Efecto de la electroacupuntura sobre proteínas relacionadas con la respuesta a proteínas mal plegadas mitocondriales en el colon de ratones con estreñimiento funcional

Wang Wen ,  

Li Yanqiu ,  

Zeng Weijian ,  

Yan Xiangyun ,  

He Zhaoxuan ,  

Xiao Xianjun ,  

Li Ying ,  

Yao Junpeng ,  

摘要

El objetivo es observar el efecto de la electroacupuntura en los puntos "Tianshu" y "Shangjuxu" sobre la expresión de proteínas relacionadas con la respuesta a proteínas mal plegadas mitocondriales (UPRmt) en el colon de ratones modelo de estreñimiento funcional (FC), y explorar el posible mecanismo por el cual la electroacupuntura mejora los síntomas de FC. Métodos: 18 ratones machos C57BL/6J fueron asignados aleatoriamente en grupo control, grupo modelo y grupo de electroacupuntura, con 6 ratones por grupo. Se construyó el modelo FC mediante administración oral de loperamida durante 14 días. En el grupo de electroacupuntura, se aplicó intervención alterna en los puntos unilaterales "Tianshu" y "Shangjuxu" (ondas densas y dispersas, 3 Hz/15 Hz), con tratamiento continuo 5 veces por semana, para un total de 10 intervenciones. Los grupos control y modelo fueron simplemente fijados. Se evaluó la función gastrointestinal de los ratones mediante el tiempo de expulsión de la primera materia fecal azul, el número de partículas fecales en 6 horas, la puntuación de características de las heces, la tasa de contenido de agua fecal y el índice de tránsito intestinal delgado. Se observaron cambios patológicos del tejido colorrectal mediante tinción HE, la ultraestructura mitocondrial mediante microscopía electrónica de transmisión, el potencial de membrana mitocondrial y niveles de ROS mitocondriales (mtROS) mediante citometría de flujo, el contenido mitocondrial de ATP mediante método colorimétrico, y la expresión de moléculas clave del UPRmt como la proteína de choque térmico 60 (HSP60) y la proteasa LONP1 en tejidos colorrectales mediante inmunohistoquímica. Resultados: en comparación con el grupo control, el grupo modelo presentó un tiempo prolongado para la expulsión de la primera materia fecal azul (P<0.01), disminución en el número de partículas fecales en 6 horas (P<0.01), reducción en la puntuación de características fecales, contenido de agua fecal y tasa de tránsito delgado (P<0.01, P<0.05), una notoria hinchazón mitocondrial en tejido colorrectal, membranas rotas, crestas fracturadas severamente, reducción del potencial de membrana mitocondrial (P<0.01), disminución del contenido de ATP (P<0.01), aumento en niveles de mtROS (P<0.01), y disminución de la expresión positiva de HSP60 y LONP1 en células musculares lisas del colon (SMC) (P<0.01). Tras la intervención, en comparación con el grupo modelo, el grupo de electroacupuntura mostró reducción del tiempo para expulsión de la primera materia fecal azul (P<0.01), aumento en el número de partículas fecales en 6 horas (P<0.01), incremento en la puntuación de características fecales, contenido de agua fecal y tasa de tránsito (P<0.01, P<0.05), leve hinchazón mitocondrial en tejido colorrectal, notable mejoría en daños de membrana y crestas, aumento del potencial de membrana mitocondrial (P<0.01), incremento en niveles de ATP (P<0.01), disminución en niveles de mtROS (P<0.01), y aumento de expresión positiva de HSP60 y LONP1 en SMC (P<0.05). Conclusión: la electroacupuntura en "Tianshu" y "Shangjuxu" puede promover eficazmente la función del tránsito intestinal en ratones con FC, reparar la estructura y función mitocondrial en células musculares lisas del colon, posiblemente mediante la regulación al alza de HSP60 y LONP1 en SMC, activando así la UPRmt relacionada.

关键词

electroacupuntura; estreñimiento funcional; mitocondrias; respuesta a proteínas mal plegadas; proteína de choque térmico 60; proteasa LON

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