El objetivo es aclarar el efecto de seguridad de la trombólisis fuera de la ventana temporal ultra extensa mediante acupuntura en modelos de rata con accidente cerebrovascular isquémico, y revelar el mecanismo por el cual la acupuntura mejora la seguridad de la trombólisis al inhibir la vía de señalización de la quinasa de interacción del receptor 1 (RIPK1)/quinasa de interacción del receptor 3 (RIPK3)/proteína similar a cinasa mixta del sustrato (MLKL) que media la necroptosis programada. Métodos: Se seleccionaron al azar 33 ratas SD como grupo de cirugía simulada, y 99 ratas SD con modelo exitoso se dividieron al azar mediante tabla de números en grupo modelo, grupo trombólisis a las 6 h, grupo acupuntura + trombólisis a las 6 h, con 33 ratas en cada grupo. Excepto el grupo de cirugía simulada, las demás ratas se sometieron a modelo de accidente cerebrovascular isquémico mediante método de embolización con coágulo sanguíneo autólogo. El grupo de trombólisis a las 6 h recibió tratamiento trombolítico intravenoso con activador tisular recombinante del plasminógeno a las 6 h después del modelo; el grupo acupuntura + trombólisis a las 6 h recibió acupuntura simultáneamente al tratamiento trombolítico en los puntos bilaterales "Neiguan" y "Shuigou", con aguja retenida durante 20 minutos. La puntuación de Bederson evaluó la función neurológica de las ratas; la tinción con cloruro de 2,3,5-trifeniltetrazolio observó el volumen del infarto cerebral; el método de penetración con azul de Evans detectó la permeabilidad de la barrera hematoencefálica (BHE); el contenido de agua cerebral se midió por método volumétrico; la concentración de hemoglobina en tejido cerebral isquémico se determinó por espectrofotometría; la expresión de proteínas RIPK1, RIPK3 y p-MLKL en la penumbra isquémica se analizó mediante Western blot; la expresión de ARNm RIPK1, RIPK3 y MLKL se midió por PCR cuantitativa en tiempo real; y la colocalización de p-MLKL con células endoteliales se detectó mediante doble tinción inmunofluorescente. Resultados: El flujo sanguíneo de las ratas disminuyó significativamente tras modelado, y la puntuación neurológica aumentó a las 2 h post-modelado (P<0.01). A las 24 h post-modelado, en comparación con el grupo cirugía simulada, el grupo modelo mostró aumento en la puntuación neurológica, porcentaje de volumen de infarto cerebral y permeabilidad de la BHE (P<0.01); incremento en los niveles de proteína RIPK1 (P<0.05), ARNm RIPK1, RIPK3 y MLKL (P<0.01, P<0.05); y aumento en el porcentaje de células positivas para colocalización de p-MLKL y células endoteliales (P<0.01). Comparado con el grupo modelo, el grupo trombólisis a las 6 h mostró un aumento adicional en permeabilidad de BHE, contenido de agua cerebral y concentración de hemoglobina cerebral (P<0.01, P<0.05); niveles elevados de proteínas RIPK3 y p-MLKL (P<0.05), ARNm RIPK3 y MLKL (P<0.05); y aumento en el porcentaje de células con colocalización p-MLKL/células endoteliales (P<0.01). Comparado con el grupo modelo, el grupo acupuntura + trombólisis a las 6 h disminuyó la puntuación neurológica, porcentaje de volumen de infarto cerebral, permeabilidad de BHE y contenido de agua cerebral (P<0.01, P<0.05); niveles reducidos de proteína y ARNm RIPK1 (P<0.05); y porcentaje reducido de células positivas para colocalización p-MLKL y células endoteliales (P<0.05). Comparado con el grupo trombólisis a las 6 h, el grupo acupuntura + trombólisis redujo la puntuación neurológica, porcentaje de volumen de infarto, permeabilidad de BHE, contenido de agua cerebral y concentración de hemoglobina (P<0.01); disminuyó la expresión de proteínas RIPK1, RIPK3 y p-MLKL (P<0.05, P<0.01), así como los ARNm RIPK1, RIPK3 y MLKL (P<0.01, P<0.05); y redujo el porcentaje de células positivas para colocalización p-MLKL/células endoteliales (P<0.01). Conclusión: La intervención oportuna con acupuntura puede mejorar la función neurológica post-trombólisis en ratas con accidente cerebrovascular isquémico, reducir el volumen de infarto cerebral, bajar la permeabilidad de la BHE, disminuir las complicaciones del trombólisis y así mejorar la seguridad de la trombólisis; el mecanismo podría estar relacionado con la inhibición por acupuntura de la necroptosis programada de las células endoteliales mediada por la vía de señalización RIPK1/RIPK3/MLKL.

acupuntura; accidente cerebrovascular isquémico; necroptosis programada; seguridad del trombólisis