Электроакупунктура «Цзу Сан Ли» облегчает повреждение слизистой толстой кишки у мышей с трансплантатом колоректального рака после химиотерапии 5-ФУ и влияет на белки NF-κB и AQP8
Цель исследования - наблюдение влияния электроакупунктуры точки «Цзу Сан Ли» на повреждение слизистой оболочки толстой кишки у мышей с трансплантатом колоректального рака после химиотерапии 5-фторурацилом (5-ФУ), а также на белки фактор транскрипции NF-κB и аквапорин 8 (AQP8) и изучение возможных механизмов действия. В качестве модели использовали мышей BALB/c, которым подкожно вводили клетки колоректального рака линии CT26 для создания трансплантированного опухолевого модельного животного. При достижении объема опухоли 100-300 мм³ мыши с успешным внедрением опухоли случайным образом разделяли на группы: контрольную с опухолью, группу химиотерапии и группу химиотерапии с электроакупунктурой, по 6 животных в каждой. Еще 6 нормальных мышей BALB/c использовали как контрольную группу. В группах химиотерапии и химиотерапии с электроакупунктурой в день распределения животных начинали внутриперитонеальное введение раствора 5-ФУ (50 мг/кг, 0.01 мл/г), один раз в день на протяжении 5 дней; группе с электроакупунктурой дополнительно проводили электроакупунктуру на двух сторонах точки «Цзу Сан Ли» с непрерывной волной, частотой 2 Гц, силой тока 1-2 мА, по 5 минут за сеанс, в течение 5 дней. В ходе эксперимента ежедневно оценивали индекс активности болезни (DAI); во время вмешательства ежедневно измеряли объем опухоли, после взятия образцов измеряли массу опухоли и длину толстой кишки; гистологически изучали структуру толстой кишки методом гематоксилин-эозин (HE); методом ELISA определяли содержание диаминоксидазы (DAO) и D-молочной кислоты (D-LA) в сыворотке; иммуногистохимическим методом исследовали экспрессию AQP8 в толстой кишке; иммуннофлюоресцентным методом изучали ядерную транслокацию NF-κB; методом вестерн-блот анализировали уровень экспрессии белков NF-κB и AQP8. По сравнению с нормальной группой в группе с опухолью статистически значимых различий не выявлено. По сравнению с группой с опухолью в группе химиотерапии повышался балл DAI (P<0,05), уменьшалась длина толстой кишки, объем и масса опухоли (P<0,05), повышалось содержание DAO и D-LA в сыворотке (P<0,05), увеличивались экспрессия и ядерная транслокация NF-κB (P<0,05), снижалась экспрессия белка AQP8 (P<0,05). По сравнению с группой химиотерапии у группы химиотерапии с электроакупунктурой снижались балл DAI и содержание DAO и D-LA (P<0,05), экспрессия и ядерная транслокация NF-κB снижались (P<0,05); уровень экспрессии белка AQP8 повышался (P<0,05). Результаты HE-окраски показали, что структура толстой кишки в нормальной и опухолевой группах не нарушена, тогда как у животных группы химиотерапии отмечено повреждение структуры крипт, воспалительная инфильтрация и патология ткани толстой кишки; в группе химиотерапии с электроакупунктурой увеличивалась длина ворсинок, улучшалась дезорганизация клеточного строения и уменьшалось воспалительное инфильтрирование по сравнению с группой химиотерапии. Выводы: электроакупунктура точки «Цзу Сан Ли» способна подавлять избыточную активацию сигнального пути NF-κB, повышать экспрессию белка AQP8, снижать повреждения слизистой оболочки кишечника, уменьшать выделение DAO и D-LA и таким образом поддерживать барьерную функцию кишечника.