Механизм действия акупунктуры в улучшении функции яичников у крыс на основе пути KEAP1/PGAM5/AIFM1 и стимулирования ангиогенеза

XU Kai-kai ,  

ZHANG Han ,  

MA Jing ,  

CHU Meng-yuan ,  

YANG Jia-qi ,  

HAN Yun-fei ,  

ZHOU Qian-yi ,  

GAO Yan-hua ,  

YAN Ying ,  

摘要

Целью исследования было наблюдение за влиянием акупунктуры точек «Гуаньюань» и «Саньиньцзяо» на регуляцию пути апоптоза, ассоциированного с Kelch-подобным эпоксид-гексахлорпропаном белком 1 (KEAP1)/фосфоглицеральдегид-измеразой 5 (PGAM5)/фактором индуцированного митохондриального апоптоза 1 (AIFM1) в процессе ангиогенеза яичников у крыс с уменьшенной овариальной резервной функцией (DOR), а также изучение возможных механизмов акупунктуры при лечении DOR. Методы: самки крыс SD были рандомизированы на 3 группы: контрольную, модельную и акупунктурную, по 6 животных в каждой. Модель DOR создавали путем внутрибрюшинного введения циклофосфамида. В группе акупунктуры выполняли прокалывание точек «Гуаньюань» и «Саньиньцзяо» с удерживанием игл в течение 20 мин, интервенции проводились через день, всего 15 раз. Оценивали цикл эструса с помощью мазков вагинальных эпителиальных клеток; с помощью ультразвуковой системы малого животного оценивали площадь яичников и диастолическую скорость кровотока (EDV), пиксистолическую скорость (PSV), пульсовый индекс (PI) и индекс резистентности (RI) яичниковой артерии, рассчитывая отношение PSV/EDV (S/D); уровни ФСГ, ЛГ, эстрадиола (E2) и анти-Мюллерова гормона (AMH) измеряли методом ELISA; морфологию яичников и рост фолликулов оценивали с помощью гематоксилин-эозинового окрашивания; активность реактивных форм кислорода (ROS) в тканях яичников оценивали методом проточной цитометрии; экспрессию VEGF, CD31 и KEAP1/PGAM5/AIFM1 выявляли с помощью иммунофлуоресцентного окрашивания. Результаты: по сравнению с контрольной группой в модельной группе отмечались нарушения цикла эструса, повышенные уровни ФСГ и ЛГ (p<0,05), сниженные уровни E2 и AMH (p<0,05); уменьшение площади яичников (p<0,05), повышение PI, RI и S/D артерии яичников (p<0,05); нарушение структуры яичников, снижение сосудистого распределения, уменьшение числа примордиальных, вторичных и зрелых фолликулов (p<0,05); пониженная экспрессия VEGF и CD31 в тканях яичников (p<0,05), повышение уровня ROS (p<0,05), увеличение экспрессии KEAP1, PGAM5 и AIFM1 (p<0,05). По сравнению с модельной группой в группе акупунктуры наблюдалось улучшение цикла эструса, снижение уровней ФСГ и ЛГ (p<0,05), повышение уровней E2 и AMH (p<0,05); увеличение площади яичников (p<0,05), снижение PI, RI и S/D (p<0,05); относительно четкая структура тканей яичников, повышенное сосудистое распределение, увеличение числа примордиальных и вторичных фолликулов (p<0,05); повышенная экспрессия VEGF и CD31 (p<0,05), снижение уровня ROS (p<0,05), уменьшение экспрессии KEAP1, PGAM5 и AIFM1 (p<0,05). Заключение: акупунктура точек «Гуаньюань» и «Саньиньцзяо» может улучшить функцию овариального резерва у крыс с DOR, что возможно связано с подавлением пути KEAP1/PGAM5/AIFM1 в тканях яичников, стимулированием ангиогенеза и улучшением кровотока в яичниках.

关键词

акупунктура;снижение овариального резерва;ангиогенез;путь KEAP1/PGAM5/AIFM1

阅读全文