Цель исследования - изучить возможные механизмы замедления естественного угасания функции яичников у мышей с помощью прижигания иглоукалыванием (айцзю). В исследование включено 15 самок ICR SPF уровня возрастом 2 месяца для группы 2-месячного возраста; 30 самок ICR SPF уровня возрастом 10 месяцев случайным образом разделены на группу 10-месячных и группу айцзю по 15 особей в каждой. В группе айцзю через день попеременно проводили прижигание с обеих сторон точек «Шэньшу», «Чжунвань» и «Гуаньюань» по 10 минут каждый сеанс в течение 21 дня подряд. Изучали изменения циклов эструса с помощью мазков вагины, определяли содержание эстрадиола (E2), фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) и анти-мюллерова гормона (АМГ) в сыворотке методом ELISA; с помощью гематоксилин-эозинового окрашивания изучали структуру ткани яичников; методом флуоресценции и окрашивания JC-1 оценивали содержание АТФ и уровень мембранного потенциала митохондрий (MMP) в гранулезных клетках; методом количественной ПЦР в реальном времени, Western blot и иммуногистохимии определяли экспрессию мРНК и белков в сигнальных путях митохондриального ответа на не свернутые белки (UPRmt) - активатора транскрипции 5 (ATF5), протеазу ClpP и протеазу Lon (LONP1) в ткани яичников. По сравнению с группой 2 месяцев уровень нарушения цикла эструса у 10-месячных мышей повысился (P<0,01), содержание ФСГ в сыворотке увеличилось (P<0,01), а уровни E2 и АМГ снизились (P<0,01); количество фолликулов на различных стадиях значительно уменьшилось (P<0,01); содержание АТФ и уровень MMP в гранулезных клетках снизились (P<0,01); белковая и мРНК экспрессия ATF5, ClpP и LONP1 в ткани яичников, а также позитивная экспрессия снизились (P<0,01). По сравнению с 10-месячной группой в группе айцзю уровень нарушения цикла эструса снизился (P<0,01), содержание ФСГ в сыворотке уменьшилось (P<0,01), уровни E2 и АМГ повысились (P<0,01); количество примордиальных, растущих и антральных фолликулов значительно увеличилось (P<0,05, P<0,01); содержание АТФ и уровень MMP в гранулезных клетках повысились (P<0,01); белковая и мРНК экспрессия ATF5, ClpP и LONP1, а также уровень позитивной экспрессии в ткани яичников увеличились (P<0,01, P<0,05). Вывод: Прижигание иглоукалыванием способно замедлить возрастное угасание функции яичников у мышей, регулировать уровни половых гормонов, механизм действия, вероятно, связан с регуляцией экспрессии сигнальных молекул UPRmt ATF5, ClpP и LONP1 и улучшением функции митохондрий гранулезных клеток.
关键词
старение яичников; функция митохондрий; прижигание иглоукалыванием; митохондриальный ответ на несвернутые белки; активатор транскрипции 5