Estudio del mecanismo por el cual la electroacupuntura mejora el dolor en ratas con radiculopatía cervical mediante la regulación de la proteína Piezo1 en la vía de señalización NO/cGMP/PKG

Huang Wenjing ,  

Su Shengyong ,  

Wang Tian ,  

Su Hong ,  

Huang Xinyu ,  

Li Xin ,  

Zheng Guangmei ,  

Yin Lili ,  

Xu Zhiyi ,  

Huang Ying ,  

Wei Gangliang ,  

Li Xiaoming ,  

摘要

Objetivo: Investigar el efecto de la electroacupuntura en la regulación de la proteína Piezo1 en ratas con radiculopatía cervical (CSR) y su influencia en la vía de señalización del óxido nítrico (NO)/monofosfato cíclico de guanosina (cGMP)/proteína quinasa G (PKG), explorando el mecanismo analgésico de la electroacupuntura en el tratamiento de CSR. Método: Ratas SD macho fueron asignadas aleatoriamente en cuatro grupos: grupo sham, grupo modelo, grupo electroacupuntura y grupo electroacupuntura+Yoda1, con 10 ratas por grupo. El modelo CSR se estableció mediante el método de inserción de catéter en el canal vertebral en los grupos modelo, electroacupuntura y electroacupuntura+Yoda1. El grupo electroacupuntura recibió tratamiento en ambos lados en los puntos “Hegu” y “Taichong” con electroacupuntura, 20 min por sesión, una vez al día durante 7 días consecutivos; el grupo electroacupuntura+Yoda1 se administró por vía intraperitoneal el agonista de Piezo1 Yoda1 (1.5 mg/kg) antes del tratamiento. Antes y después de la intervención se evaluaron la marcha, el umbral de retirada mecánica y la latencia de la reacción térmica; se observaron cambios patológicos en el tejido de la médula espinal mediante tinción HE; se midió la expresión génica de Piezo1 en la médula con qPCR; se detectó la expresión de Piezo1 y calmodulina (CaM) mediante doble tinción inmunofluorescente; se detectó la expresión de proteínas CaM, óxido nítrico neuronal sintasa (nNOS), guanilato ciclasa soluble (sGC) y PKG1 mediante Western blot; se midió el contenido de cGMP con ELISA; se midió el contenido de NO con método de coloración de nitrito. Resultados: En comparación con el grupo sham, antes de la intervención, el grupo modelo presentó incremento en la puntuación de marcha (P<0.01), disminución en el umbral de retirada mecánica y acortamiento de la latencia de retirada térmica (P<0.01); la expresión de mRNA de Piezo1, la intensidad inmunofluorescente de Piezo1 y CaM y su colocalización positiva, la expresión relativa de proteínas CaM, nNOS, sGC, PKG1, y los niveles de cGMP y NO aumentaron significativamente en el tejido de la médula espinal (P<0.01); La tinción HE mostró contracción neuronal, oscurecimiento celular, indistinción del límite núcleo-citoplasma, proliferación de células gliales, aumento de la densidad celular y dilatación microvascular con hemorragia. En comparación con el grupo modelo, el grupo electroacupuntura mostró disminución en la puntuación de marcha (P<0.01), aumento en el umbral de retirada mecánica y prolongación de la latencia de retirada térmica (P<0.01); disminución en la expresión de mRNA de Piezo1, intensidad inmunofluorescente de Piezo1 y CaM, expresión relativa de proteínas CaM, nNOS, sGC, PKG1 y niveles de cGMP y NO (P<0.01); La tinción HE mostró contracción neuronal individual, menos dilatación microvascular y proliferación glial comparado con el grupo modelo. En comparación con el grupo electroacupuntura, el grupo electroacupuntura+Yoda1 presentó acortamiento en la latencia de retirada térmica (P<0.01); aumento en la expresión de mRNA de Piezo1, intensidad inmunofluorescente de Piezo1 y CaM, expresión relativa de proteínas CaM, nNOS, sGC, PKG1 y niveles de cGMP y NO (P<0.05, P<0.01); La tinción HE mostró contracción neuronal, aumento en el número de células gliales y dilatación microvascular parcial con hemorragia. Conclusión: La electroacupuntura puede aliviar eficazmente el dolor en ratas CSR, probablemente mediante la inhibición de la activación de la proteína Piezo1 en la médula espinal y la inhibición de la vía de señalización NO/cGMP/PKG, lo que ejerce un efecto analgésico.

关键词

radiculopatía cervical; electroacupuntura; analgesia; proteína Piezo1

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