Estudio del mecanismo por el cual la electroacupuntura mejora el dolor en ratas con radiculopatía cervical mediante la regulación de la proteína Piezo1 en la vía de señalización NO/cGMP/PKG

Huang Wenjing ,  

Su Shengyong ,  

Wang Tian ,  

Su Hong ,  

Huang Xinyu ,  

Li Xin ,  

Zheng Guangmei ,  

Yin Lili ,  

Xu Zhiyi ,  

Huang Ying ,  

Wei Gangliang ,  

Li Xiaoming ,  

摘要

El objetivo fue investigar el efecto regulador de la electroacupuntura sobre la proteína Piezo1 en ratas con radiculopatía cervical (CSR) y su influencia en la vía de señalización de óxido nítrico (NO)/monofosfato cíclico de guanosina (cGMP)/proteína quinasa G (PKG), así como explorar el mecanismo analgésico de la electroacupuntura para CSR. Métodos: ratas SD macho se dividieron aleatoriamente en grupo de cirugía simulada, grupo modelo, grupo de electroacupuntura y grupo de electroacupuntura + Yoda1, con 10 ratas por grupo. Se prepararon modelos de CSR en las ratas de los grupos modelo, electroacupuntura y electroacupuntura + Yoda1 mediante la técnica de inserción de hilo en el canal vertebral. El grupo de electroacupuntura recibió tratamiento con electropunción bilateral en los puntos "Hegu" y "Taichong" durante 20 minutos cada vez, una vez al día durante 7 días consecutivos; el grupo electroacupuntura + Yoda1 fue inyectado intraperitonealmente con el agonista de Piezo1, Yoda1 (1.5 mg/kg), antes del tratamiento de electropunción. Antes y después de la intervención se evaluaron la puntuación de la marcha, el umbral de retirada mecánica y la latencia de la respuesta de retirada térmica en las ratas; se observaron cambios patológicos en el tejido de la médula espinal mediante tinción HE; se detectó el nivel de expresión del gen Piezo1 en el tejido de la médula espinal mediante qPCR; se detectó la expresión de Piezo1 y calmodulina (CaM) en el tejido de la médula mediante inmunofluorescencia doble; se evaluó la expresión proteica relativa de CaM, sintasa neuronal de óxido nítrico (nNOS), guanilato ciclasa soluble (sGC) y PKG1 mediante Western blot; se midió el contenido de cGMP en el tejido de la médula espinal mediante ELISA; se determinó el contenido de NO en el tejido de la médula mediante la colorimetría de nitrito. Resultados: en comparación con el grupo de cirugía simulada, la puntuación de la marcha de las ratas del grupo modelo fue mayor antes de la intervención (P<0.01), el umbral de retirada mecánica disminuyó y la latencia de retirada térmica se acortó (P<0.01); el nivel de ARNm Piezo1, la intensidad y colocalización de la inmunofluorescencia de Piezo1 y CaM, la expresión relativa de proteínas CaM, nNOS, sGC, PKG1, y el contenido de cGMP y NO aumentaron significativamente (P<0.01) en el tejido de la médula espinal del grupo modelo; la tinción HE mostró neuronas contraídas, tinción celular oscura, límites indistintos entre núcleo y citoplasma, proliferación de células gliales, aumento de la densidad celular, dilatación de microvasos y hemorragias. En comparación con el grupo modelo, el grupo de electroacupuntura mostró disminución en la puntuación de la marcha (P<0.01), aumento en el umbral de retirada mecánica y prolongación de la latencia de retirada térmica (P<0.01); disminución en la expresión del ARNm Piezo1, intensidad y colocalización de inmunofluorescencia de Piezo1 y CaM, expresión relativa de proteínas CaM, nNOS, sGC, PKG1, y contenidos de cGMP y NO (P<0.01) en el tejido de la médula espinal; tinción HE mostró neuronas contraídas individuales, reducción en la dilatación microvascular y proliferación glial en comparación con el grupo modelo. En comparación con el grupo de electroacupuntura, el grupo electroacupuntura + Yoda1 mostró acortamiento de la latencia de retirada térmica (P<0.01); aumentos en la expresión del ARNm Piezo1, intensidad y colocalización de inmunofluorescencia de Piezo1 y CaM, expresión relativa de proteínas CaM, nNOS, sGC, PKG1 y contenidos de cGMP y NO (P<0.05, P<0.01); tinción HE mostró neuronas contraídas, aumento en la cantidad de células gliales, y expansión microvascular parcial con hemorragia. Conclusión: La electroacupuntura puede aliviar eficazmente el dolor en ratas con CSR, probablemente mediante la inhibición de la activación de la proteína Piezo1 en la médula espinal, y la inhibición de la vía de señalización NO/cGMP/PKG, ejerciendo así un efecto analgésico.

关键词

radiculopatía cervical; electroacupuntura; analgesia; proteína Piezo1

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