Целью исследования было наблюдение за эффектом электропунктуры на точке "Цзу Сан Ли" в контроле уровня глюкозы в крови у мышей с острым гипергликемическим состоянием, а также у мышей с преддиабетом низкого и высокого риска, а также первоначальное изучение механизмов воздействия электропунктуры на функцию β-клеток островков Лангерганса при преддиабете низкого риска. Методика: исследование состоит из трёх частей – острый гипергликемический эксперимент, эксперимент с преддиабетом низкого риска и эксперимент с преддиабетом высокого риска, в каждом эксперименте мышей C57BL/6J случайным образом разделяли на нормальную группу, модельную группу и группу электропунктуры. В остром гипергликемическом и высокорисковом экспериментах – по 6 мышей в каждой группе, а в эксперименте с преддиабетом низкого риска – по 18 мышей на группу. В остром гипергликемическом эксперименте модель создавали с помощью внутриполостного введения 2 г/кг раствора глюкозы; мышам группы электропунктуры однократно проводили электропунктуру двусторонней точки "Цзу Сан Ли" в течение 20 минут. В эксперименте с преддиабетом низкого риска модель создавали, кормя животных высокожирной диетой в течение 1 недели; начиная с 4-го дня, когда уровень глюкозы достиг критериев нарушенного гликемического контроля, проводили воздействие электропунктуры один раз в день, всего 4 раза с теми же параметрами. В эксперименте с преддиабетом высокого риска модель формировали с помощью 8-недельного кормления высокожирной диетой; спустя 4 недели начинали электропунктуру три раза в неделю, всего 12 сеансов, параметры те же. Измеряли уровень глюкозы и толерантность к глюкозе с помощью глюкометра; определяли содержание HbA1c, инсулина и глюкагона в сыворотке методом иммуноферментного анализа; оцениали морфологические изменения поджелудочной железы с помощью гистологического окрашивания HE; выделяли β-клетки островков и исследовали экспрессию маркеров β-клеток методом ПЦР; исследовали уровни белков, связанных с эндоплазматическим стрессом (ATF6, ERN1, EIF2AK3), клеточным старением (P21) и ацетилхолиновыми рецепторами (M2-AchR, M3-AchR) методом Вестерн-блот; определяли экспрессию маркеров старения (P21) в ткани поджелудочной железы и ацетилхолинэргических нейронов, управляющих поджелудочной в ганглиях поджелудочной и дорзальном ядре блуждающего нерва (DMV) с помощью иммунофлуоресценции и выявляли положительную экспрессию c-fos. Результаты: в эксперименте с острым гипергликемическим состоянием уровень глюкозы был повышен в модельной группе по сравнению с нормальной (P<0.001), содержание инсулина в сыворотке также увеличилось (P<0.05); в группе электропунктуры по сравнению с модельной группой уровень глюкозы снижался через 30 и 60 минут (P<0.01), одновременно содержание инсулина в сыворотке увеличилось (P<0.05). В эксперименте с преддиабетом низкого риска по сравнению с нормальной группой наблюдалось повышение глюкозы на третий день (P<0.001) и толерантности к глюкозу (P<0.05, P<0.01), уровень белков ацетилхолиновых рецепторов M2-AchR и M3-AchR β-клеток был снижен (P<0.05), выраженность белков ATF6, ERN1, EIF2AK3 была повышена (P<0.01, P<0.05), уровень P21 увеличился (P<0.05), количество Insulin⁺/P21⁺ колокализационных клеток возросло (P<0.01). По сравнению с модельной группой в группе электропунктуры наблюдалось снижение уровня глюкозы на 4-й, 6-й и 7-й дни (P<0.001, P<0.01), снижение толерантности к глюкозе (P<0.05, P<0.01), повышение содержания инсулина в сыворотке (P<0.05), увеличение количества ChAT⁺/c-fos⁺ нейронов в ганглиях поджелудочной и DMV (P<0.05), повышение уровня белков ацетилхолиновых рецепторов M2-AchR и M3-AchR (P<0.01, P<0.05), снижение уровня белков ATF6, ERN1, EIF2AK3 (P<0.01, P<0.05), уменьшение уровня P21 (P<0.05), уменьшение количества Insulin⁺/P21⁺ клеток (P<0.01). В эксперименте с преддиабетом высокого риска по сравнению с нормальной группой уровень глюкозы через неделю был повышен (P<0.001), толерантность к глюкозе возросла (P<0.05, P<0.01), HbA1c был повышен (P<0.05), увеличился объем островков, повысилось содержание инсулина в сыворотке (P<0.01), содержание глюкагона снизилось (P<0.05). По сравнению с модельной группой в группе электропунктуры наблюдалось снижение глюкозы на 5-й и 6-й неделях (P<0.01, P<0.05), небольшое уменьшение объёма островков, а также снижение содержания инсулина и глюкагона в сыворотке (P<0.01, P<0.05). Заключение: электропунктура на точке "Цзу Сан Ли" может восстанавливать гомеостаз глюкозы с оптимальным эффектом на стадии преддиабета низкого риска, механизм связанный с активацией блуждающего нерва и подавлением эндоплазматического стресса β-клеток островков.

электропунктура; Цзу Сан Ли; преддиабет; блуждающий нерв; эндоплазматический стресс