Тирозингидроксилаз-положительные нейроны вентролатеральной области верхнего отдела продолговатого мозга опосредуют улучшение моторики кишечника у мышей с функциональным запором при электропунктуре

Wang Dan ,  

He Zhaoxuan ,  

Yu Mingkai ,  

Wu Ruohan ,  

Deng Xiao ,  

Luo Yucai ,  

Li Yifan ,  

Lai Peng ,  

Yao Xiaoheng ,  

Yin Tao ,  

Zeng Fang ,  

摘要

Целью исследования было изучить роль нейронов, положительных по тирозингидроксилазе (TH), в вентролатеральной области верхнего отдела продолговатого мозга (RVLM) в улучшении моторики кишечника у мышей с функциональным запором (FC) при электропунктуре. Методы: сначала с помощью транссинаптического трассирующего вируса были идентифицированы мозговые области, управляющие проксимальным отделом ободочной кишки. Затем 18 мышей C57BL/6J случайным образом разделили на нормальную группу, модельную группу и группу электропунктуры, по 6 животных в каждой. Модель FC была создана путем перорального введения лоперамида гидрохлорида. Группе электропунктуры проводили процедуры на акупунктурных точках «Тяньшу» и «Шанцзюй», курсами по 5 дней, всего 2 курса. Наблюдали дефекацию, определяли влажность кала; регистрировали время выхода первого черного кала; измеряли скорость продвижения тонкой кишки; определяли содержание TH в сыворотке и толстой кишке методом ELISA; выявляли коэкспрессию TH/c-Fos в RVLM с помощью иммуннофлуоресценции. Далее 12 мышей разделили на группы вирус-пустышка + CNO и вирус-ингибитор + CNO, а 18 мышей — на группы вирус-пустышка + CNO, электропунктура, вирус-активатор + CNO + электропунктура, по 6 в каждой; вирусы вводили в RVLM, спустя 21 день после экспрессии вируса вводили CNO (1 мг/кг) внутрибрюшинно. В электропунктурной и активаторной группах электропунктуру выполняли через 30 мин после инъекции CNO, как описано выше. Проводили наблюдения за дефекацией и оценку моторики кишечника теми же методами. В конце 18 мышей получили инъекции вируса rAAV-hSyn-GCaMP6s в RVLM, спустя 21 день случайно распределены на контрольную, модельную и модель + электропунктура, по 6 животных в группе. С помощью многофункциональной оптоволоконной системы фиксировали изменения кальциевых сигналов нейронов RVLM. Результаты: ретроградное трассирующее исследование вирусом показало синаптические связи нейронов RVLM с проксимальной ободочной кишкой. По сравнению с нормальной группой у модельной группы наблюдалось удлинение времени выхода первого черного кала, снижение общего количества кала, влажности кала и скорости продвижения тонкой кишки (P<0,001, P<0,01), увеличивалось содержание TH в сыворотке и толстой кишке (P<0,01), возрастание числа TH+ и c-Fos+ нейронов в RVLM, а также нейронов с коэкспрессией TH/c-Fos (P<0,001). В группе электропунктуры по сравнению с моделью время выхода первого черного кала сокращалось, увеличивалось количество кала, влажность кала и скорость продвижения тонкой кишки (P<0,001, P<0,01), снижалось содержание TH в сыворотке и толстой кишке (P<0,01), уменьшалось число TH+, c-Fos+ и коэкспрессирующих нейронов в RVLM (P<0,001). В группе вирус-ингибитор + CNO по сравнению с вирус-пустышкой + CNO наблюдалось сокращение времени выхода первого черного кала, увеличение количества кала, влажности и продвижения (P<0,001, P<0,01). Группа электропунктуры по сравнению с вирус-пустышкой + CNO также демонстрировала улучшения (P<0,001, P<0,01). В группе вирус-активатор + CNO + электропунктура по сравнению с электропунктурой время выхода первого черного кала удлинялось, количество кала, влажность и продвижение снижались (P<0,001, P<0,01). Активность Ca²⁺ сигналов в RVLM в модельной группе была значительно выше, чем в контрольной (P<0,001), в группе модель + электропунктура — значительно снижена по сравнению с модельной (P<0,001). Выводы: акупунктурные точки толстого кишечника «Тяньшу» и «Шанцзюй» могут улучшать моторные нарушения при FC за счёт ингибирования активности TH+ нейронов RVLM.

关键词

Электропунктура; вентролатеральная область верхнего отдела продолговатого мозга; нейроны тирозингидроксилазы; нарушения моторики кишечника

阅读全文

以上内容由讯飞翻译自动生成,翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果,本网站不承担任何商业和法律责任。

The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website