Mecanismo del efecto de la acupuntura en los puntos 'Houxi' y 'Huantiao' sobre la regulación de la vía de señalización PI3K/AKT/mTOR y la autofagia de las células del núcleo pulposo en un modelo de degeneración del disco lumbar en ratas

HU Zhi-xiang ,  

WU Han ,  

LÜ Heng ,  

ZHANG Hao ,  

ZHAI Chun-tao ,  

LI Sheng-yun ,  

WANG Zheng-hao ,  

LÜ Yu-e ,  

摘要

El objetivo es observar el efecto de la acupuntura en los puntos 'Houxi' y 'Huantiao' sobre la vía de señalización fosfatidilinositol-3 quinasa (PI3K)/proteína quinasa B (AKT)/objetivo de rapamicina en mamíferos (mTOR) y la autofagia de las células del núcleo pulposo en un modelo de rata con degeneración del disco intervertebral lumbar (IDD), explorando su posible mecanismo para retrasar la IDD. Métodos: se seleccionaron 36 ratas SD y se dividieron aleatoriamente en grupo de cirugía simulada, grupo modelo y grupo de acupuntura, con 12 ratas en cada grupo. Los grupos modelo y acupuntura desarrollaron el modelo IDD mediante punción del anillo fibroso. Después de la modelización exitosa, se administró tratamiento de acupuntura en los puntos 'Houxi' y 'Huantiao' en el grupo de acupuntura, 20 minutos por sesión, una vez al día durante 14 días. Se midió el umbral del reflejo de retirada mecánica del pie derecho con filamentos VonFrey antes y después de la modelización y en los días 7 y 14 tras la intervención; también se midió la latencia del reflejo de retirada inducido por estímulo térmico; se observaron características morfológicas del tejido del disco intervertebral mediante tinción HE; se detectaron niveles de agrecano, colágeno tipo II, factor de transcripción SOX9, metaloproteinasas MMP3 y MMP13 en el tejido del núcleo pulposo mediante ELISA; expresión de ARNm SOX9 y MMP13 por PCR cuantitativa en tiempo real; expresión positiva de LC3 por inmunofluorescencia; y proteínas asociadas con la vía PI3K/AKT/mTOR y LC3-II, Beclin1, p62 mediante Western blot. Resultados: en comparación con el grupo cirugía simulada, el grupo modelo mostró una disminución del umbral del reflejo mecánico y la latencia del reflejo térmico en los días 7 y 14 (P0.001), reducción de los contenidos de agrecano, colágeno II, SOX9 y expresión de ARNm SOX9 (P0.001, P0.01), aumento de contenidos de MMP3, MMP13 y expresión de ARNm MMP13, mayor expresión positiva de LC3, y niveles elevados de Beclin1 y LC3-II (P0.001), así como disminución de las ratios fosforiladas p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT, p-mTOR/mTOR y expresión de proteína p62 (P0.001). En comparación con el grupo modelo, el grupo de acupuntura mostró aumento del umbral del reflejo mecánico y la latencia del reflejo térmico (P0.001), incremento en los niveles de agrecano, colágeno II, SOX9 y expresión de ARNm SOX9 (P0.001), disminución en los niveles de MMP3, MMP13, expresión de ARNm MMP13, expresión positiva de LC3 y niveles de Beclin1 y LC3-II (P0.001, P0.01, P0.05); y aumento de las ratios p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT, p-mTOR/mTOR y expresión de p62 (P0.01, P0.05, P0.001). La tinción HE mostró que el grupo modelo tenía menor número de células del núcleo pulposo con morfología desordenada y muchas vacuolas; mientras que en el grupo de acupuntura las células estaban dispuestas más regularmente, con morfología normal y menor número de vacuolas. Conclusión: la acupuntura en los puntos 'Houxi' y 'Huantiao' puede retardar la progresión del IDD regulando la autofagia de las células del núcleo pulposo del disco lumbar, reduciendo la degradación de la matriz extracelular, y su mecanismo potencial podría estar estrechamente relacionado con la activación de la vía PI3K/Akt/mTOR mediada por la acupuntura en dichos puntos.

关键词

acupuntura;Houxi;Huantiao;degeneración del disco lumbar;vía de señalización PI3K/Akt/mTOR;autofagia

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