Efecto de la electroacupuntura en la vía de señalización SIRT1/HIF-1α/Nrf2 de la aorta torácica en ratones ApoE-/- con aterosclerosis

Luo Ya ,  

Hu Xinyue ,  

Zeng Yanwen ,  

Zhang Ning ,  

摘要

Objetivo: observar el efecto de la electroacupuntura en el metabolismo de lípidos sanguíneos, el estado de estrés oxidativo, la morfología patológica de la aorta torácica y la expresión molecular de la vía de señalización del regulador silencioso de información 1 (SIRT1) / factor inducible por hipoxia 1α (HIF-1α) / factor nuclear 2 relacionado con E2 (Nrf2) en ratones ApoE-/- con aterosclerosis (AS), para investigar el posible mecanismo de prevención y tratamiento de la AS mediante electroacupuntura. Métodos: 10 ratones C57BL/6J fueron usados como grupo control, alimentados con dieta normal; 42 ratones macho ApoE-/- de nivel SPF fueron alimentados con dieta alta en grasas durante 12 semanas para establecer el modelo de AS, se tomaron aleatoriamente 2 para validar el modelo, tras validar el éxito, se dividieron aleatoriamente en grupo modelo, grupo electroacupuntura, grupo electroacupuntura + inhibidor y grupo agonista, con 10 ratones por grupo. El grupo electroacupuntura recibió tratamiento en los puntos "Neiguan", "Tongli" y "Zusanli" con ondas de densidad variable, 2 Hz/15 Hz, intensidad eléctrica de 0.3 mA, 20 minutos por sesión; el grupo electroacupuntura + inhibidor recibió inyección intraperitoneal del inhibidor SIRT1 EX-527 (10 mg/kg), el resto del tratamiento igual que el grupo electroacupuntura; el grupo agonista recibió por gavage el agonista SIRT1 resveratrol (50 mg/kg). Los tratamientos se realizaron un día sí y un día no durante 8 semanas. Se midió la masa corporal cada 4 semanas; por método colorimétrico se midieron los niveles séricos de triglicéridos (TG), colesterol total (TC), colesterol de lipoproteínas de alta densidad (HDL-C), colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL-C), actividad de superóxido dismutasa (SOD), actividad de glutatión peroxidasa (GSH-Px) y contenido de malondialdehído (MDA); la tinción HE se usó para observar los cambios morfológicos patológicos de la aorta; western blot y PCR cuantitativa en tiempo real se usaron para detectar la expresión de proteínas y ARNm de SIRT1, HIF-1α y Nrf2 en la aorta torácica. Resultados: tras el tratamiento, comparado con el grupo control, el peso corporal de los ratones del grupo modelo aumentó (P<0.01); los niveles séricos de HDL-C y las actividades de GSH-Px y SOD disminuyeron (P<0.01); los niveles de TC, TG, LDL-C y MDA aumentaron (P<0.01); la tinción HE mostró cambios patológicos evidentes en la pared vascular, engrosamiento de la íntima y superficie no lisa, proliferación de células endoteliales con infiltración de células inflamatorias en la superficie de las placas, desorden en la disposición de la capa muscular media lisa, daño en la capa elástica, presencia local de células espumosas y proliferación de células musculares lisas; la expresión de proteínas y ARNm de SIRT1 y Nrf2 en la aorta disminuyó (P<0.01), mientras que la expresión de HIF-1α aumentó (P<0.01). Comparado con el grupo modelo, el peso corporal de los ratones en los grupos electroacupuntura y agonista disminuyó (P<0.01); los niveles séricos de HDL-C y las actividades de GSH-Px y SOD aumentaron (P<0.01, P<0.05); los niveles de TC, TG, LDL-C y MDA disminuyeron (P<0.01); la tinción HE mostró una estructura vascular intacta, íntima relativamente lisa, leve desprendimiento de células endoteliales, disposición ordenada de la capa muscular media, sin cambios estructurales evidentes en la capa elástica, leve proliferación de células espumosas y musculares lisas; la expresión de proteínas y ARNm de SIRT1 y Nrf2 aumentó (P<0.01, P<0.05), mientras que la expresión de HIF-1α disminuyó (P<0.01). Comparado con el grupo electroacupuntura, el grupo electroacupuntura + inhibidor mostró aumento del peso corporal (P<0.05); los niveles séricos de HDL-C y actividades de GSH-Px y SOD disminuyeron (P<0.05); los niveles de TC, TG, LDL-C y MDA aumentaron (P<0.01, P<0.05); la tinción HE mostró daño en la integridad de la pared vascular, engrosamiento y lesión de la íntima, proliferación de células endoteliales con infiltración de células inflamatorias en la superficie de las placas, desorden en la disposición de la capa muscular lisa, proliferación evidente de células musculares lisas; la expresión de proteínas y ARNm de SIRT1 y Nrf2 disminuyó (P<0.01, P<0.05), mientras que la expresión de HIF-1α aumentó (P<0.01, P<0.05). Conclusión: la electroacupuntura puede regular los niveles lipídicos en ratones modelo de AS mediante la activación de la vía de señalización SIRT1/HIF-1α/Nrf2 que media la vía antioxidante, reduciendo el daño por estrés oxidativo, reparando la íntima vascular y retrasando el progreso de la AS.

关键词

electroacupuntura; aterosclerosis; SIRT1; HIF-1α; Nrf2

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