Влияние электроиглотерапии «Цзу Сань Ли» на повреждение слизистой толстой кишки у мышей с трансплантатом колоректального рака после химиотерапии 5-FU и её влияние на белки NF-κB и AQP8
Цель - наблюдать влияние электроиглотерапии точки «Цзу Сань Ли» на повреждение слизистой оболочки толстой кишки у мышей с трансплантатом колоректального рака после химиотерапии 5-фторурацилом (5-FU), а также на белки ядерного фактора κB (NF-κB) и водных каналов 8 (AQP8), и изучить возможный механизм действия. Метод. Использовали мышей BALB/c с подкожной инъекцией клеточной линии колоректального рака CT26 для создания модели трансплантата. При размере опухоли 100~300 мм3 мышей с успешной моделью рандомизировали на группу с опухолью, группу химиотерапии и группу химиотерапии с электроиглотерапией, по 6 мышей в каждой. Дополнительно взяли 6 нормальных мышей BALB/c как контрольную группу. Группы химиотерапии и химиотерапии с электроиглотерапией начали внутриперитонеальное введение 5-FU (50 мг/кг, 0,01 мл/г) один раз в день в течение 5 дней; группе с электроиглотерапией ежедневно после химиотерапии проводили электроиглы на обеих сторонах точки «Цзу Сань Ли» с непрерывной волной, частотой 2 Гц, интенсивностью 1~2 мА, по 5 минут за сеанс, в течение 5 дней подряд. В ходе эксперимента ежедневно оценивали индекс активности заболевания (DAI); измеряли объем опухоли; после забора тканей измеряли массу опухоли и длину толстой кишки; методом HE окрашивания изучали морфологию ткани толстой кишки; ELISA использовали для определения содержания диаминоксидазы (DAO) и D-молочной кислоты (D-LA) в сыворотке; иммуногистохимия для оценки экспрессии белка AQP8 в толстой кишке; иммунная флуоресценция для определения ядерной транслокации NF-κB; Вестерн-блоттинг для определения уровней экспрессии NF-κB и AQP8. Результаты. По сравнению с контрольной группой в группе с опухолью статистически значимых различий показателей не было. По сравнению с группой с опухолью в группе химиотерапии повысился балл DAI (P<0.05), уменьшилась длина толстой кишки, объем и масса опухоли (P<0.05), увеличилось содержание DAO и D-LA в сыворотке (P<0.05), усилилась экспрессия и ядерная транслокация NF-κB (P<0.05), снизился уровень экспрессии AQP8 (P<0.05). По сравнению с группой химиотерапии в группе химиотерапии с электроиглотерапией снизились балл DAI и уровни DAO и D-LA (P<0.05), уменьшилась экспрессия и ядерная транслокация NF-κB (P<0.05), повысилась экспрессия AQP8 (P<0.05). Окраска HE показала, что структура ткани толстой кишки в контрольной и группе с опухолью была нормальной, а в группе химиотерапии наблюдалось повреждение ткани толстой кишки – разрушение крипт, воспалительное инфильтрирование; по сравнению с группой химиотерапии в группе химиотерапии с электроиглотерапией увеличилась длина ворсинок, улучшилось расположение клеток ткани, уменьшилось воспалительное инфильтрирование. Заключение. Электроиглотерапия «Цзу Сань Ли» может ингибировать чрезмерную активацию сигнального пути NF-κB, повышать экспрессию AQP8, уменьшать повреждение слизистой оболочки кишечника, снижать выделение DAO и D-LA, поддерживая функцию кишечного барьера.