Effect of electroacupuncture on ACSL4/LPCAT3/ALOX15 signaling pathway of ferroptosis in rats with premature ovarian insufficiency

LI Zheng-yu ,  

ZHAO Xi ,  

CHANG Juan ,  

SHI Wen-ying ,  

CAO Yang ,  

LIU Xiao-juan ,  

HU Ze-li ,  

ZHANG Wei ,  

摘要

El objetivo del estudio fue observar el efecto de la electroacupuntura en la vía de señalización ACSL4/LPCAT3/ALOX15 en los tejidos ováricos de ratas con insuficiencia ovárica prematura (POI), abordando el mecanismo de acción del tratamiento con acupuntura de POI desde el punto de vista de la muerte por hierro. Métodos: 48 ratas SD hembras fueron distribuidas al azar en un grupo normal, un grupo modelo, un grupo de electroacupuntura y un grupo de medicamentos occidentales, con 12 ratas en cada grupo. Se estableció un modelo de rata POI mediante inyección intraperitoneal de ciclofosfamida. El grupo de electroacupuntura fue sometido a electroacupuntura en los puntos Guanyuan y bilaterales Utérus y San Yin Jiao, con una onda continua de 2 Hz, a una intensidad que provoca una ligera sensación de temblor local, dejando las agujas en su lugar para una estimulación eléctrica continua de 20 minutos, una vez al día. El grupo de medicamentos occidentales fue tratado secuencialmente con 17-β estradiol y acetato de hidroxiprogesterona. Todos las ratas fueron sometidas a cuatro días de intervención seguidos de un día de descanso, para un total de cuatro ciclos de intervención. Al final de la intervención, se midieron los niveles séricos de folitropina (FSH), estradiol (E2), hormona luteinizante (LH) y hormona antimülleriana (AMH) de las ratas mediante ELISA; se realizaron tinciones HE para observar los cambios morfológicos en los ovarios de los ratas; se midieron los niveles de hierro (Fe), glutatión (GSH) y malondialdehído (MDA) en suero, así como la actividad de la superóxido dismutasa (SOD), mediante método colorimétrico; se evaluó el nivel de estrés oxidativo en los tejidos ováricos mediante citometría de flujo; se observó la microestructura mitocondrial de los tejidos ováricos mediante microscopía electrónica de transmisión; se midió la expresión de ARNm y proteínas de ACSL4, LPCAT3 y ALOX15 mediante PCR en tiempo real y western blot. Resultados: Después del tratamiento, en comparación con el grupo normal, el número de folículos ováricos de todos los estadios en las ratas del grupo modelo disminuyó, aumentó el número de folículos obstruidos, la estructura y morfología de los folículos eran anormales y la capa de células granulosas estaba desordenada; las mitocondrias dañadas en los ovarios se multiplicaron y las crestas mitocondriales disminuyeron o incluso desaparecieron; los niveles séricos de FSH, LH, hierro, MDA y la intensidad de fluorescencia media de ROS aumentaron (P<0,01), mientras que los niveles séricos de E2, AMH, GSH, la actividad de la SOD disminuyeron (P<0,01); la expresión de ARNm y proteínas de ACSL4, LPCAT3 y ALOX15 en los tejidos ováricos aumentó (P<0,01). En comparación con el grupo modelo, el número de folículos obstruidos en las ratas del grupo de electroacupuntura y del grupo de medicamentos occidentales disminuyó, el número de folículos en crecimiento aumentó, la capa de células granulosas estaba más ordenada; las mitocondrias dañadas en los ovarios disminuyeron y la morfología mitocondrial se recuperó parcialmente; los niveles séricos de FSH, LH, hierro, MDA y la intensidad de fluorescencia media de ROS disminuyeron (P<0,01), mientras que los niveles séricos de E2, AMH, GSH, la actividad de la SOD aumentaron (P<0,01); la expresión de ARNm y proteínas de ACSL4, LPCAT3 y ALOX15 en los tejidos ováricos disminuyó (P<0,01). Conclusión: La electroacupuntura puede regular los niveles hormonales en ratas POI, mejorar la función ovárica. Su mecanismo de acción puede estar relacionado con la regulación de la vía ACSL4/LPCAT3/ALOX15, la reducción de la acumulación de peróxidos lipídicos y la inhibición de la muerte por hierro.

关键词

Electroacupuncture;Premature ovarian insufficiency;Ferroptosis;Lipid peroxidation;ACSL4/LPCAT3/ALOX15 signaling

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