Целью исследования было изучение регулирующего действия электропунктуры на белок Piezo1 у крыс с корешковым шейным спондилезом (CSR) и влияние на сигнальный путь оксида азота (NO)/циклического гуанозинмонофосфата (cGMP)/протеинкиназы G (PKG), а также изучение механизма обезболивания электропунктурой. Методы: самцов крыс СД случайным образом разделили на группу ложной операции, группу моделирования, группу электропунктуры и группу электропунктуры + Yoda1 по 10 особей в каждой. Модели CSR у крыс в группах моделирования, электропунктуры и электропунктуры + Yoda1 создавали с помощью метода введения нити в спинномозговой канал. Группа электропунктуры подвергалась лечению на двухсторонних точках "Хэгу" и "Тайчун" с использованием электропунктуры по 20 мин за сеанс, 1 раз в день в течение 7 дней подряд; в группе электропунктуры + Yoda1 вводили интраперитониально агонист Piezo1 Yoda1 (1,5 мг/кг) перед электропунктурой. Перед и после вмешательства оценивали походку крыс, порог механического сокращения лапы и латентный период теплового сокращения лапы; окрашивание HE применяли для наблюдения патологических изменений в ткани спинного мозга; методом qPCR определяли уровень экспрессии гена Piezo1 в ткани спинного мозга; двойное флуоресцентное иммунное окрашивание применяли для обнаружения экспрессии Piezo1 и кальмодулина (CaM) в ткани спинного мозга; методом вестерн-блоттинга выявляли уровни белков CaM, нейрональной оксида азота синтазы (nNOS), растворимой гуанилатциклазы (sGC) и PKG1; методом ELISA измеряли содержание cGMP в ткани спинного мозга; содержание NO определяли с помощью нитритового колориметрического метода. Результаты: по сравнению с группой ложной операции в группе моделирования до вмешательства был повышен балл ходьбы крыс (P<0.01), снижены порог механического сокращения и латентный период теплового сокращения (P<0.01); в ткани спинного мозга группы моделирования значительно увеличивались уровни мРНК Piezo1, интенсивность иммунной флуоресценции Piezo1 и CaM и степень их ко-локализации, относительный уровень экспрессии белков CaM, nNOS, sGC, PKG1, содержание cGMP и NO (P<0.01); при окрашивании HE в ткани спинного мозга группы моделирования наблюдались сморщивание нейронов, усиленное окрашивание клеток, нечеткие границы между ядром и цитоплазмой, пролиферация глиальных клеток, повышение клеточной плотности, расширение мелких сосудов и кровоизлияния. В сравнении с группой моделирования в группе электропунктуры снижался балл ходьбы (P<0.01), повышались порог механического сокращения и латентный период теплового сокращения (P<0.01); снижался уровень экспрессии Piezo1 мРНК, интенсивность и ко-локализация иммунофлуоресценции Piezo1 и CaM, относительный уровень белков CaM, nNOS, sGC, PKG1, содержание cGMP и NO в ткани спинного мозга (P<0.01); окрашивание HE показало отдельные сморщенные нейроны, уменьшение расширения мелких сосудов и пролиферации глиальных клеток по сравнению с группой моделирования. По сравнению с группой электропунктуры в группе электропунктуры + Yoda1 латентный период теплового сокращения был короче (P<0.01); уровни экспрессии Piezo1 мРНК, интенсивность и ко-локализация иммунофлуоресценции Piezo1 и CaM, относительный уровень белков CaM, nNOS, sGC, PKG1, содержание cGMP и NO повышались (P<0.05, P<0.01); окрашивание HE показало сморщивание нейронов, увеличение количества глиальных клеток и частичное расширение мелких сосудов с кровоизлияниями. Заключение: электропунктура эффективно облегчает боль у крыс с CSR, возможно, за счет подавления активации белка Piezo1 в спинном мозге и ингибирования сигнального пути NO/cGMP/PKG, реализуя обезболивающий эффект.

корешковый шейный спондилез;электропунктура;обезболивание;белок Piezo1