Изучение механизма воздействия игло-ножевой миофасциальной декомпрессии на подавление разрушения костей при коллаген-индуцированном артрите у крыс на основе сигнального пути OPG/RANKL/NF-κB
Цель исследования — изучить механизмы действия методики игло-ножевой миофасциальной декомпрессии при подавлении разрушения кости у крыс с индуцированным коллагеном артритом (CIA). Методика: использовались 24 самки крыс линии SD класса SPF, 8 из них служили контрольной группой, остальные подвергались индукции модели CIA с использованием коллагена типа II и неполного адъюванта Фрейнда. После формирования модели их случайно разделили на модельную группу и группу с лечением, по 8 животных в каждой. Лечение в группе игло-ножевой терапии состояло из чередующихся процедур (通蔽启机术 и 通阳启枢术) с частотой 1 раз в 3 дня, всего 9 раз. После вмешательства проводилось оценивание индекса артрита (AI), микрокомпьютерная томография (Micro-CT) для изучения разрушения костей голеностопного сустава, анализ плотности костной ткани (BMD), поверхности/объема кости (BS/BV), объема кости (BV/TV), количества трабекул (Tb.N), толщины трабекул (Tb.Th) и разделения трабекул (Tb.Sp). С помощью TRAP-окрашивания фиксировали изменение количества остеокластов (OC) в тканях сустава, HE-окрашивание использовалось для патоморфологических изменений сустава, ELISA определял содержание TNF-α, IL-6, IL-1β в сыворотке, а ПЦР в реальном времени и Western blot анализировали экспрессию OPG, RANKL, NF-κB p65 и IKKβ на уровне мРНК и белков. Результаты показали значительное повышение оценки AI в модельной группе по сравнению с контролем (P<0.01); Micro-CT выявила оборванность поверхности сустава, расширение щели, явное уменьшение костного объема и разрушения, снижение BMD, BV/TV, Tb.Th и Tb.N и увеличение BS/BV и Tb.Sp (P<0.01). Количество остеокластов значительно возросло (P<0.01); HE-окрашивание выявило выраженный пролиферативный процесс в синовиальных клетках и обширную инфильтрацию воспалительных клеток; уровни TNF-α, IL-6 и IL-1β в сыворотке значительно повысились (P<0.01). Относительная экспрессия OPG снизилась, тогда как RANKL, NF-κB p65 и IKKβ значительно увеличились (P<0.01). В группе игло-ножевой терапии через 14, 21 и 28 дней после вмешательства индекс AI значительно снизился (P<0.01), Micro-CT показала улучшение плотности поверхности сустава, увеличение объема кости и снижение разрушения; BMD, BV/TV, Tb.Th и Tb.N значительно повысились (P<0.01), BS/BV и Tb.Sp снизились (P<0.01). Количество остеокластов в суставах значительно уменьшилось (P<0.01); HE-окрашивание показало незначительную гиперплазию синовиальных клеток и умеренную инфильтрацию воспалительных клеток; уровни TNF-α, IL-6 и IL-1β значительно снизились (P<0.01). Экспрессия OPG повысилась (P<0.01, P<0.05), а RANKL, NF-κB p65 и IKKβ снизились (P<0.01). Вывод: Методика игло-ножевой миофасциальной декомпрессии способна снижать воспалительную реакцию и разрушение костей у крыс с CIA, вероятно, через регуляцию сигнального пути OPG/RANKL/NF-κB и подавление дифференцировки остеокластов.
关键词
игло-ножевой миофасциальный декомпрессия; ревматоидный артрит; сигнальный путь OPG/RANKL/NF-κB; разрушение костей