Investigación del mecanismo de acción de la electroacupuntura en el tratamiento combinado cerebro-intestino en ratas con isquemia cerebral basado en la vía TMAO-HMGB1/NLRP3

WU Yue-ping ,  

OUYANG Jie ,  

SONG Xiao-ge ,  

CHU Hao-ran ,  

CHEN Liang-liang ,  

DING Yi-xia ,  

摘要

El objetivo es observar el efecto de la electroacupuntura en la vía de la trimetilamina-N-óxido (TMAO) – proteína de alta movilidad B1 (HMGB1)/receptor tipo NOD asociado a proteína con dominio estructural similar a proteínas de choque térmico 3 (NLRP3) en ratas con isquemia cerebral, y explorar el mecanismo de acción del tratamiento combinado cerebro-intestino mediante electroacupuntura. Método: se dividieron aleatoriamente ratas macho SD adultas SPF en grupo sham, grupo modelo y grupo electroacupuntura, con 15 ratas cada uno. El grupo de electroacupuntura recibió tratamiento en los puntos “Baihui”, “Tianshu”, “Shangjuxu” y “Dazhui”, una vez cada dos días, 20 minutos por sesión, durante 14 días. La evaluación de la función neurológica de las ratas se realizó con la escala Zea-Longa; se midió el volumen del infarto cerebral mediante tinción TTC; se observaron los cambios patológicos en la corteza cerebral isquémica y tejido del colon mediante tinción HE; se detectaron los contenidos de TMAO, HMGB1, NLRP3, interleucina (IL)-1β, proteína de banda oclusiva 1 (ZO-1) y ocludina (Occludin) en suero, colon y corteza cerebral isquémica mediante ELISA; se midieron los niveles de expresión proteica y ARNm de HMGB1, NLRP3, IL-1β, ZO-1 y Occludin en tejido de colon y corteza cerebral isquémica mediante Western blot, PCR en tiempo real y tinción por inmunofluorescencia. Resultados: en comparación con el grupo sham, el grupo modelo mostró aumento en la puntuación Zea-Longa y porcentaje de volumen de infarto cerebral (P<0.01), desorden en la organización de las neuronas de la corteza cerebral isquémica, estructura laxa, espacios agrandados con infiltración celular inflamatoria, daño a la mucosa del colon, desorden en la organización glandular, disminución de células caliciformes con infiltración inflamatoria; aumentos en los niveles de TMAO, HMGB1, NLRP3 e IL-1β en suero, colon y corteza cerebral isquémica (P<0.01), disminución en los niveles de ZO-1 y Occludin (P<0.01); aumentos en expresión proteica, ARNm y expresión positiva de HMGB1, NLRP3, IL-1β, y disminución en ZO-1 y Occludin (P<0.01). En comparación con el grupo modelo, el grupo electroacupuntura mostró disminución en puntuación Zea-Longa y porcentaje de volumen de infarto (P<0.01), neuronas de la corteza cerebral con mejor organización y morfología más intacta, menor infiltración de células inflamatorias, células epiteliales de la mucosa colónica relativamente intactas, menor desorden glandular, menor infiltración inflamatoria; disminución en niveles de TMAO, HMGB1, NLRP3 e IL-1β en suero, colon y corteza cerebral isquémica (P<0.01), aumento en niveles de ZO-1 y Occludin (P<0.01); disminución en niveles de proteína, ARNm y expresión positiva de HMGB1, NLRP3, IL-1β y aumento en ZO-1 y Occludin (P<0.01). Conclusión: el tratamiento combinado cerebro-intestino mediante electroacupuntura puede reducir el contenido del metabolito TMAO proveniente de la microbiota intestinal, regular a la baja la expresión de HMGB1/NLRP3 en tejidos intestinales, reducir factores inflamatorios periféricos y así aliviar la respuesta inflamatoria en tejidos cerebrales de ratas MCAO.

关键词

isquemia cerebral; electroacupuntura; ratas; tratamiento combinado cerebro-intestino; respuesta inflamatoria; vía TMAO-HMGB1/NLRP3

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