Mecanismo da ação da eletroacupuntura pela regulação da via Hippo/YAP para melhorar a resposta inflamatória de baixo grau no duodeno de ratos com dispepsia funcional

Liang Tingting ,  

Zhao Yu ,  

Wang Tianlang ,  

Zhang Jiahao ,  

Wang Xihan ,  

Wang Xining ,  

Feng Yifan ,  

Guo Yue ,  

Liu Yunxiao ,  

Qu Yi ,  

Xue Yanan ,  

Liu Jidong ,  

摘要

Objetivo: esclarecer o mecanismo pelo qual a eletroacupuntura nos pontos “Taichong” e “Zusanli” melhora a resposta inflamatória de baixo grau no duodeno de ratos com dispepsia funcional (FD) por meio da regulação da via das proteínas Hippo/Yes associadas (YAP). Métodos: Ratos machos SD foram distribuídos aleatoriamente em grupos controle, modelo e eletroacupuntura (n=7). O modelo de FD foi estabelecido por uma estratégia de indução composta, incluindo natação forçada, estimulação da cauda e distúrbios alimentares por 21 dias. O grupo de eletroacupuntura recebeu tratamento nos pontos “Taichong” e “Zusanli” por 20 minutos em cada sessão, uma vez ao dia, por dois ciclos de tratamento de 6 dias cada, com intervalo de 1 dia. Durante a modelagem e o tratamento, observou-se o estado geral e mudança de peso dos ratos; após o tratamento, mediu-se o consumo alimentar em 3 horas, taxa de esvaziamento gástrico e taxa de propulsão intestinal; foram feitas colorações HE do duodeno para observar alterações patológicas da mucosa; o conteúdo sérico de motilina (MTL) e gastrina (GAS) foi detectado por ELISA; a expressão das proteínas YAP, TAZ, fosforiladas (p)-YAP e p-TAZ no tecido duodenal foi avaliada por Western blot; a expressão positiva das interleucinas (IL)-1β, IL-6 e fator de necrose tumoral-α (TNF-α) no tecido duodenal foi avaliada por imunohistoquímica; a expressão positiva das proteínas ocludina e zonula ocludens-1 (ZO-1) no tecido duodenal foi detectada por imunofluorescência; os níveis de expressão de mRNA de YAP, TAZ, B linfoma-2 (Bcl-2) e proteína X associada a Bcl-2 (Bax) foram medidos por PCR quantitativa em tempo real; a taxa de apoptose celular no tecido duodenal foi avaliada por coloração TUNEL. Resultados: Comparado ao grupo controle, o grupo modelo apresentou estado evidente de prostração, olhos semicerrados, pêlo arrepiado e fezes amolecidas; redução do peso corporal, consumo alimentar em 3 horas, taxa de esvaziamento gástrico e taxa de propulsão intestinal (P<0,05, P<0,01); infiltração inflamatória significativa na lâmina própria do duodeno; redução significativa dos níveis séricos de MTL e GAS (P<0,01); aumento nas razões de expressão de proteínas p-YAP/YAP e p-TAZ/TAZ (P<0,01); aumento na expressão positiva de IL-1β, IL-6 e TNF-α (P<0,01); redução na intensidade média de fluorescência das proteínas ocludina e ZO-1 (P<0,01); aumento na expressão de mRNA de Bax (P<0,01) e redução nos níveis de YAP, TAZ e Bcl-2 (P<0,01); aumento da taxa de apoptose das células epiteliais intestinais (P<0,01). Após a intervenção, comparado ao grupo modelo, o grupo de eletroacupuntura apresentou melhora do estado geral, aumento da atividade, pêlo lustroso, fezes formadas; aumento do peso corporal, consumo alimentar em 3 horas, taxa de esvaziamento gástrico e taxa de propulsão intestinal (P<0,01); redução da infiltração inflamatória na lâmina própria do duodeno; aumento dos níveis séricos de MTL e GAS (P<0,01); redução nas razões de expressão de p-YAP/YAP e p-TAZ/TAZ (P<0,01, P<0,05); redução na expressão positiva de IL-1β, IL-6 e TNF-α (P<0,05, P<0,01); aumento na intensidade média de fluorescência das proteínas ocludina e ZO-1 (P<0,01, P<0,05); redução na expressão de mRNA de Bax (P<0,01) e aumento nos níveis de expressão de YAP, TAZ e Bcl-2 (P<0,01, P<0,05); redução da taxa de apoptose das células epiteliais intestinais (P<0,01). Conclusão: A eletroacupuntura nos pontos “Taichong” e “Zusanli” pode aliviar significativamente os sintomas da dispepsia funcional e suprimir eficazmente a resposta inflamatória de baixo grau no duodeno, possivelmente por meio da regulação da via de sinalização Hippo/YAP.

关键词

eletroacupuntura; dispepsia funcional; via Hippo/YAP; resposta inflamatória de baixo grau

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