, índice de resistência à insulina e abundância de Enterococcus e Desulfovibrio (P<0,05), e diminuições nos níveis séricos de IL-10 e HDL-C, abundância de Bifidobacterium, Lactobacillus, Akkermansia, intensidade de fluorescência de Occludin e Claudin 1, relação p-AMPK/AMPK e expressão de proteínas SIRT1 e PGC-1α (P<0,05). Conclusão: a inserção de fios em pontos de acupuntura pode aliviar a resposta inflamatória sistêmica de baixo grau em ratos com obesidade simples, regular o metabolismo lipídico, ajustar a abundância de bactérias intestinais benéficas e reparar a função da barreira intestinal, possivelmente por meio da via AMPK/SIRT1/PGC-1α.

关键词

inserção de fios em pontos de acupuntura;ratos com obesidade simples;resposta inflamatória;microbioma intestinal;via AMPK/SIRT1/PGC-1α

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