Влияние электроиглоукалывания на поляризацию микроглии и сигнальный путь α7nAChR-TLR4/MyD88/NF-κB в передней поясной коре у крыс с хронической воспалительной болью и сопутствующей депрессией
Цель исследования — изучить влияние электроиглоукалывания на поляризацию микроглии в передней поясной коре (ACC) у крыс с хронической воспалительной болью, сопутствующей депрессии (CIPDC), через сигнальный путь α7 никотинового ацетилхолинового рецептора (α7nAChR)-TLR4/ядерного фактора κB (NF-κB) и исследовать центральный механизм обезболивания и антидепрессантного действия электроиглоукалывания. Методы: 45 самцов крыс SD SPF класса случайным образом разделены на контрольную группу, группу модели и группу с электроиглоукалыванием по 15 в каждой. Модель CIPDC создана путем инъекции полного адъюванта Фрейнда в подошву. На 14-й день после моделирования группе электроиглоукалывания проводили интервенцию — 20 мин ежедневно в течение 14 дней подряд. На 0-й, 14-й и 28-й дни после моделирования оценивали болевое поведение с помощью пороговой механической реакции (MWT) и латентного времени теплового рефлекса (TWL); оценивали депрессивное поведение через тест предпочтения сладкой воды, принудительного плавания и открытого поля; с помощью окрашивания гематоксилином и эозином (HE) изучали морфологию ACC; определяли уровни факторов TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-4, IL-10 в ACC методом ELISA; иммунофлуоресцентным двойным окрашиванием выявляли экспрессию маркеров микроглии M1 (CD86/Iba-1) и M2 (CD206/Iba-1); методом вестерн-блот выявляли уровни белков α7nAChR, TLR4, MyD88, NF-κB p65 и фосфорилированного p-NF-κB p65. Результаты: по сравнению с контролем в группе модели снижались MWT, TWL, индекс сладкой преференции, общая дистанция и время в центре в открытом поле (P<0.05), увеличивалось время неподвижности в тесте принудительного плавания (P<0.05); в ACC наблюдалась дезорганизация, значительное сжатие и интенсивное окрашивание нейронов, наличие вакуолей и нейрофибриллярных переплетений; существенно повышались уровни TNF-α, IL-1β, IL-6 (P<0.05), а IL-4, IL-10 снижались (P<0.05); выраженность CD86/Iba-1 (микроглия M1) значительно увеличилась, CD206/Iba-1 (микроглия M2) уменьшилась (P<0.05); снижался белок α7nAChR (P<0.05), увеличивались TLR4, MyD88, p-NF-κB p65 и отношение p-NF-κB p65/NF-κB p65 (P<0.05). По сравнению с группой модели у группы с электроиглоукалыванием MWT, TWL, индекс сладкой преференции, общая дистанция в открытом поле и время в центре значительно повышались (P<0.05), время неподвижности в тесте принудительного плавания резко снижалось (P<0.05); ACC имел незначительное сжатие и интенсивное окрашивание нейронов, уменьшались промежутки между нейронами и тканью; уровни TNF-α, IL-1β, IL-6 значительно снижались (P<0.05), IL-4, IL-10 значительно повышались (P<0.05); CD86/Iba-1 заметно уменьшался, CD206/Iba-1 существенно увеличивался (P<0.05); α7nAChR белок выражался значительно выше (P<0.05), TLR4, MyD88, p-NF-κB p65 и отношение p-NF-κB p65/NF-κB p65 значительно снижались (P<0.05). Заключение: электроиглоукалывание оказывает центральный "обезболивающий и антидепрессантный" эффект на крыс CIPDC, возможно, через поляризацию микроглии в ACC, опосредованную сигнализацией α7nAChR-TLR4/MyD88/NF-κB, что снижает центральное воспаление и уменьшает повреждение нейронов ACC.
关键词
электроиглоукалывание; хроническая воспалительная боль и сопутствующая депрессия; сигнальный путь α7nAChR-TLR4/MyD88/NF-κB; поляризация микроглии; передняя поясная кора; воспалительная реакция