Estudio experimental sobre la acupuntura para inhibir la muerte por cobre y extender la ventana de tiempo de la trombólisis en ratas con infarto cerebral

ZHAO Yi ,  

SONG Yang-yang ,  

CHANG Si-qi ,  

HUANG Zheng ,  

LIU Xin-yu ,  

LIU Qian-qian ,  

NI Guang-xia ,  

摘要

El objetivo de este estudio fue observar el efecto de la acupuntura en la muerte neuronal por cobre en ratas con infarto cerebral tratadas con trombólisis, y explorar el mecanismo de la acupuntura en la extensión de la ventana de tiempo de la trombólisis cerebral. Métodos Este experimento se dividió en dos partes. En la primera parte del experimento, se asignaron al azar 40 ratas SD en los grupos de cirugía simulada, grupo modelo, grupo de trombólisis a las 4.5 horas, grupo de trombólisis a las 6 horas, y grupo de acupuntura + trombólisis a las 6 horas, con 8 ratas por grupo. Se utilizó un método modificado de oclusión de la arteria cerebral para crear un modelo de infarto cerebral en ratas. A las 4.5 horas y 6 horas después de la modelación, a los grupos de tratamiento de trombólisis se les administró 10mg/kg de activador tisular de plasminógeno recombinante (rt-PA) por vía intravenosa. Al grupo de acupuntura + trombólisis a las 6 horas se le administró acupuntura en los puntos bilaterales de 'Neiguan' y 'Hegu' simultáneamente con la trombólisis, y las agujas se dejaron durante 30 minutos. Todos los grupos fueron monitorizados por un láser de microflujo de imágenes de manchas para medir el flujo sanguíneo cerebral durante la modelación, y se utilizó el método de Bederson para evaluar el comportamiento neurológico a las 2 y 24 horas después de la modelación. La tinción con cloruro de trifenil tetrazolio comparó el volumen del infarto cerebral en ratas de cada grupo, y se utilizó inmunofluorescencia para detectar la expresión positiva de la proteína nuclear de las neuronas (NeuN) en el área peri-infarcto (PI) en ratas de cada grupo. En la segunda parte del experimento, 24 ratas SD fueron asignadas al azar a los grupos de cirugía simulada, grupo modelo, grupo de trombólisis a las 6 horas, y grupo de acupuntura + trombólisis a las 6 horas, con 6 ratas por grupo. Se utilizó un método de colorimetría para medir los niveles de iones de cobre, ácido pirúvico y trifosfato de adenosina (ATP) en el área peri-infarcto de ratas de cada grupo, y se utilizó el método de Western blot y la PCR cuantitativa de fluorescencia para medir la expresión de la proteína y el mRNA de la ferredoxina 1 (FDX1) y la dihidrolipoamida acetiltransferasa (DLAT). Resultados Comparado con el grupo de cirugía simulada, el grupo modelo mostró un aumento en la puntuación del comportamiento neurológico de las ratas, el porcentaje del volumen del infarto cerebral, los niveles de iones de cobre y ácido pirúvico en el área peri-infarcto, así como los niveles de expresión de FDX1, DLAT tanto en proteína como en mRNA (P <0,01), y una disminución en el porcentaje de células NeuN positivas y los niveles de ATP (P <0,01). Comparado con el grupo modelo, el grupo de trombólisis a las 4.5 horas mostró una reducción en la puntuación del comportamiento neurológico y el porcentaje del volumen del infarto cerebral a las 24 horas (P <0,05, P <0,01), y un aumento en el porcentaje de células NeuN positivas (P <0,05); el grupo de trombólisis a las 6 horas mostró un aumento en el porcentaje del volumen del infarto cerebral, los niveles de iones de cobre y ácido pirúvico en el área peri-infarcto, así como los niveles de expresión de FDX1, DLAT tanto en proteína como en mRNA (P <0,05, P <0,01), y una disminución en el porcentaje de células NeuN positivas y los niveles de ATP (P <0,05); el grupo de acupuntura + trombólisis mostró una reducción en la puntuación del comportamiento neurológico y el porcentaje del volumen del infarto cerebral a las 24 horas, el porcentaje de iones de cobre y ácido pirúvico en el área peri-infarcto, así como los niveles de expresión de FDX1, DLAT tanto en proteína como en mRNA (P <0,05, P <0,01), y un aumento en el porcentaje de células NeuN positivas y los niveles de ATP (P <0,05). En comparación con el grupo de trombólisis a las 4.5 horas, el grupo de trombólisis a las 6 horas mostró un aumento en la puntuación del comportamiento neurológico y el porcentaje del volumen del infarto cerebral a las 24 horas (P <0,01), y una disminución en el porcentaje de células NeuN positivas (P <0,01). En comparación con el grupo de trombólisis a las 6 horas, el grupo de acupuntura + trombólisis mostró una reducción en la puntuación del comportamiento neurológico, el porcentaje del volumen del infarto cerebral, los niveles de iones de cobre y ácido pirúvico en el área peri-infarcto, así como los niveles de expresión de FDX1, DLAT tanto en proteína como en mRNA (P <0,01), y un aumento en el porcentaje de células NeuN positivas y los niveles de ATP (P <0,01). Conclusión La intervención de la acupuntura en el momento adecuado puede extender la ventana de tiempo de la trombólisis cerebral en ratas con infarto cerebral, y su mecanismo puede estar relacionado con la reducción de la expresión de FDX1, DLAT en el área peri-infarcto, inhibiendo así la muerte neuronal por cobre.

关键词

infarto cerebral; acupuntura; ventana de tiempo de trombólisis; muerte por cobre

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