Efecto de la regulación por electroacupuntura de la vía PI3K/Akt/mTOR sobre la autofagia del tejido sinovial de la articulación de la rodilla en ratas con osteoartritis de rodilla
Objetivo: Investigar el efecto de la electroacupuntura en la regulación de la vía de señalización de fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3K)/proteína quinasa B (Akt)/proteína objetivo de la rapamicina en mamíferos (mTOR) sobre la autofagia en el tejido sinovial de la articulación de la rodilla en ratas con osteoartritis de rodilla (KOA). Métodos: Se seleccionaron 36 ratas SD machos, que fueron divididas aleatoriamente en grupo normal, grupo modelo y grupo de electroacupuntura, con 12 ratas en cada grupo. El modelo KOA se replicó mediante la administración de yodoacetato de sodio. Tras la confirmación del modelo, el grupo de electroacupuntura recibió tratamiento en los puntos “Dubi” y “Zusanli” del lado afectado, con electroacupuntura durante 20 minutos una vez al día durante 3 semanas consecutivas. La función de la rodilla de las ratas fue evaluada con la escala conductual Lequesne MG, la morfología patológica del tejido sinovial se observó con tinción HE, la ultraestructura de autolisosomas y autofagosomas sinoviales se observó mediante microscopía electrónica de transmisión, se midieron las proteínas relacionadas con la autofagia Atg5 y Atg12 en el tejido sinovial mediante ELISA, se analizaron los niveles de expresión de ARNm de PI3K, Akt y mTOR mediante PCR cuantitativa en tiempo real, y los niveles relativos de proteínas PI3K, Akt, mTOR, ULK1, Beclin-1 y LC3 mediante Western blot. Resultados: En comparación con el grupo normal, las puntuaciones Lequesne MG de la rodilla en el grupo modelo aumentaron (P<0,01), con proliferación de colágeno en el tejido sinovial, infiltración celular inflamatoria, aumento en el número de autofagosomas y autolisosomas, aumento en los contenidos de Atg5 y Atg12, aumento en la expresión relativa de las proteínas ULK1, Beclin-1 y la proporción LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,01), y reducción en la expresión de ARNm y proteínas PI3K, Akt y mTOR (P<0,01); en comparación con el grupo modelo, el grupo de electroacupuntura mostró una disminución en las puntuaciones Lequesne MG (P<0,01), reducción en la proliferación de colágeno y en la infiltración celular inflamatoria, disminución en el número de autofagosomas y autolisosomas, disminución en los contenidos de Atg5 y Atg12, disminución en la expresión relativa de las proteínas ULK1, Beclin-1 y la proporción LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,01), y aumento en la expresión de ARNm y proteínas PI3K, Akt y mTOR (P<0,05, P<0,01). Conclusión: La electroacupuntura en los puntos “Dubi” y “Zusanli” puede inhibir la autofagia del tejido sinovial, mejorar la función de la rodilla y la morfología del tejido sinovial en ratas con KOA, posiblemente a través de la activación de la vía de señalización PI3K/Akt/mTOR.
关键词
osteoartritis de rodilla;electroacupuntura;autofagia;fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3K)/proteína quinasa B (Akt)/proteína objetivo de la rapamicina en mamíferos (mTOR) vía de señalización;sinovial