Mecanismo de mejora de la colitis ulcerosa mediante la moxibustión con grano de cebada basada en la muerte por cobre

Cui Yaohui ,  

Chang Boya ,  

Xu Huichao ,  

Wang Haijun ,  

Ji Laixi ,  

摘要

Objetivo: explorar el mecanismo por el cual la moxibustión con grano de cebada mejora el daño tisular del colon en ratones con colitis ulcerosa (CU) mediante la regulación de la vía de señalización de muerte por cobre. Métodos: ratones macho C57BL/6 se dividieron aleatoriamente en grupo control, grupo modelo y grupo de moxibustión, con 10 ratones por grupo. Los ratones bebieron una solución al 3 % de sulfato de dextrano para replicar el modelo de CU. En el grupo de moxibustión se aplicó tratamiento en los puntos “Zhongwan” y bilateralmente “Tianshu” y “Shangjuxu”, con 3 estimulaciones por punto, una vez al día durante 7 días consecutivos. Se evaluó el índice de actividad de la enfermedad (DAI) en cada grupo; se detectó sangre oculta en heces; se midió la longitud del colon; se detectaron los niveles séricos de factor de necrosis tumoral α (TNF-α), interleucina (IL)-1β e IL-10 mediante ELISA; se observó la morfología patológica del tejido colónico con tinción HE; se examinó la ultraestructura colónica mediante microscopía electrónica de transmisión; se evaluó el potencial de membrana mitocondrial de las células epiteliales colónicas con tinción JC-1; se midió el nivel de especies reactivas de oxígeno (ROS) mediante citometría de flujo; se cuantificó el contenido de iones de cobre en tejido colónico mediante método colorimétrico; se detectaron las expresiones de ARNm y proteínas de FDX1, DLAT, DLST, LIAS y HSP70 mediante PCR cuantitativa y Western blot; se evaluó la expresión positiva de DLAT en el colon mediante inmunofluorescencia. Resultados: en comparación con el grupo control, el grupo modelo mostró aumento en el score DAI, niveles séricos de TNF-α e IL-1β (P<0.01), prueba positiva de sangre oculta en heces, disminución de la longitud del colon y de IL-10 (P<0.01); lesiones en la mucosa colónica con infiltración inflamatoria; daño ultraestructural con anomalías mitocondriales; aumento en la proporción de potencial mitocondrial bajo, niveles de ROS y contenido de iones de cobre (P<0.01); reducción en la expresión de ARNm y proteínas de FDX1, DLAT, DLST, LIAS (P<0.01), aumento en la expresión de HSP70 (P<0.01); disminución en la expresión positiva de proteína DLAT (P<0.01). En comparación con el grupo modelo, el grupo de moxibustión mostró reducción en el score DAI, niveles séricos de TNF-α e IL-1β (P<0.01); prueba de sangre oculta débilmente positiva; aumento en la longitud del colon e IL-10 (P<0.01); lesión mucosa colónica atenuada con menor infiltración inflamatoria; mejora ultraestructural con reducción en la hinchazón y vacuolización mitocondrial; reducción en el potencial mitocondrial bajo, niveles de ROS y contenido de iones de cobre (P<0.01); aumento en la expresión de ARNm y proteínas de FDX1, DLAT, DLST, LIAS (P<0.01, P<0.05), disminución en la expresión de HSP70 (P<0.01); aumento en la expresión positiva de proteína DLAT (P<0.01). Conclusión: la moxibustión con grano de cebada puede aliviar los síntomas clínicos y el daño tisular en ratones con CU, posiblemente mediante la regulación de la expresión génica relacionada con la muerte por cobre y la mejora de la función mitocondrial.

关键词

Colitis ulcerosa; moxibustión con grano de cebada; muerte por cobre; respuesta inflamatoria

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