Mecanismo de la acupuntura para mejorar la autofagia de las células epiteliales del intestino irritable con diarrea en ratas basadas en la vía de señal PI3K / AKT / mTOR
El objetivo de este estudio fue observar los efectos de la acupuntura y la moxibustión en la vía de señal fosfoinositol 3 cinasa (PI3K) / proteína quinasa B (AKT) / blanco de rapamicina en mamíferos (mTOR) en la rata modelo del síndrome del intestino irritable con diarrea (IBS-D), y explorar los posibles mecanismos de la acupuntura y la moxibustión en la regulación del nivel de autofagia de las células epiteliales intestinales y la protección de la barrera mucosa en la rata modelo del IBS-D. Método: Cuarenta ratas SD fueron asignadas aleatoriamente en cuatro grupos: normal, modelo, acupuntura y grupo acupuntura + LY294002, con 10 ratas en cada grupo. Se estableció un modelo de IBS-D utilizando un método de estimulación con ácido acético y ligadura crónica. Las ratas del grupo de acupuntura recibieron una suspensión de acupuntura de 20 minutos en el Tian Shu y Shang Ju Xu bilaterales. Las ratas del grupo de acupuntura + LY294002 recibieron una inyección intraperitoneal del inhibidor de PI3K LY294002 (0,75 mg / kg) 30 minutos antes de la intervención de acupuntura. Ambos grupos recibieron una intervención una vez al día durante 7 días consecutivos. Antes, después de la modelización y después de la intervención, se midió la cantidad mínima de agua inyectada cuando la puntuación de retirada abdominal refleja (AWR) de las ratas alcanzaba 3 puntos; se utilizó tinción con hematoxilina y eosina para observar las lesiones inflamatorias de la mucosa del colon; se observó la estructura mitocondrial y el número de cuerpos autofágicos en la mucosa colónica al microscopio electrónico; la expresión de las proteínas de occludina, la proteína de unión estrecha 1 (ZO-1), la proteína de claudina-2, la proteína p62 y las relaciones p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT, p-mTOR/mTOR, y la cadena ligera de la proteína asociada a microtúbulos (LC) (LC3B-II/I) fueron detectadas por western blot; la expresión de los ARNm de PI3K, AKT, mTOR, occludina, ZO-1, Claudin-2 en las ratas colónicas fue verificada por PCR en tiempo real. Resultados: en comparación con el grupo normal, la cantidad mínima de agua inyectada cuando AWR de las ratas del grupo modelo disminuyó (<italic>P<0,01), las células epiteliales intestinales estaban dispuestas de manera irregular, la infiltración celular inflamatoria local era visible, y numerosos cuerpos autofágicos eran visibles en el microscopio electrónico, y las relaciones p-PI3K / PI3K, p-AKT / AKT, p-mTOR / mTOR y la expresión de las proteínas occludina, ZO-1, p62, la expresión del ARNm de PI3K, AKT, mTOR, occludina, ZO-1 fueron reducidas (<italic>P<0,01), la expresión de la proteína Claudina-2 y del ARNm, la relación LC3B-II / I aumentaron (<italic>P<0,01). En comparación con el grupo modelo, la cantidad mínima de agua inyectada cuando AWR de las ratas del grupo de acupuntura aumentó (<italic>P<0,05), la estructura de la mucosa intestinal estaba relativamente intacta, reducción de la infiltración celular inflamatoria, reducción del número de cuerpos autofágicos en el microscopio electrónico, y las relaciones p-PI3K / PI3K, p-AKT / AKT, p-mTOR / mTOR y la expresión de las proteínas occludina, ZO-1, p62 y la expresión de los ARNm de PI3K, AKT, mTOR, occludina, ZO-1 aumentaron de manera relativa (<italic>P<0,01), la expresión de la proteína Claudina-2 y del ARNm, la relación LC3B-II / I fueron reducidas (<italic>P<0,01). En comparación con el grupo de acupuntura, las ratas del grupo de acupuntura + LY294002 tenían una estructura de la mucosa colónica relativamente perturbada, aumento de la infiltración celular inflamatoria, aumento del número de cuerpos autofágicos en el microscopio electrónico, y otros indicadores fueron reducidos en diferentes grados (<italic>P<0,01, <italic>P<0,05). Conclusiones: La acupuntura podría activar la vía de señal de PI3K/AKT/mTOR, reducir el nivel de autofagia de las células epiteliales intestinales en las ratas con IBS-D, atenuar las lesiones de las células epiteliales intestinales de las ratas con IBS-D y proteger la barrera mucosa intestinal.
关键词
síndrome del intestino irritable con diarrea; acupuntura; dolor visceral; vía de señal fosfoinositol 3 cinasa (PI3K) / proteína quinasa B (AKT) / blanco de rapamicina en mamíferos (mTOR); barrera mucosa intestinal; autofagia