Impacto de la técnica de aguja de calentamiento en el nivel de ubiquitinación K63 de TRAF6 en los tejidos sinoviales de la rodilla en el modelo de conejo de artritis reumatoide con síndrome de frío
El propósito de este estudio es observar el efecto del tratamiento de aguja de calentamiento en el nivel de ubiquitinación K63 de TRAF6 en los tejidos sinoviales de la rodilla en el modelo de conejo de artritis reumatoide (RA) con síndrome frío, y explorar el mecanismo del efecto del tratamiento de aguja de calentamiento en la supresión de la reacción inflamatoria sinovial en la RA. Método En total, se seleccionaron aleatoriamente 32 conejos, de los cuales 8 estaban en el grupo normal. Otros conejos fueron sometidos a inducción del modelo de RA frío con ovalbumina por un adyuvante de Freund completo y un método de congelación a baja temperatura, y luego fueron asignados al azar a tres grupos: grupo de modelo, grupo de inhibidores, grupo de tratamiento de aguja de calentamiento, cada uno compuesto por 6 conejos. El grupo de inhibidores recibió una inyección intraperitoneal de solución C25-140 (2,5 mg/kg), dos veces al día, durante 14 días. El grupo de tratamiento de aguja de calentamiento fue tratado con la técnica de aguja de calentamiento según la norma operativa, punción de Zusanli durante 30 minutos, una vez al día, durante 14 días. Después de la intervención, se midieron la circunferencia y el umbral de dolor de las rodillas de los conejos, se observaron los cambios en la imagen ecográfica en color Doppler de las articulaciones, se observaron los cambios morfológicos de los tejidos sinoviales de las articulaciones de rodilla mediante tinción con hematoxilina-eosina (HE), la expresión de los factores tumorales de necrosis-α (TNF-α), interleucina (IL) -1β, IL-6 en los tejidos sinoviales se determinó por el método de espectrofotometría de inmunohistoquímica, la expresión de las proteínas ligasas de ubiquitina E2 13 (Ubc13) y NF-κB p65 en los tejidos sinoviales se detectó por el método de Western blot, y el nivel de ubiquitinación K63 de TRAF6 en los tejidos sinoviales se determinó por co-inmunoprecipitación. Resultados En comparación con el grupo normal, el umbral de dolor del grupo de modelo disminuyó (P<0,05), la circunferencia de las rodillas aumentó (P<0,05), el valor promedio de la absorbancia de TNF-α, IL-1β, IL-6 en los tejidos sinoviales aumentó (P<0,05), la expresión de las proteínas NF-κB p65, el nivel de ubiquitinación K63 de TRAF6 en los tejidos sinoviales aumentaron (P<0,05), la expresión de la proteína Ubc13 disminuyó (P<0,05), el eco Doppler mostró una proliferación sinovial generalizada en las rodillas, un engrosamiento, una acumulación articular evidente, la tinción HE mostró hinchazón, destrucción morfológica evidente de las células sinoviales, infiltración extensa de células inflamatorias y linfocitos ; en comparación con el grupo de modelo, el umbral de dolor del grupo de tratamiento de aguja de calentamiento y del grupo de inhibidores aumentó (P<0,05), la circunferencia de las rodillas disminuyó (P<0,05), el valor promedio de la absorbancia de TNF-α, IL-1β, IL-6 en los tejidos sinoviales disminuyó (P<0,05), la expresión de la proteína NF-κB p65, el nivel de ubiquitinación K63 de TRAF6 en los tejidos sinoviales disminuyeron considerablemente (P<0,05), la expresión de la proteína Ubc13 aumentó (P<0,05), el engrosamiento sinovial ecográfico, el grado de engrosamiento mejoraron, la señal sanguínea disminuyó, la acumulación articular disminuyó, la tinción HE mostró un crecimiento celular sinovial, hinchazón y mejora de la infiltración inflamatoria en comparación con el grupo de modelo ; en comparación con el grupo de tratamiento de aguja de calentamiento, el umbral de dolor de los conejos del grupo de inhibidores disminuyó (P<0,05), el valor promedio de la absorbancia de TNF-α, IL-1β, IL-6 en los tejidos sinoviales disminuyó (P<0,05), la expresión de la proteína NF-κB p65, el nivel de ubiquitinación K63 de TRAF6 en los tejidos sinoviales disminuyeron (P<0,05), la expresión de la proteína Ubc13 aumentó (P<0,05). Conclusión La técnica de aguja de calentamiento puede suprimir la reacción inflamatoria sinovial al inhibir el nivel de ubiquitinación K63 de TRAF6, regulando a la baja la actividad de la vía NF-κB, reduciendo la secreción de citocinas inflamatorias aguas abajo.
关键词
técnica de aguja de calentamiento;artritis reumatoide;ubiquitinación de TRAF6;reacción inflamatoria;vía NF-κB