Electroacupuncture improves intestinal motility and visceral sensitivity in mice with functional constipation via upregulating Piezo1/2 channel activity of enterochromaffin cells
Целью данного исследования было изучение воздействия электроигловой терапии на улучшение моторики кишечника и чувствительности у мышей мужского пола с функциональной запорной болезнью, а также механизма регуляции канала Piezo у клеток Маркиев. Методы: 30 мышей мужского пола C57 были случайным образом разделены на нормальную группу, модельную группу и группу электроигловой терапии, по 8 мышей в каждой группе. Модель функциональной запорной болезни была построена внутриротовым введением гидрохлорида лорикеридина. Группа электроигловой терапии получала игловое воздействие на точки Тианшу и Гуоксю-верхнюю большую печень (1 мА, 2/15 Гц, 20 мин/раз, 1 раз/день), альтернирующую стимуляцию слева направо, 5 дней вместе с 2-дневным отдыхом, всего 10 дней. Проверка выгрузки калов в каждой группе мышей, моторики кишечника и чувствительности толстой кишки; наблюдение ультроструктуры клеток Маркиев трансмиссионным микроскопом; определение экспрессии Piezo1/2 в толстой кишке и клетках Маркиев с помощью методов иммунофлюоресцентной окраски, иммуноблотирования и количественно-транспективной полимеразной цепной реакции в реальном времени; определение содержания 5-HT и Ca2+ в сыворотке и толстой кишке методом ELISA. Результаты: По сравнению с нормальной группой, число каловых гранул, оценочный балл состояния и влажность калов у модельной группы снизились (P< 0,01, P< 0,001, P< 0,05), время первой каловой хрупкой слизистой и порог болевой чувствительности увеличились (P< 0,01), скорость перекачки тонкого кишечника и оценочный балл уходящего рефлекса брюшной стенки (AWR) уменьшились (P< 0,01, P< 0,05); у клеток Маркиев произошел отек митохондрий, уменьшение количества высвобождаемых гранул; уровни 5-HT и Ca2+ в сыворотке и толстой кишке уменьшились (P< 0,01, P< 0,001); уровни экспрессии белка Piezo1/2 и mRNA в толстой кишке и клетках Маркиев снизились (P< 0,001), площадь положительного Piezo1/2 белка и клетки Маркиев, а также коэффициент совместного распределения Piezo1/EC, Piezo2/EC уменьшились (P< 0,01, P< 0,05, P< 0,001). По сравнению с модельной группой, число каловых гранул, оценочный балл состояния и её влажность у группы электроигловой терапии увеличились (P< 0,05, P< 0,001, P< 0,01), время первой каловой хрупкой слизистой и порог болевой чувствительности уменьшились (P< 0,01, P< 0,05), скорость перекачки тонкого кишечника и оценочный балл уходящего рефлекса брюшной стенки увеличились (P< 0,05, P< 0,01); в результате микроскопического экамена наблюдался отек митохондрий у клеток Маркиев, уменьшение количества высвобождаемых гранул; у тех частиц структуры митохондрий клеток Маркиев, которые восстановились, количество высвобождаемых гранул увеличилось, уровни 5-HT и Ca2+ в сыворотке и толстой кишке увеличились (P< 0,05); уровни экспрессии белка Piezo1/2 и mRNA в толстой кишке и клетках Маркиев увеличились (P< 0,001), площадь положительного Piezo1/2 белка и клетки Маркиев, а также коэффициент совместного распределения Piezo1/EC, Piezo2/EC увеличились (P< 0,01, P< 0,05, P< 0,001). Выводы: Электроигловая терапия возможно за счет увеличения экспрессии каналов Piezo1/2 в клетках Маркиев, стимулирования внутриклеточного притока кальция и выхода 5-HT, улучшает моторику кишечника и чувствительность внутренних органов у мышей с функциональным запором, что в свою очередь улучшает функциональную запорную болезнь.