El objetivo es observar el efecto de la electroacupuntura en el punto “Zusanli” sobre la regulación de la glucosa en sangre en ratones con prediabetes aguda de hiperglucemia, bajo riesgo y alto riesgo, y explorar preliminarmente el mecanismo mediante el cual la electroacupuntura regula la función de las células β de los islotes pancreáticos en la prediabetes de bajo riesgo. El método del estudio se divide en tres partes: el experimento de hiperglucemia aguda, la prediabetes de bajo riesgo y la prediabetes de alto riesgo. En cada parte, los ratones C57BL/6J se dividen aleatoriamente en grupo normal, grupo modelo y grupo de electroacupuntura, con 6 ratones en cada grupo. En el experimento de hiperglucemia aguda, el modelo se induce mediante inyección intraperitoneal de 2 g/kg de solución de glucosa; el grupo de electroacupuntura recibe una estimulación eléctrica bilateral en el punto “Zusanli” durante 20 minutos. En el experimento de prediabetes de bajo riesgo, el modelo se induce con una dieta alta en grasas durante una semana; a partir del día 4, cuando se alcanzan los criterios de glucosa alterada para prediabetes, se realiza la electroacupuntura diariamente con los mismos parámetros durante 4 sesiones. En el experimento de prediabetes de alto riesgo, el modelo se induce con una dieta alta en grasas durante 8 semanas; después de 4 semanas de modelado, el grupo de electroacupuntura recibe la intervención 3 veces por semana, con un total de 12 sesiones. Se utiliza un glucómetro para medir la glucosa en sangre y la tolerancia a la glucosa; ELISA para medir hemoglobina glucosilada, insulina y glucagón séricos; la coloración HE para observar cambios morfológicos en el páncreas; se aíslan células β y se detecta la expresión de marcadores mediante PCR; la inmunotransferencia para medir la expresión de proteínas de estrés del retículo endoplásmico (ATF6, ERN1, EIF2AK3), envejecimiento celular (P21) y receptores de acetilcolina (M2-AchR, M3-AchR); la inmunohistoquímica fluorescente para detectar marcadores de envejecimiento P21 en tejido pancreático y la expresión positiva de c-fos en neuronas ChAT+ que inervan el páncreas en los ganglios pancreáticos y en el núcleo dorsal del nervio vago (DMV). Resultados: En el experimento de hiperglucemia aguda, los niveles de glucosa en sangre aumentaron en el grupo modelo comparado con el grupo normal (P<0.001) y la insulina sérica aumentó (P<0.05); comparado con el grupo modelo, el grupo de electroacupuntura presentó disminución en la glucosa en sangre a los 15, 30 y 60 minutos (P<0.01) y aumento de insulina sérica (P<0.05). En el experimento de prediabetes de bajo riesgo, la glucosa en sangre aumentó el día 3 en el grupo modelo (P<0.001), la tolerancia a la glucosa se elevó (P<0.05, P<0.01), la expresión de receptores de acetilcolina M2-AchR y M3-AchR en células β disminuyó (P<0.05), las proteínas ATF6, ERN1 y EIF2AK3 aumentaron (P<0.01, P<0.05), la proteína P21 aumentó (P<0.05), el número de células co-marcadas Insulin+/P21+ aumentó (P<0.01); comparado con el grupo modelo, el grupo de electroacupuntura disminuyó la glucosa en sangre en los días 4, 6 y 7 (P<0.001, P<0.01), disminuyó la tolerancia a la glucosa (P<0.05, P<0.01), aumentó la insulina sérica (P<0.05), aumentó el número de neuronas co-marcadas ChAT+/c-fos+ en los ganglios pancreáticos y DMV (P<0.05), aumentó la expresión de receptores de acetilcolina M2-AchR y M3-AchR (P<0.01, P<0.05), disminuyó las proteínas ATF6, ERN1, EIF2AK3 (P<0.01, P<0.05), disminuyó la proteína P21 (P<0.05) y disminuyó el número de células co-marcadas Insulin+/P21+ (P<0.01). En el experimento de prediabetes de alto riesgo, la glucosa en sangre aumentó después de 1 semana de modelado en el grupo modelo (P<0.001), la tolerancia a la glucosa se elevó (P<0.05, P<0.01), la hemoglobina glucosilada sérica aumentó (P<0.05), el volumen de los islotes aumentó, la insulina sérica aumentó (P<0.01) y el glucagón sérico disminuyó (P<0.05); comparado con el grupo modelo, el grupo de electroacupuntura mostró disminución de glucosa sanguínea en la 5ª y 6ª semana (P<0.01, P<0.05), ligera disminución del volumen de islotes, disminución de insulina sérica y glucagón (P<0.01, P<0.05). Conclusión: La electroacupuntura en “Zusanli” puede restaurar el equilibrio de glucosa en sangre, con el efecto óptimo durante la fase de prediabetes de bajo riesgo, probablemente relacionado con la activación del nervio vago e inhibición del estrés del retículo endoplásmico en células β.
关键词
Zusanli; prediabetes; nervio vago; estrés del retículo endoplásmico