Целью исследования является изучение влияния электрической акупунктуры на регуляцию сигнального пути фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K)/протеинкиназы B (Akt)/мишени рапамицина у млекопитающих (mTOR) на аутофагию в синовиальной ткани коленного сустава крыс с остеоартритом коленного сустава (KOA). Методы: выбраны 36 самцов крыс SD, случайным образом разделённые на нормальную группу, модельную группу и группу электрической акупунктуры, по 12 животных в каждой. Модель KOA воспроизводили методом натрия йодоцетата. После успешного моделирования в группе электрической акупунктуры проводили воздействие на поражённые точки ‘Дуби’ и ‘Цзу Саньли’ с электростимуляцией по 20 минут один раз в день в течение трёх недель подряд. Функцию коленного сустава оценивали с помощью поведенческой шкалы Lequesne MG, патологическую морфологию синовиальной ткани исследовали окраской гематоксилином и эозином (HE), ультраструктуру аутофагосом и аутофаголизосом – трансмиссионной электронной микроскопией, содержание аутофагических белков Atg5 и Atg12 определяли методом ELISA, уровень экспрессии мРНК PI3K, Akt и mTOR – методом количественной флуоресцентной ПЦР, относительный уровень белков PI3K, Akt, mTOR, ULK1, Beclin-1 и LC3 – методом вестерн-блоттинга. Результаты: по сравнению с нормальной группой у крыс модельной группы показатели по шкале Lequesne MG были повышены (P<0,01), в синовиальной ткани наблюдалась коллагеновая пролиферация, инфильтрация воспалительных клеток, увеличение количества аутофагосом и аутофаголизосом, содержание Atg5, Atg12, относительный уровень белков ULK1, Beclin-1 и соотношение LC3Ⅱ/LC3Ⅰ были повышены (P<0,01), экспрессия мРНК и белков PI3K, Akt, mTOR снижалась (P<0,01); по сравнению с модельной группой в группе электрической акупунктуры наблюдалось снижение баллов Lequesne MG (P<0,01), уменьшение коллагеновой пролиферации и инфильтрации воспалительных клеток, снижение количества аутофагосом и аутофаголизосом, снижение содержания Atg5, Atg12, относительного уровня белков ULK1, Beclin-1 и соотношения LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,01), при этом повышалась экспрессия мРНК и белков PI3K, Akt, mTOR (P<0,05, P<0,01). Заключение: электрическая акупунктура точек ‘Дуби’ и ‘Цзу Саньли’ может подавлять аутофагию в синовиальной ткани, улучшать функцию коленного сустава и морфоструктуру синовиальной ткани у крыс с KOA, что, возможно, связано с активацией сигнального пути PI3K/Akt/mTOR.
关键词
остеоартрит коленного сустава;электрическая акупунктура;аутофагия;фосфатидилинозитол-3-киназа (PI3K)/протеинкиназа B (Akt)/мишень рапамицина у млекопитающих (mTOR) сигнальный путь;синовиальная оболочка