Целью исследования было изучение потенциального механизма улучшения иглоукалыванием снижения функции яичников, вызванного лишением сна (SD), у мышей за счет регуляции сигнального пути циклического аденозинмонофосфата (cAMP) на основе транскриптомики. Методы: самок мышей C57BL/6 с регулярным эструсным циклом случайным образом разделили на контрольную группу, группу SD и группу иглоукалывания по 15 животных в каждой. Контрольная группа соблюдала нормальный режим в течение 6 недель; группы SD и иглоукалывания подвергались 20-часовому лишению сна ежедневно с 16:00 до 12:00 следующего дня в течение 6 недель подряд; с 4-й недели группа иглоукалывания получала лечение на точках "Байхуй", "Саньиньцзяо", "Гуаньюань" вне времени SD, по 20 минут за сеанс, 6 дней в неделю, 3 недели подряд. Изменения эструсного цикла определяли с помощью цитологического мазка вагинальных клеток; измеряли массу тела, влажную массу яичников, рассчитывали индекс яичников; морфологию яичников исследовали с помощью гематоксилин-эозинового окрашивания; содержание в сыворотке крови факторов фолликулостимулирующего гормона (FSH), лютеинизирующего гормона (LH), антимюллерова гормона (AMH), эстрадиола (E2) и уровень cAMP в тканях яичников определяли методом ELISA; с помощью транскриптомики выявляли дифференциально экспрессируемые гены (DEG) в тканях яичников различных групп и проводили функциональный анализ; изменения экспрессии мРНК рецептора фолликулостимулирующего гормона (FSHR), связывающего белка элемента cAMP (CREB1), каталитической субъединицы протеин киназы A альфа (PRKACA) и аденилатциклазы 5 (ADCY5) в тканях яичников оценивали с помощью количественной ПЦР в реальном времени и вестерн-блоттинга соответственно. Результаты: по окончании лечения, по сравнению с контрольной группой, в группе SD наблюдалось увеличение частоты нарушения эструсного цикла (P < 0.01); уменьшение массы тела, влажной массы яичников и индекса яичников (P < 0.01); разрушение морфологической структуры яичников с увеличением числа атретичных фолликулов; увеличение содержания FSH и LH в сыворотке (P < 0.01) и снижение уровней AMH и E2 (P < 0.01). По сравнению с группой SD, в группе иглоукалывания частота нарушения эструсного цикла уменьшилась (P < 0.01); масса тела, влажная масса яичников и индекс яичников увеличились (P < 0.01); улучшилась патологическая структура яичников, снизилось количество атретичных фолликулов; содержание FSH и LH в сыворотке уменьшилось (P < 0.01), а уровни AMH и E2 повысились (P < 0.01). В транскриптомике было идентифицировано 173 DEG с тенденцией обратного регулирования, функциональный анализ показал, что данные DEG участвуют преимущественно в биологических процессах, таких как реакции на другие организмы; локализованы в основном вне клеток и связаны с молекулярными функциями, такими как активность 2’-5’ олигоаденилатсинтазы. Анализ геномных баз данных показал, что DEG участвуют главным образом в сигнальном пути cAMP; генная наборная обогащающая анализа показала, что сигнальный путь cAMP подавлен в группе SD и активирован в группе иглоукалывания. По сравнению с контрольной группой, в группе SD уровень cAMP в яичниках, экспрессия мРНК FSHR, CREB1, ADCY5 и PRKACA, уровни белков FSHR, ADCY5, PRKACA и соотношение фосфорилированного (p)-CREB1/CREB1 значительно снижались (P < 0.01). По сравнению с группой SD, в группе иглоукалывания уровни cAMP в яичниках, экспрессия мРНК FSHR, CREB1, ADCY5, PRKACA, уровни белков FSHR, ADCY5, PRKACA и соотношение p-CREB1/CREB1 значительно повышались (P < 0.01, P < 0.05). Заключение: иглоукалывание может улучшить снижение функции яичников, вызванное лишением сна, возможный механизм связан с регуляцией экспрессии ключевых молекул CREB1, FSHR, ADCY5 и PRKACA в сигнальном пути cAMP.

Иглоукалывание; лишение сна; снижение функции яичников; транскриптомика; дифференциально экспрессируемые гены; сигнальный путь циклического аденозинмонофосфата