Исследование механизма электропунктуры по улучшению моторики толстой кишки у мышей с язвенным колитом на основе циклически-нуклеотидно-зависимого канала катионов

Li Sihui ,  

Huang Qianhui ,  

Huang Qin ,  

Wu Qiaofeng ,  

Yu Shuguang ,  

摘要

Целью исследования было наблюдение механизма улучшения колонической моторики у мышей с язвенным колитом (ЯК) посредством электропунктуры на точке "Шанцзюй" через циклически-нуклеотидно-зависимый канала катионов 2 (HCN2). Методы: самцы мышей C57BL/6J случайным образом разделены на контрольную, модельную и электропунктурную группы по 8 особей в каждой; модель ЯК создавалась с использованием питьевого раствора сульфата декстранa. Электропунктурная группа получала лечение на точке "Шанцзюй" каждый день по 20 минут в течение 7 дней. Рассчитывали изменение массы тела, оценивали индекс активности заболевания (DAI); гистологическое исследование тканей толстой кишки с окраской HE; электрофизиологические исследования in vivo и ex vivo для определения моторной активности толстой кишки; сравнивали время транзита по толстой кишке и скорость перистальтики; иммуногистохимия для определения экспрессии HCN2, 5-гидрокситриптамина (5-HT), триптофан гидроксилазы (TPH1) и транспортера 5-HT (SERT); количественный ПЦР и вестерн-блот для измерения уровня mRNA и белка TPH1 и SERT. Мыши Vil1MerCreMer были рандомизированы на группу носителей и индуцированную группу по 8 особей в каждой. У мышей Vil1MerCreMer была условно удалена экспрессия гена HCN2 в кишечном эпителии. Индуцированная группа получала инъекции тамоксифена (5 мг/мл). Тест ELISA использовался для измерения уровней 5-HT и циклических нуклеотидов (cAMP) в сыворотке крови мышей Vil1MerCreMerHCN2fl/fl. Клетки RIN-14B делились на нормальную группу и группу с трансфекцией, в которой подавлялась экспрессия HCN2. С помощью ELISA определяли уровни 5-HT и cAMP в супернатанте клеток. Реальный количественный ПЦР определял уровни мРНК HCN2 и TPH1 в клетках RIN-14B. Результаты показали, что по сравнению с контрольной группой в модельной группе состояние животных ухудшалось, наблюдалось значительное увеличение изменения веса тела и рост DAI (P<0,001), нарушение структуры слизистой толстой кишки с отёком и выраженным воспалительным инфильтратом, повышенные патологические баллы (P<0,001); частота, амплитуда и площадь под кривой моторики толстой кишки снижались в in vivo и ex vivo (P<0,001), время колонического транзита удлинялось, а скорость продвижения содержимого снижалась (P<0,001); экспрессия HCN2 в толстой кишке увеличивалась (P<0,001) и локализовалась совместно с 5-HT; экспрессия 5-HT, TPH1 и SERT была повышена (P<0,001). Электропунктура могла обратить эти изменения (P<0,001, P<0,01, P<0,05). После условного удаления HCN2 в кишечном эпителии уровни 5-HT и cAMP в сыворотке индуцированной группы снижались (P<0,001). Подавление HCN2 в клетках RIN-14B приводило к снижению экспрессии мРНК HCN2 и TPH1 (P<0,001) и уровня 5-HT и cAMP в супернатанте (P<0,001). Заключение: электропунктура на точке "Шанцзюй" возможно регулирует экспрессию HCN2 в кишечных хромаффинных клетках, влияя на секрецию 5-HT и улучшая моторику кишечника у мышей с ЯК.

关键词

электропунктура; язвенный колит; моторика толстой кишки; кишечные хромаффинные клетки; циклически-нуклеотидно-зависимый канал катионов 2; 5-гидрокситриптамин

阅读全文

以上内容由讯飞翻译自动生成,翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果,本网站不承担任何商业和法律责任。

The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website