Целью является изучение влияния вмешательства с помощью электроакупунктуры на сигнальный путь гипоксически индуцируемого фактора 1α (HIF-1α)/двуфункционального фермента фосфофруктокиназы 3 (PFKFB3) в гиппокампе мышей с болезнью Альцгеймера (AD), а также регуляция функции гликолиза и исследование возможного механизма улучшения когнитивных нарушений. В качестве модели AD использовали трансгенных мышей APP/PS1, которые были случайным образом разделены на группу модели, группу электроакупунктуры и группу электроакупунктуры + диметилоксималонимид (DMOG), по 6 особей в каждой; дополнительно использовали 6 мышей C57BL/6J такого же возраста в качестве контроля. В группе электроакупунктуры проводили иглоукалывание в точке "Байхуй" и с на стороне "Шэньшу" и "Цзу Санли" с применением электроакупунктуры, каждый сеанс длился 20 минут, один раз через день, всего 4 недели; в группе электроакупунктуры + DMOG после каждого электроакупунктурного сеанса на 4-й неделе через 30 минут вводили DMOG интраперитониально (50 мг/кг). Функцию когнитивных способностей мышей оценивали с помощью водного лабиринта Морриса и теста распознавания новых объектов, гистологическим окрашиванием HE изучали структурные изменения гиппокампа, иммуногистохимическим методом определяли депозицию бета-амилоида (Aβ1-42); методом ELISA измеряли содержание пируваткиназы М2 (PKM2) и лактатдегидрогеназы А (LDHA) в гиппокампе; биохимическими методами оценивали активность гексокиназы (HK) и содержание лактата; с помощью количественной ПЦР в реальном времени определяли уровни мРНК HIF-1α, PFKFB3, HK, PKM2, LDHA; методом вестерн-блоттинг измеряли уровни белков HIF-1α и PFKFB3; иммунофлуоресцентным окрашиванием оценивали экспрессию LDHA. По сравнению с контрольной группой, в группе модели наблюдалось удлинение латентного периода избегания, уменьшение числа пересечений платформы и снижение индекса распознавания новых объектов (P < 0.01), аномалии формы нейронов гиппокампа, увеличение депозиции Aβ1-42 (P < 0.01), повышение активности HK, уровней PKM2, LDHA и лактата в гиппокампе (P < 0.01), повышение уровней белков HIF-1α и PFKFB3, а также экспрессии мРНК HIF-1α, PFKFB3, HK, PKM2 и LDHA, увеличение интенсивности флуоресценции LDHA (P < 0.01). По сравнению с модельной группой, в группе электроакупунктуры наблюдалось снижение латентного периода избегания, увеличение числа пересечений платформы и повышение индекса распознавания новых объектов (P < 0.01), улучшение структуры нейронов гиппокампа, снижение депозиции Aβ1-42 (P < 0.01), снижение активности HK, уровней PKM2, LDHA и лактата (P < 0.01), снижение уровней белков HIF-1α и PFKFB3, экспрессии мРНК HIF-1α, PFKFB3, HK, PKM2 и LDHA, а также снижение интенсивности флуоресценции LDHA (P < 0.01). По сравнению с группой электроакупунктуры, в группе электроакупунктуры + DMOG эти показатели были обращены (P < 0.01, P < 0.05). Заключение: электроакупунктура может значительно улучшить когнитивные функции у мышей модели AD, и механизм действия может быть связан с подавлением гиппокампального сигнального пути HIF-1α/PFKFB3, снижением активности ключевых ферментов гликолиза и аномальным накоплением лактата.

болезнь Альцгеймера;электроакупунктура;гликолиз;когнитивные функции;гипоксически индуцируемый фактор 1α;двуфункциональный фермент фосфофруктокиназы 3