El objetivo es observar el efecto del método de acupuntura "Despertar del cerebro y apertura de orificios" sobre la vía de señalización del intercambiador de nucleótidos de guanina 1 (Epac1)/proteína Rap1 en la zona penumbra isquémica (IP) de la corteza cerebral en ratas con un modelo de oclusión/reperfusión de la arteria cerebral media (MCAO/R), y explorar la vía molecular mediante la cual este método al reparar la barrera hematoencefálica (BBB) alivia el daño cerebral por isquemia/reperfusión (CIRI). 84 ratas macho SD se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos: cirugía simulada, modelo, acupuntura y acupuntura + ESI-09 (inhibidor de Epac1), con 21 ratas por grupo. Excepto en el grupo de cirugía simulada, los demás grupos se sometieron a un modelo MCAO/R derecho usando el método modificado de tóner Longa. El grupo de acupuntura recibió el método "Despertar del cerebro y apertura de orificios" en los puntos "Shuigou" y "Neiguan" bilaterales, mientras que el grupo de acupuntura + ESI-09 recibió inyección intraperitoneal de ESI-09 (10 mg/kg) tras la reperfusión y la misma acupuntura. Se monitorizó el flujo sanguíneo cerebral con imágenes láser de dispersión (antes de la isquemia, 2 h de isquemia, 2 h tras reperfusión); se evaluó la función neurológica con la escala modificada de Bederson (24 h tras reperfusión); se midió el porcentaje de volumen del infarto cerebral mediante tinción TTC; la cantidad de agua en el cerebro derecho se calculó con método húmedo-seco; la permeabilidad de la BBB en la corteza derecha se evaluó con tinción Evans Blue (EB); se detectó la expresión proteica y ARNm de Epac1 y Rap1 en la zona IP de la corteza derecha por Western blot y PCR cuantitativa en tiempo real; la co-localización inmunofluorescente de F-actina y la molécula de adhesión endotelial plaquetaria (CD31, marcador endotelial) se analizó en la zona IP; se observó la ultraestructura de la BBB con microscopía electrónica de transmisión. Los resultados mostraron que, salvo el grupo simulacro, en todos los grupos el flujo sanguíneo cerebral cayó por debajo del 70 % del nivel basal tras la isquemia y recuperó más del 70 % a las 2 h de reperfusión, lo que valida el modelo. A las 24 h de reperfusión, comparado con el grupo simulacro, el grupo modelo mostró aumento en la puntuación neurológica, porcentaje de volumen de infarto, contenido de agua cerebral y contenido de EB (P<0,01), disminución en la expresión proteica y ARNm de Epac1 y Rap1 en la zona IP (P<0,05, P<0,01), aumento en la co-localización F-actina/CD31 (P<0,01), membrana basal de la BBB difusa, discontinua, y disolución parcial o ausencia de las uniones estrechas (TJ). En comparación con el grupo modelo, el grupo de acupuntura mejoró los índices de lesión (P<0,01), aumentó la expresión proteica y ARNm de Epac1 y Rap1 (P<0,01), disminuyó la co-localización F-actina/CD31 (P<0,01), mantuvo una membrana basal continua y estructura TJ compacta. En comparación con el grupo de acupuntura, el grupo acupuntura + ESI-09 mostró reversión de los índices de lesión (P<0,01), disminución en la expresión proteica y ARNm de Epac1 y Rap1 (P<0,01), aumento de la co-localización F-actina/CD31 (P<0,01), membrana basal aún difusa y disolución en la zona TJ. Conclusión: el método de acupuntura "Despertar del cerebro y apertura de orificios" regula la vía Epac1/Rap1 en la zona IP de la corteza cerebral, induce el reordenamiento del citoesqueleto endotelial y alivia el daño de la BBB después de CIRI.

Acupuntura; vía de señalización Epac1/Rap1; barrera hematoencefálica; lesión cerebral por isquemia/reperfusión; reordenamiento del citoesqueleto endotelial