Цель исследования – наблюдать, влияет ли электропунктура через регулирование экспрессии ядерного рецептора 77 (Nur77) и его перемещение из ядра в цитоплазму на взаимодействие Nur77 с фактором, ассоциированным с рецептором фактора некроза опухоли 2 (TRAF2), тем самым ингибируя избыточный аутофагический процесс в макрофагах легочной ткани и улучшая воспалительную реакцию легких у мышей с хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ). Методика: использовали 40 SPF-самцов мышей C57BL/6, случайным образом выбрали 10 животных в качестве контрольной группы, остальные 30 подвергались воздействию табачного дыма в течение 3 месяцев для моделирования ХОБЛ. После успешного установления модели животные были случайным образом распределены на три группы: модельная, электропунктурная и группа с антагонистом + электропунктура, по 10 мышей в каждой. Мышам в электропунктурной и группе антагонист + электропунктура проводили двустороннее вмешательство электропунктуры на точки "Фейшу" и "Цзу Сан Ли" ежедневно по 20 минут в течение 14 дней; группе антагонист + электропунктура за 30 минут до электропунктуры внутриперитонеально вводили антагонист Nur77 DIM-C-pPhOH (25 мг/кг) ежедневно на протяжении 14 дней. Функция легких у мышей оценивалась с помощью анализатора дыхательной функции; гистологические изменения в легочной ткани изучались с помощью гематоксилин-эозиновой окраски; уровни цитокинов IL-6, IL-1β и TNF-α в бронхоальвеолярной промывной жидкости (BALF) измеряли методом ELISA; активность супероксиддисмутазы (SOD) и содержание малонового диальдегида (MDA) в легочной ткани оценивали колориметрическим методом; экспрессию Nur77 (ядерного и цитоплазматического белка), TRAF2, LC3 и белка P62 исследовали методом вестерн-блоттинга; количество мРНК Nur77 и Traf2 в легочной ткани определяли с помощью количественной флюоресцентной ПЦР в реальном времени; взаимодействие Nur77 и TRAF2 выявляли с помощью коиммуноосаждения (Co-IP); изменения аутофагосом в макрофагах легочной ткани анализировали методом трансмиссионной электронной микроскопии. Результаты: по сравнению с контролем у модельной группы наблюдалось значительное снижение параметров дыхательной функции (P<0.05, P<0.01), утолщение структуры стенок альвеол с образованием крупных пузырчатых структур вследствие слияния нескольких альвеол, а также массивное диффузное инфильтрирование воспалительных клеток. В бронхоальвеолярной жидкости отмечалось значительное увеличение про-воспалительных факторов IL-6, IL-1β и TNF-α; активность SOD в легочной ткани значительно снижалась, содержание MDA значительно возрастало (P<0.01); отношение LC3II/LC3I значительно увеличивалось (P<0.05), уровень экспрессии белка P62 существенно снижался (P<0.01), уровень TRAF2 существенно повышался (P<0.01), при этом экспрессия Nur77 в ядре значительно увеличивалась, а в цитоплазме – значительно снижалась (P<0.01). Также наблюдалось значительное снижение транскрипции гена Nur77 (P<0.01) и повышение транскрипции Traf2 (P<0.05), относительный уровень связывания Nur77 и TRAF2 значительно уменьшался (P<0.01). Под электронным микроскопом наблюдалось значительное увеличение количества аутофагосом в макрофагах. По сравнению с модельной группой в электропунктурной группе все показатели улучшались в разной степени (P<0.05, P<0.01), активность SOD значительно увеличивалась (P<0.01), содержание MDA значительно снижалось (P<0.05); отношение LC3II/LC3I значительно снижалось (P<0.01), экспрессия белка P62 значительно повышалась (P<0.01), уровень TRAF2 значительно снижался (P<0.05), экспрессия Nur77 в ядре значительно снижалась, а в цитоплазме значительно увеличивалась (P<0.05, P<0.01); экспрессия mRNA Nur77 повышалась, а Traf2 снижалась значительно (P<0.05); относительное связывание Nur77 и TRAF2 значительно увеличивалось (P<0.05), количество аутофагосом в макрофагах значительно уменьшалось. По сравнению с электропунктурной группой в группе с антагонистом + электропунктурой эти показатели изменялись в обратном направлении (P<0.05,P<0.01). Вывод: электропунктура может улучшать экспрессию Nur77 и способствовать его транспортеру из ядра в цитоплазму, усиливать взаимодействие Nur77 и TRAF2, регулировать белки, связанные с аутофагией, ингибировать избыточный аутофагический процесс в макрофагах легких и уменьшать воспалительную реакцию легких при ХОБЛ.

электропунктура; хроническая обструктивная болезнь легких; ядерный рецептор 77; фактор, ассоциированный с рецептором фактора некроза опухоли 2; аутофагия макрофагов