Механизм влияния акупунктуры в точках «Хоуси» и «Хуантяо» на регулирование сигнального пути PI3K/AKT/mTOR и аутофагию клеток ядра межпозвонкового диска у модели дегенерации поясничного диска у крыс

HU Zhi-xiang ,  

WU Han ,  

LÜ Heng ,  

ZHANG Hao ,  

ZHAI Chun-tao ,  

LI Sheng-yun ,  

WANG Zheng-hao ,  

LÜ Yu-e ,  

摘要

Целью исследования является изучение влияния акупунктуры в точках «Хоуси» и «Хуантяо» на сигнальный путь фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K)/протеинкиназы B (AKT)/мишени рапамицина у млекопитающих (mTOR) и аутофагию клеток ядра межпозвоночного диска у модели межпозвонковой дископатии (IDD) у крыс, а также изучение потенциального механизма замедления прогрессирования IDD. Методы: было выбрано 36 крыс SD, случайным образом разделённых на группу шрамирования (фиктивной операции), модельную группу и группу акупунктурных точек, по 12 животных в каждой группе. В модельной группе и группе акупунктурных точек моделировали IDD методом прокола фиброзного кольца. После успешного моделирования группе акупунктурных точек проводили акупунктуру в точках «Хоуси» и «Хуантяо», по 20 минут каждый раз, 1 раз в день, в течение 14 дней. Порог механического сокращения стопы правой лапы определяли с помощью волокон VonFrey до, после моделирования, а также на 7-й и 14-й день после вмешательства; период латентного времени рефлекса сокращения стопы на термический стимул измеряли с помощью аппарата для термической стимуляции; морфологические характеристики межпозвонковых дисков исследовали методом HE-окрашивания; содержимое аггрекана, коллагена II типа, транскрипционного фактора SOX9, металлопротеиназ MMP3 и MMP13 в ткани ядра определяли методом ELISA; уровни экспрессии mRNA SOX9 и MMP13 определяли методом количественной ПЦР в реальном времени; экспрессию белка LC3 выявляли методом иммунофлюоресцентного окрашивания; уровни белков PI3K/AKT/mTOR и LC3-II, Beclin1, p62 в ткани ядра оценивали методом Western blot. Результаты: по сравнению с группой шрамирования в модельной группе наблюдалось снижение порога механического сокращения и латентного времени рефлекса на термическое раздражение на 7-й и 14-й день (P0.001), снижение содержания аггрекана, коллагена II, SOX9 и экспрессии SOX9 mRNA (P0.001, P0.01), повышение содержания MMP3, MMP13 и уровня экспрессии MMP13 mRNA, увеличение положительной экспрессии LC3, и уровней белков Beclin1, LC3-II (P0.001), а также снижение уровней фосфорилированных p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT, p-mTOR/mTOR и белка p62 (P0.001). По сравнению с модельной группой в группе акупунктурных точек увеличивался порог механического сокращения, латентный период рефлекса на термический раздражитель (P0.001), повысилось содержание аггрекана, коллагена II, SOX9 и экспрессия SOX9 mRNA (P0.001), а содержание MMP3, MMP13, экспрессия MMP13 mRNA, положительная экспрессия LC3, уровни Beclin1 и LC3-II снижались (P0.001, P0.01, P0.05); уровни p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT, p-mTOR/mTOR и p62 повышались (P0.01, P0.05, P0.001). По данным HE-окрашивания количество клеток ядра модели было меньше, имела неправильную форму и имелось множество пузырьков, в группе акупунктурных точек клетки были более регулярно расположены и нормальной формы, количество пузырьков уменьшилось. Вывод: акупунктура в точках «Хоуси» и «Хуантяо» может замедлять прогрессирование IDD путем регулирования аутофагии в клетках ядра межпозвоночного диска, снижая деградацию внеклеточного матрикса, возможно, за счёт активации сигнального пути PI3K/Akt/mTOR.

关键词

акупунктура;Хоуси;Хуантяо;дегенерация поясничного диска;сигнальный путь PI3K/Akt/mTOR;аутофагия

阅读全文

以上内容由讯飞翻译自动生成,翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果,本网站不承担任何商业和法律责任。

The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website