Исследование механизма действия электропунктуры при совместном лечении мозга и кишечника у крыс с церебральной ишемией на основе пути TMAO-HMGB1/NLRP3

WU Yue-ping ,  

OUYANG Jie ,  

SONG Xiao-ge ,  

CHU Hao-ran ,  

CHEN Liang-liang ,  

DING Yi-xia ,  

摘要

Цель исследования – наблюдение за воздействием электропункции на путь триметиламин-N-оксид (TMAO) – высокомобильная группа белков B1 (HMGB1)/NOD-подобный рецептор, связанный с протеином с доменом, содержащимся в тепловом шоке 3 (NLRP3) у крыс с церебральной ишемией, а также исследование механизма совместного лечения мозга и кишечника с помощью электропунктуры. Методы: взрослые самцы крыс линии SD SPF были случайным образом разделены на группу ложной операции, модельную группу и группу электропунктуры, по 15 особей в каждой. Группа электропунктуры получала лечение в точках "Baihui", "Tianshu", "Shangjuxu", "Dazhui" один раз через день, 20 минут за сеанс, всего 14 дней. Оценка неврологического дефицита крыс проводилась по шкале Zea-Longa; объем инфаркта мозга определяли методом окраски TTC; патологические изменения в коре ишемизированного мозга и ткани кишечника исследовали с помощью HE-окраски; уровни TMAO, HMGB1, NLRP3, интерлейкина-1β (IL-1β), белка плотных контактов 1 (ZO-1) и окклюдина (Occludin) в сыворотке, кишечнике и коре мозга измеряли методом ELISA; экспрессия белков и мРНК HMGB1, NLRP3, IL-1β, ZO-1 и Occludin в ткани кишечника и коре мозга определялась методами вестерн-блот, количественной ПЦР и иммуногистохимии. Результаты: по сравнению с группой ложной операции, у модельных крыс отмечалось повышение баллов по шкале Zea-Longa и процента инфаркта мозга (P<0.01), нарушения упорядоченности нейронов в ишемической коре мозга, рыхлая структура, расширение интервалов с воспалительной инфильтрацией, разрушение слизистой кишечника, нарушение порядка желез, уменьшение количества бокаловидных клеток с воспалительной инфильтрацией; содержание TMAO, HMGB1, NLRP3 и IL-1β в сыворотке, кишечнике и коре мозга было повышено (P<0.01), уровни ZO-1 и Occludin снижены (P<0.01), уровни белка, мРНК и положительной экспрессии HMGB1, NLRP3, IL-1β увеличены, а ZO-1 и Occludin снижены (P<0.01). По сравнению с модельной группой, в группе электропунктуры снижались баллы Zea-Longa и процент инфаркта (P<0.01), нейроны коры мозга располагались более упорядоченно, форма была более целостной, воспалительная инфильтрация уменьшена, эпителиальные клетки слизистой кишечника более сохранны, структура желез улучшена, воспалительная инфильтрация снижена; уровни TMAO, HMGB1, NLRP3 и IL-1β в сыворотке, кишечнике и коре снижены (P<0.01), ZO-1 и Occludin повышены (P<0.01), уровни белка, мРНК и выраженность HMGB1, NLRP3, IL-1β снижены, а ZO-1, Occludin – повышены (P<0.01). Заключение: совместное лечение мозга и кишечника с применением электропунктуры снижает содержание метаболита кишечной флоры TMAO, понижает экспрессию HMGB1/NLRP3 в кишечной ткани, уменьшает периферические воспалительные факторы и тем самым смягчает воспалительную реакцию в мозговой ткани крыс после MCAO.

关键词

церебральная ишемия; электропунктура; крысы; совместное лечение мозга и кишечника; воспалительная реакция; путь TMAO-HMGB1/NLRP3

阅读全文