Estudio del mecanismo por el cual la electroacupuntura mejora el dolor en ratas con spondilopatía cervical radicular regulando la vía de señalización NO/cGMP/PKG a través de la proteína Piezo1
El objetivo es investigar el efecto regulador de la electroacupuntura en la proteína Piezo1 en ratas con mielopatía cervical radicular (CSR) y su influencia en la vía de señalización del óxido nítrico (NO)/monofosfato cíclico de guanosina (cGMP)/proteína quinasa G (PKG), así como explorar el mecanismo analgésico del tratamiento con electroacupuntura para CSR. Métodos: Se dividieron aleatoriamente ratas macho SD en grupo sham, grupo modelo, grupo electroacupuntura y grupo electroacupuntura + Yoda1, con 10 ratas en cada grupo. El modelo CSR se estableció por el método de inserción de hilo en el canal vertebral en los grupos modelo, electroacupuntura y electroacupuntura + Yoda1. El grupo electroacupuntura recibió tratamiento bilateral en los puntos "Hegu" y "Taichong" con electroacupuntura, 20 min por sesión, durante 7 días consecutivos; el grupo electroacupuntura + Yoda1 recibió inyección intraperitoneal del agonista Piezo1 Yoda1 (1,5 mg/kg) antes del tratamiento. Se evaluaron las puntuaciones de marcha, el umbral de retirada mecánica y la latencia de retirada térmica antes y después de la intervención; se observaron cambios patológicos en el tejido de la médula espinal mediante tinción HE; la expresión del gen Piezo1 en tejido medular se detectó por qPCR; la expresión de Piezo1 y calmodulina (CaM) se detectó por doble tinción inmunofluorescente; la expresión de proteínas CaM, nNOS, sGC y PKG1 se midió mediante Western blot; el contenido de cGMP se midió con ELISA; y el contenido de NO mediante método colorimétrico de nitritos. Resultados: Comparado con el grupo sham, la puntuación de marcha en el grupo modelo fue más alta antes de la intervención (P<0,01), con disminución del umbral de retirada mecánica y acortamiento de la latencia de retirada térmica (P<0,01); la expresión de ARNm de Piezo1, la intensidad de fluorescencia inmunitaria de Piezo1 y CaM, la expresión relativa de proteínas CaM, nNOS, sGC, PKG1, y los niveles de cGMP y NO aumentaron significativamente (P<0,01); la tinción HE mostró en el grupo modelo retracción neuronal, oscurecimiento del color de las células, indistinción entre núcleo y citoplasma, proliferación de células gliales, aumento de la densidad celular, y dilatación y hemorragia en microvasos. En comparación con el grupo modelo, el grupo electroacupuntura presentó puntuaciones de marcha más bajas (P<0,01), aumento del umbral de retirada mecánica y prolongación de la latencia de retirada térmica (P<0,01); la expresión de ARNm de Piezo1, la intensidad de fluorescencia inmunitaria de Piezo1 y CaM, la expresión relativa de proteínas CaM, nNOS, sGC, PKG1, y los niveles de cGMP y NO disminuyeron (P<0,01); la tinción HE mostró retraction neuronal leve, menor dilatación de microvasos y proliferación de células gliales en el grupo electroacupuntura en comparación con el grupo modelo. En comparación con el grupo electroacupuntura, el grupo electroacupuntura + Yoda1 mostró acortamiento de la latencia de retirada térmica (P<0,01), aumento en la expresión de ARNm de Piezo1, intensidad de fluorescencia inmunitaria de Piezo1 y CaM, expresión relativa de proteínas CaM, nNOS, sGC, PKG1 y niveles de cGMP y NO (P<0,05, P<0,01); la tinción HE mostró retracción neuronal, aumento del número de células gliales y dilatación parcial y hemorragia en microvasos. Conclusión: La electroacupuntura puede aliviar eficazmente el dolor en ratas con CSR, probablemente a través de la inhibición de la activación de la proteína Piezo1 en la médula espinal y la supresión de la vía de señalización NO/cGMP/PKG, manifestando así un efecto analgésico.