Исследование механизма регуляции иглоукалывания в области головы сигнального пути cAMP/PKA/CREB и улучшения синаптической пластичности гиппокампа у мышей APP/PS1

GAO Wei ,  

LI Xue ,  

LIU An-nan ,  

LI Jian-hui ,  

YE Qiu-yan ,  

HUANG Ying ,  

YANG Feng-ge ,  

SONG Jing ,  

XING Li-ping ,  

LI Hong-lin ,  

摘要

Цель - наблюдать влияние иглоукалывания в области головы на синаптическую пластичность гиппокампа у мышей APP/PS1 и исследовать возможные механизмы улучшения болезни Альцгеймера (БА) через сигнальный путь циклического аденозинмонофосфата (цАМФ)/протеинкиназы А (PKA)/протеина, связывающего элемент ответа на цАМФ (CREB). Методика: самцы трансгенных мышей APP/PS1 были случайным образом разделены на модельную группу, группу иглоукалывания и группу ложного иглоукалывания (по 12 в каждой), 12 мышей линии C57BL/6 того же происхождения служили контролем. Группа иглоукалывания получала терапию в области головы, ложная группа - иглоукалывание в неакупунктурные точки под обеими подмышками, по 30 мин один раз в день в течение 28 дней. Использовали водный лабиринт Морриса и лабиринт Барнса для оценки обучаемости, памяти и когнитивных функций, иммуногистохимическое окрашивание для выявления отложений амилоида-β (Aβ) в гиппокампе, окрашивание по Нисслю для подсчёта нейронов в зоне CA1 гиппокампа, электронную микроскопию для изучения ультраструктуры синапсов, окрашивание по Гольджи для выявления плотности дендритных шипиков, вестерн-блоттинг для анализа экспрессии белков cAMP, PKA, CREB, фосфорилированного (p)-CREB, PSD-95 и SYN1 в гиппокампе. Результаты: по сравнению с контролем, в модельной группе у мышей увеличилась латентность избегания в водном лабиринте Морриса, сократилось количество пересечений исходной платформы (P<0,01), значительно увеличилась латентность входа в целевое отверстие в лабиринте Барнса (P<0,01), сократилось время пребывания в целевом квадранте и количество правильных входов (P<0,001), увеличилась площадь положительной экспрессии Aβ (P<0,001), наблюдалось серьёзное повреждение нейронов и синаптических структур в зоне CA1 гиппокампа, снижались количество нейронов и плотность дендритных шипиков (P<0,01), экспрессия белков cAMP, PKA, PSD-95, SYN1 и отношение p-CREB/CREB значительно уменьшались (P<0,01); по сравнению с модельной группой, у группы иглоукалывания латентность избегания в водном лабиринте Морриса сократилась, количество пересечений увеличилось (P<0,01), латентность входа в целевое отверстие в лабиринте Барнса значительно снизилась, время пребывания в целевом квадранте и количество правильных входов увеличились (P<0,001), площадь положительной экспрессии Aβ уменьшилась (P<0,001), произошли улучшения нейронной и синаптической структур зоны CA1, количество нейронов и плотность дендритных шипиков увеличились (P<0,01), экспрессия белков cAMP, PKA, PSD-95, SYN1 и отношение p-CREB/CREB значительно выросли (P<0,01). В группе ложного иглоукалывания не было статистически значимых отличий по сравнению с модельной группой. Заключение: иглоукалывание в области головы может улучшать синаптическую пластичность гиппокампа у мышей APP/PS1 через регуляцию сигнального пути cAMP/PKA/CREB, тем самым улучшая когнитивные функции у мышей с БА.

关键词

иглоукалывание в области головы;болезнь Альцгеймера;cAMP/PKA/CREB путь;синаптическая пластичность

阅读全文