Objetivo: Investigar o papel dos neurônios positivos para tirosina hidroxilase (TH) na região ventrolateral anterior da medula oblonga (RVLM) na melhora dos distúrbios da motilidade intestinal em camundongos com constipação funcional (FC) por eletroacupuntura. Métodos: Primeiramente, utilizou-se um vírus transsináptico para identificar as áreas cerebrais que projetam para o cólon proximal. Em seguida, 18 camundongos C57BL/6J foram divididos aleatoriamente em três grupos: grupo normal, grupo modelo e grupo de eletroacupuntura, com 6 camundongos em cada. O modelo de FC foi induzido por administração oral de cloridrato de loperamida. O grupo de eletroacupuntura recebeu estímulo nos pontos “Tianshu” e “Shangjuxu”, 5 dias por ciclo, totalizando 2 ciclos. Foram observadas as condições de defecação dos grupos e medido o teor de água nas fezes; registrado o tempo de expulsão da primeira fezes preta; medida a taxa de propulsão do intestino delgado; medido o teor de TH no soro e cólon por ELISA; detectada coexpressão de TH/c-Fos no RVLM por imunofluorescência. Posteriormente, 12 camundongos C57BL/6J foram divididos aleatoriamente em grupo vírus vazio + clozapina-N-óxido (CNO) e grupo vírus inibidor + CNO, e 18 camundongos em grupo vírus vazio + CNO, grupo eletroacupuntura e grupo vírus ativador + CNO + eletroacupuntura, com 6 camundongos por grupo. Os vírus foram injetados na região do RVLM, 21 dias após expressão viral foi injetado CNO intraperitonialmente (1 mg/kg). Os grupos eletroacupuntura e vírus ativador + CNO + eletroacupuntura receberam intervenção de eletroacupuntura 30 minutos após injeção de CNO, método igual ao anterior. Foram realizadas observações das fezes e avaliação da motilidade intestinal. Por fim, 18 camundongos receberam injeção viral rAAV-hSyn-GCaMP6s no RVLM, 21 dias após transdução viral foram divididos em grupo branco, grupo modelo controle e grupo modelo + eletroacupuntura, 6 camundongos em cada. As alterações do sinal de cálcio dos neurônios na região do RVLM foram registradas usando sistema de gravação de fibra óptica multicanal. Resultados: O rastreamento retrógrado com vírus transsináptico mostrou conexões sinápticas entre neurônios do RVLM e o cólon proximal. Comparado ao grupo normal, o grupo modelo mostrou tempo prolongado para expulsão da primeira fezes preta, diminuição do número total de fezes, teor hídrico nas fezes e taxa de propulsão do intestino delgado (P<0,001, P<0,01), aumento do teor de TH no soro e cólon (P<0,01), aumento no número de neurônios TH e c-Fos positivos no RVLM e neurônios coexpressando TH/c-Fos (P<0,001). Comparado ao grupo modelo, o grupo eletroacupuntura apresentou tempo reduzido para expulsão da primeira fezes preta, aumento do número total de fezes, teor hídrico e taxa de propulsão do intestino delgado (P<0,001, P<0,01), redução do teor de TH no soro e cólon (P<0,01), além de redução no número de neurônios TH, c-Fos positivos e coexpressando no RVLM (P<0,001). Em comparação ao grupo vírus vazio + CNO, o grupo vírus inibidor + CNO apresentou tempo reduzido para expulsão da primeira fezes preta, aumento do número total de fezes, teor hídrico e taxa de propulsão do intestino delgado (P<0,001, P<0,01). Comparado ao grupo vírus vazio + CNO, o grupo eletroacupuntura também mostrou redução no tempo para expulsão da primeira fezes preta, aumento no número total de fezes, teor hídrico e taxa de propulsão do intestino delgado (P<0,001, P<0,01). Em comparação ao grupo eletroacupuntura, o grupo vírus ativador + CNO + eletroacupuntura apresentou aumento no tempo para expulsão da primeira fezes preta, diminuição do número total de fezes, teor hídrico e taxa de propulsão do intestino delgado (P<0,001, P<0,01). Comparado ao grupo branco, a atividade do sinal de Ca²⁺ no RVLM aumentou significativamente no grupo modelo controle (P<0,001). Em comparação ao grupo modelo controle, a atividade do sinal de Ca²⁺ no grupo modelo + eletroacupuntura diminuiu significativamente (P<0,001). Conclusão: Os pontos de acupuntura colônicos “Tianshu” e “Shangjuxu” podem melhorar os distúrbios da motilidade intestinal em camundongos FC pela inibição da atividade dos neurônios positivos para TH na região do RVLM.

Eletroacupuntura; região ventrolateral anterior da medula oblonga; neurônios de tirosina hidroxilase; distúrbios da motilidade intestinal