Цель исследования заключается в наблюдении влияния иглотерапии на сигнализацию пути Sirt1 / ядерного фактора транскрипции E2-связанного фактора 2 (Nrf2) / NADPH-хиноноксидоредуктазы-1 (NQO1) в хряще коленного сустава кроликов с остеоартритом коленного сустава (KOA), а также изучении механизма улучшения повреждения хряща. Метод: 24 самца новозеландских кроликов были случайным образом разделены на нормальную группу, модельную группу, группу иглотерапии и группу иглотерапии с ингибитором, по 6 животных в каждой группе. Во всех группах, кроме нормальной, модель KOA была создана с помощью модифицированного метода Видемана. В группе иглотерапии применяли иглотерапию на медиальной и латеральной коллатеральных связках левой нижней конечности, медиальной и латеральной поддерживающих связках латеральной и медиальной коленной чашечки, коленной связке и узлах связочно-связочного аппарата один раз в неделю в течение 4 недель; в группе иглотерапии с ингибитором перед каждым сеансом за 30 минут вводился внутрибрюшинно ингибитор Sirt1 EX-527, также раз в неделю в течение 4 недель. Оценивали индекс функциональных нарушений Лекенса (Lequesne MG) и пассивный объем движений (PROM) до вмешательства и через 1 неделю после последнего вмешательства; через 1 неделю после последнего вмешательства брали ткани хряща для гистологического исследования с помощью окраски гематоксилином-эозином (HE) и сафранином O-зеленым (SO); методами ELISA измеряли уровни интерлейкина-1β (IL-1β) и фактора некроза опухоли α (TNF-α) в суставной жидкости; колориметрическим методом определялось активность супероксиддисмутазы (SOD) и глутатионпероксидазы (GSH-Px) в хряще, общая антиоксидантная способность (T-AOC) и уровень малонового диальдегида (MDA) также исследовались цветометрически; методом иммунной флуоресценции определялся уровень активных форм кислорода (ROS) в хряще; методом Western blot исследовали белковую экспрессию Sirt1, Nrf2, NQO1, металлопротеиназы дезинтегрин и металлопротеиназы с тромбоцитарными реактивными мотивами 5 (ADAMTS-5) и матриксной металлопротеиназы 3 (MMP-3); ПЦР с обратной транскрипцией в реальном времени использовали для измерения экспрессии мРНК Sirt1, Nrf2 и NQO1 в хряще. Результаты показали, что по сравнению с нормальной группой в модельной группе оценка Lequesne MG коленного сустава левой ноги, уровни IL-1β, TNF-α в суставной жидкости, содержание MDA в хряще, уровень экспрессии ROS, а также уровни белка ADAMTS-5 и MMP-3 повысились (P<0.01), при этом белковая и мРНК экспрессия Nrf2 также повышены (P<0.05, P<0.01); PROM, активность SOD, GSH-Px, T-AOC и уровни белковой и мРНК экспрессии Sirt1 снижены (P<0.01). По сравнению с модельной группой в группе иглотерапии снижались оценки Lequesne MG, уровни IL-1β и TNF-α в суставной жидкости, содержание MDA и экспрессия ROS в хряще, выраженность белка ADAMTS-5 и MMP-3 (P<0.01), увеличивались PROM, активности SOD, GSH-Px, T-AOC, белковая и мРНК экспрессия Sirt1, Nrf2, NQO1 (P<0.01). В группе иглотерапии с ингибитором снижались оценки Lequesne MG, уровень TNF-α в суставной жидкости, содержание MDA и экспрессия ROS (P<0.01, P<0.05), при этом мРНК уровни Sirt1, Nrf2, NQO1 повышались (P<0.01). По сравнению с группой иглотерапии в группе иглотерапии с ингибитором оценки Lequesne MG, уровни IL-1β, TNF-α, содержание MDA, экспрессия ROS, уровни белка MMP-3, ADAMTS-5 повысились (P<0.01, P<0.05), PROM, активности SOD, GSH-Px, T-AOC, белковая и мРНК экспрессия Sirt1, Nrf2, NQO1 снизились (P<0.01, P<0.05). Результаты окрашивания HE и SO показали истончение поверхности хряща коленного сустава, уменьшение количества хрящевых клеток, нарушение их порядка и потерю протеогликанов в модельной группе; в группе иглотерапии количество и упорядоченность хрящевых клеток, а также содержание протеогликанов были выше по сравнению с модельной группой; в группе иглотерапии с ингибитором повреждение поверхности хрящевой ткани было усилено по сравнению с группой иглотерапии. Вывод: Иглотерапия может улучшать функцию сустава и патологические повреждения хряща у кроликов с KOA, что, возможно, связано с активацией сигнального пути Sirt1/Nrf2/NQO1 и снижением оксидативного стресса и воспалительной реакции.

Иглотерапия; остеоартрит коленного сустава; функция коленного сустава; сигнальный путь Sirt1/Nrf2/NQO1; окислительный стресс; повреждение хряща