Estudio del mecanismo de la regulación por electroacupuntura de la vía de señalización IL-4/JAK1/STAT6 para promover la polarización de macrófagos M2 y mejorar el daño de la barrera mucosa intestinal en ratones con colitis ulcerosa

HU Xiao-mei ,  

ZHANG Hong ,  

TANG Ya-si ,  

PAN Yan-ying ,  

ZHUO Yue ,  

DENG Shi-feng ,  

YI Xi-qin ,  

摘要

El objetivo es observar el efecto de la intervención con electroacupuntura en la vía de señalización interleucina-4 (IL-4) / tirosina quinasa 1 (JAK1) / factor de transducción y activación de señal 6 (STAT6) en el tejido del colon de ratones modelo con colitis ulcerosa crónica (UC), y explorar el posible mecanismo mediante el cual la electroacupuntura promueve la polarización de macrófagos M2, mejorando el daño de la barrera mucosa intestinal en ratones modelo de UC. Se utilizaron ratones BALB/c de 8 semanas de edad, nivel SPF, con igual número de machos y hembras, estratificados por sexo y asignados al azar en grupo control (15 ratones) y grupo modelo (41 ratones) mediante tabla de números aleatorios. Se indujo modelo crónico de UC bebiendo solución al 3 % de sulfato de dextrano sódico, y los ratones con modelo exitoso se dividieron aleatoriamente en grupo modelo, grupo electroacupuntura+11B11 y grupo electroacupuntura, con 12 ratones por grupo al final. El grupo electroacupuntura+11B11 recibió inyección intraperitoneal de inhibidor de IL-4 11B11 (10 mg/kg) antes de la electroacupuntura; el grupo electroacupuntura se aplicó punción en puntos "Guanyuan", "Tianshu", "Zusanli" y "Shangjuxu", 20 min cada vez; la intervención fue diaria durante 14 días consecutivos. Tras la intervención se evaluó: ① mejoría de síntomas: incluyendo índice de actividad de la enfermedad (DAI), puntuación macroscópica del colon y cambios patológicos tisulares tras tinción HE; ② estructura y función de la barrera mucosa intestinal: observación de uniones estrechas del colon con microscopía electrónica de transmisión, imagen in vivo de filtración intestinal con FITC-4D, expresión positiva de proteínas ZO-1 y ocludina detectadas por inmunofluorescencia en tejido colónico; ③ activación de la vía IL-4/JAK1/STAT6: expresión relativa de proteínas IL-4, p-JAK1/JAK1, p-STAT6/STAT6 por Western blot en tejido colónico; ④ marcadores de polarización de macrófagos M2: detección por citometría de flujo de la proporción CD206+/CD86+ en ganglios linfáticos mesentéricos, expresión positiva de CD206 y arginasa-1 (Arg-1) por inmunofluorescencia en tejido colónico. En comparación con el grupo control, el grupo modelo mostró aumento significativo de puntuaciones DAI y macroscópicas (P<0.05), estructura mucosa colónica desordenada, filtración fluorescente intestinal severa, expresión positiva reducida de ZO-1 y ocludina (P<0.05), disminución en niveles relativos de proteínas IL-4, p-JAK1/JAK1 y p-STAT6/STAT6 (P<0.05), reducción de la proporción CD206+/CD86+ y expresión positiva de CD206 y Arg-1 (P<0.05). En comparación con el grupo modelo, en el grupo electroacupuntura se observaron reducciones en las puntuaciones DAI y macroscópicas (P<0.05), mejoría en la estructura mucosa colónica, disminución en la filtración fluorescente intestinal, aumento significativo en la expresión positiva de ZO-1 y ocludina (P<0.05), aumento en la expresión relativa de proteínas IL-4, p-JAK1/JAK1 y p-STAT6/STAT6 (P<0.05), incremento en la proporción CD206+/CD86+ y expresión positiva de CD206 y Arg-1 (P<0.05). En comparación con el grupo electroacupuntura, el grupo electroacupuntura+11B11 mostró disminuciones en las puntuaciones DAI y macroscópicas (P<0.05), desorganización de la estructura mucosa colónica, filtración fluorescente intestinal notable, reducción significativa en la expresión positiva de ZO-1 y ocludina (P<0.05), disminución en niveles relativos de proteínas IL-4, p-JAK1/JAK1 y p-STAT6/STAT6 (P<0.05), reducción en la proporción CD206+/CD86+ y expresión positiva de CD206 y Arg-1 (P<0.05). Conclusión: la electroacupuntura puede promover la reparación de la barrera mucosa del colon en ratones con UC crónica, mejorar síntomas como diarrea y hematoquecia, y su mecanismo está relacionado con la activación de la vía de señalización IL-4/JAK1/STAT6 e inducción de la polarización de macrófagos M2 en el tejido colónico.

关键词

electroacupuntura;colitis ulcerosa;barrera mucosa intestinal;macrófagos M2;vía de señalización interleucina-4/tirosina quinasa-1/factor de transducción y activación de señal 6

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