Estudio de los mecanismos de regulación de la expresión de miR-335-5p mediante electroacupuntura para mejorar las lesiones del tejido cartilaginoso de la articulación de la rodilla en ratas con artrosis de la rodilla
El objetivo de este estudio es observar el efecto protector de la electroacupuntura sobre el tejido cartilaginoso de la articulación de la rodilla de las ratas con artrosis de la rodilla (KOA) y estudiar el mecanismo potencial de miR-335-5p en el tratamiento de la KOA mediante electroacupuntura. Métodos. Las ratas SD se dividieron al azar en tres grupos: grupo de control, grupo de modelo, grupo de electroacupuntura, con 14 sujetos en cada grupo. Se realizó una inyección intraarticular de solución de glutamato de sodio yodado (80 µg/µL) en la articulación de la rodilla derecha de las ratas para crear un modelo de KOA, después de lo cual, 14 días después de la inyección del medicamento inflamatorio, se aplicó electroacupuntura a las ratas del grupo de electroacupuntura en los puntos "Yanglingquan" y "Blood Sea" del lado derecho, dejando las agujas en su lugar durante 15 minutos, con una intervención cada dos días durante dos semanas. Se midieron los reflejos mecánicos (PWMT) y los períodos de latencia térmica (PWTL) en las ratas; el análisis mostró modificaciones en la adaptación de la marcha en caso de dolor. Se estudiaron los cambios patológicos en el tejido cartilaginoso de la articulación de la rodilla mediante tinción con hematoxilina y eosina (HE); los niveles de expresión de ARNm de miR-335-5p, de proteína relacionada con Dickkopf-1 (DKK-1), de beta-catenina (β-catenina) y de metaloproteasa 13 (MMP-13) en el tejido cartilaginoso de la articulación de la rodilla derecha se determinaron por PCR en tiempo real; los niveles de expresión de las proteínas DKK-1, β-catenina, MMP-13 en el tejido cartilaginoso se determinaron por inmunofluorescencia; la inmunofluorescencia se utilizó para estudiar los focos verdes en el tejido cartilaginoso de la articulación de la rodilla derecha relacionados con la β-catenina. Resultados. En el grupo de modelo se observó una fuerte necrosis de las células cartilaginosas, una disolución del núcleo de las células, infiltración de células inflamatorias, principalmente macrófagos, ausencia parcial de cartílago en áreas locales, necrosis de la trama ósea en áreas locales, aumento del tejido fibroso, formación de nuevos vasos sanguíneos en áreas de crecimiento; en el grupo de electroacupuntura, los cambios patológicos como la infiltración de células inflamatorias y el aumento del tejido fibroso se redujeron notablemente. En comparación con el grupo de control, los niveles de ARNm y proteínas DKK-1 en el tejido cartilaginoso de la articulación de la rodilla derecha fueron menores en el grupo de modelo (P<0,001); los niveles de ARNm y proteínas miR-335-5p, β-catenina y MMP-13 en el tejido cartilaginoso de la articulación de la rodilla derecha fueron mayores (P<0,001, P<0,01). En comparación con el grupo de modelo, los niveles de estos indicadores en el grupo de electroacupuntura se invirtieron (P<0,001, P<0,05, P<0,01). Conclusión. La electroacupuntura es capaz de mejorar significativamente los síntomas del dolor en las ratas con KOA, favorecer la recuperación de la función motora, mejorar la morfología patológica del tejido cartilaginoso de la articulación de la rodilla, quizás debido a la regulación de la expresión de miR-355-5p, la regulación de la vía Wnt/β-catenina y la inhibición de la liberación de enzimas de degradación de la matriz cartilaginosa.
关键词
Electroacupuntura; Artrosis de la rodilla; miR-335-5p; β-catenina