Estudio del mecanismo por el cual la electroacupuntura regula la vía IL-4/JAK1/STAT6 para promover la polarización de macrófagos M2 y mejorar el daño de la barrera mucosa intestinal en ratones con colitis ulcerosa

HU Xiao-mei ,  

ZHANG Hong ,  

TANG Ya-si ,  

PAN Yan-ying ,  

ZHUO Yue ,  

DENG Shi-feng ,  

YI Xi-qin ,  

摘要

El objetivo fue observar el efecto de la intervención con electroacupuntura en la vía de señalización de interleucina-4 (IL-4) / tirosina quinasa 1 (JAK1) / factor de transducción de señal y activación de la transcripción 6 (STAT6) en el tejido del colon en ratones modelo de colitis ulcerosa crónica (UC), y explorar el posible mecanismo por el cual la electroacupuntura promueve la polarización de macrófagos tipo M2, mejorando el daño en la barrera mucosa intestinal en ratones modelo de UC. Se utilizaron ratones BALB/c de nivel SPF de 8 semanas, mitad hembras y mitad machos, estratificados por sexo y asignados aleatoriamente en grupo blanco (15 ratones) y grupo modelo (41 ratones). El modelo de UC crónica se indujo con solución de sulfato de dextrano al 3%. Los ratones con modelo exitoso se dividieron aleatoriamente en grupo modelo, grupo electroacupuntura + 11B11 y grupo electroacupuntura. Finalmente, cada grupo incluyó 12 ratones. El grupo electroacupuntura + 11B11 recibió inyección intraperitoneal del inhibidor IL-4 11B11 (10 mg/kg) antes de la electroacupuntura; esta se aplicó en los puntos “Guanyuan”, “Tianshu”, “Zusanli” y “Shangjuxu” durante 20 min cada vez; cada grupo recibió intervención diaria durante 14 días consecutivos. Después de la intervención se evaluaron: ① Mejoría de síntomas: incluyendo la puntuación en el índice de actividad de la enfermedad (DAI), la puntuación macroscópica del colon y la observación de cambios patológicos en tejido colónico con tinción HE; ② Estructura y función de la barrera mucosa intestinal: observación de uniones estrechas del colon mediante microscopía electrónica de transmisión, imagen in vivo con fluoresceína isotiocianato-4D (FITC-4D) para detección de fuga intestinal, tinción inmunofluorescente para detectar expresión positiva de proteínas de banda oclusiva-1 (ZO-1) y ocludina en tejido colónico; ③ Activación de la vía IL-4/JAK1/STAT6: expresión proteica relativa de IL-4, p-JAK1/JAK1 y p-STAT6/STAT6 medida por Western blot; ④ Marcadores de polarización de macrófagos M2: citometría de flujo para la proporción CD206+/CD86+ en ganglios linfáticos mesentéricos, tinción inmunofluorescente para expresión positiva de CD206 y arginasa-1 (Arg-1) en tejido colónico. En comparación con el grupo blanco, el grupo modelo tuvo un aumento significativo en las puntuaciones DAI y macroscópicas (P<0.05), desorganización de la estructura mucosa del colon y fuga fluorescente intestinal grave, expresión positiva significativamente reducida de ZO-1 y ocludina (P<0.05), niveles proteicos relativos disminuidos de IL-4, p-JAK1/JAK1 y p-STAT6/STAT6 (P<0.05), reducción en la proporción CD206+/CD86+ y expresión positiva de CD206 y Arg-1 (P<0.05). En comparación con el grupo modelo, el grupo electroacupuntura mostró disminución en las puntuaciones DAI y macroscópicas (P<0.05), mejora en la estructura mucosa del colon, reducción de la fuga fluorescente intestinal, aumento significativo en la expresión positiva de ZO-1 y ocludina (P<0.05), aumento relativo de proteínas IL-4, p-JAK1/JAK1 y p-STAT6/STAT6 (P<0.05), incremento en la proporción CD206+/CD86+ y expresión positiva de CD206 y Arg-1 (P<0.05). En comparación con el grupo electroacupuntura, el grupo electroacupuntura + 11B11 mostró disminución en las puntuaciones DAI y macroscópicas (P<0.05), desorganización de la estructura mucosa del colon, fuga fluorescente intestinal evidente, disminución significativa en la expresión positiva de ZO-1 y ocludina (P<0.05), reducción de los niveles proteicos relativos de IL-4, p-JAK1/JAK1 y p-STAT6/STAT6 (P<0.05), reducción en la proporción CD206+/CD86+ y expresión positiva de CD206 y Arg-1 (P<0.05). Conclusión: La electroacupuntura puede promover la reparación de la barrera mucosa del colon en ratones con UC crónica, mejorar síntomas como diarrea y hematoquecia, y su mecanismo está relacionado con la activación de la vía IL-4/JAK1/STAT6 en tejido colónico e inducción de la polarización de macrófagos M2.

关键词

electroacupuntura; colitis ulcerosa; barrera mucosa intestinal; macrófagos M2; vía de señalización interleucina-4/tirosina quinasa-1/factor de transducción de señal y activación de la transcripción 6

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