Efecto del pretratamiento con electroacupuntura en el ritmo de expresión del gen del reloj Bmal1 en el tejido uterino de ratas con hiperestimulación ovárica
El objetivo de este estudio fue observar el efecto del pretratamiento con electroacupuntura en el ritmo de expresión del gen del reloj Bmal1 en el tejido uterino de ratas con hiperestimulación ovárica y explorar el mecanismo de acción del pretratamiento con electroacupuntura en la mejora de la receptividad del endometrio en ratas con implante en el período de ventana. Métodos: Setenta y dos ratas SD hembras se dividieron en tres grupos mediante un método de números aleatorios: grupo normal, grupo modelo y grupo de pretratamiento con electroacupuntura, con 24 ratas en cada grupo. A excepción del grupo normal, a las otras dos grupos de ratas se les inyectó suero de yegua gestante por vía intraperitoneal durante 48 horas y, a continuación, se les inyectó FSH humana para preparar el modelo de hiperestimulación ovárica. El grupo de pretratamiento con electroacupuntura seleccionó los puntos de Guanyuan y Sanyinjiao e intervino con electroacupuntura a las 21:00 todos los días durante los dos ciclos estrales previos a la modelación, con una duración de 15 minutos cada vez, hasta el final de la modelación. Las ratas del grupo normal fueron apareadas con ratas macho con ligadura de los conductos deferentes en el período de celo, y las ratas de los otros dos grupos fueron apareadas el mismo día en que finalizó la modelación. Los tres grupos de ratas se sacrificaron en lotes de cuatro ratas cada cuatro horas a partir de las 4:00 del quinto día después de la obtención del éxito del apareamiento, con un total de seis lotes. Se realizó tinción con HE para observar el grosor del endometrio, el número de glándulas y vasos sanguíneos, y los cambios morfológicos en el tejido uterino; se utilizó ELISA para detectar los niveles de estradiol (E2) y progesterona (Pg) en suero; se utilizó PCR cuantitativa de fluorescencia en tiempo real para detectar la expresión de ARN mensajero de Bmal1, HoxA10 y el factor de receptividad del endometrio LIF en el útero; y se utilizó Western blot para detectar la expresión de proteínas de HoxA10 y LIF en el tejido uterino. Resultados: En comparación con el grupo normal, el grosor del endometrio en el grupo modelo se redujo (P<0,01), y el número de glándulas y vasos sanguíneos disminuyó significativamente (P<0,01, P<0,05); el pico y el valle de la expresión rítmica de Bmal1 en el útero del grupo modelo se expresaron en momentos opuestos a los del grupo normal, y la expresión de ARNm de Bmal1 disminuyó a las 12:00 y 16:00 (P<0,01); los niveles de E2 y Pg en suero aumentaron significativamente (P<0,01, P<0,05); los niveles de ARNm y proteínas de HoxA10 y LIF se redujeron significativamente (P<0,01, P<0,05). En comparación con el grupo modelo, el grupo de pretratamiento con electroacupuntura mostró un aumento significativo en el grosor del endometrio, el número de glándulas y vasos sanguíneos (P<0,05); el pico y el valle de la expresión rítmica de Bmal1 en el útero se restablecieron, y los niveles de expresión se incrementaron, siendo la diferencia más significativa a las 12:00, momento en el que la expresión de Bmal1 en el grupo de pretratamiento con electroacupuntura aumentó significativamente en comparación con el grupo modelo (P<0,05); los niveles de Pg en suero disminuyeron significativamente (P<0,05); y los niveles de ARNm y proteínas de HoxA10 y LIF aumentaron (P<0,05, P<0,01). Conclusión: El pretratamiento con electroacupuntura puede mejorar la receptividad del endometrio en el período de ventana de implantación, y su mecanismo puede ser la regulación de la expresión rítmica del gen del reloj Bmal1 en el tejido uterino, corrigiendo así la perturbación en el ritmo de expresión del gen del reloj causada por la estimulación para la hiperestimulación ovárica.
关键词
Pretratamiento con electroacupuntura; Hiperestimulación ovárica controlada; Ritmo circadiano; Gen del reloj; Bmal1