Mecanismo por el cual la electroacupuntura combinada con antibióticos activa el núcleo dorsal del nervio vago para estimular el eje nervio vago-glándula suprarrenal, aliviar la inflamación y reducir la mortalidad en ratones con sepsis

Liu Jiabao ,  

Ren Hongxia ,  

Lin Qishun ,  

Zhao Shuai ,  

Li Tong ,  

Jian Hongwei ,  

Sun Hong ,  

Yu Lingling ,  

Jing Xianghong ,  

Li Man ,  

Zhang Hongxing ,  

摘要

El objetivo es investigar el mecanismo mediante el cual la electroacupuntura combinada con antibióticos regula el eje nervio vago-glándula suprarrenal a través del núcleo dorsal del nervio vago (DMV), promoviendo la secreción de catecolaminas, aliviando la tormenta inflamatoria y mejorando la tasa de supervivencia en ratones con sepsis. Métodos: Experimento 1: 50 ratones C57BL/6 divididos en 5 grupos (cirugía simulada, modelo, antibióticos, electroacupuntura, antibióticos + electroacupuntura), con 10 animales por grupo. Se estableció el modelo de sepsis mediante ligadura y perforación del ciego (CLP). El grupo de electroacupuntura recibió electroestimulación bilateral en "Zusanli" (10 Hz, 0.5 mA) durante 15 min, una vez al día durante 3 días; el grupo de antibióticos recibió inyecciones intraperitoneales de imipenem cilastatina sódica (30 mg/kg), cada 12 horas durante 3 días; el grupo antibióticos + electroacupuntura recibió las mismas intervenciones. Se observaron la tasa de supervivencia a los 3 días y el cambio en el peso corporal; se midieron los niveles séricos de IL-6 y TNF-α mediante ELISA; se realizaron tinciones HE para observar la histopatología del ciego y la infiltración celular inflamatoria; se detectó la expresión de la proteína c-Fos en la región DMV mediante transparencia cerebral. Experimento 2: 50 ratones Chat-Cre divididos aleatoriamente en 5 grupos (cirugía simulada + virus vacío, modelo + virus vacío, electroacupuntura + fármaco + virus vacío, electroacupuntura + fármaco + virus inhibitor, antibióticos + virus activador), con 10 animales por grupo. Se inyectaron virus correspondientes en el DMV 3 semanas antes del CLP, tras 3 semanas se realizó el CLP, seguido de inyecciones diarias de clozapina N-óxido (CNO, 3 mg/kg), además de antibióticos o electroacupuntura (mismos procedimientos y parámetros que en el experimento 1). Se midieron niveles séricos de IL-6 y TNF-α por ELISA; se observó la respuesta inflamatoria del ciego mediante tinción HE; se midieron niveles séricos de dopamina (DA), adrenalina (E), noradrenalina (NE) y sus metabolitos 3-metoxi-tiramina (3-MT), 3-metoxi-noradrenalina (NMN), 3-metoxi-adrenalina (MN) mediante cromatografía líquida ultrarrápida acoplada a espectrometría de masas en tándem; se detectó el número de células FOXP3+/CD4+ en el tejido cecal mediante inmunofluorescencia. Resultados del Experimento 1: en comparación con el grupo de cirugía simulada, el grupo modelo mostró una disminución significativa en la tasa de supervivencia a 3 días y en el peso corporal (P<0,0001), aumento de los niveles séricos de IL-6 y TNF-α (P<0,0001), aumento de la infiltración celular inflamatoria en el ciego (P<0,0001). En comparación con el grupo modelo, el grupo antibióticos + electroacupuntura mostró un aumento en la tasa de supervivencia (P<0,05), una desaceleración en la pérdida de peso (P<0,0001), reducción en los niveles séricos de IL-6 y TNF-α (P<0,0001), disminución de la infiltración celular inflamatoria (P<0,0001), aumento en la densidad de células c-Fos positivas en la región DMV (P<0,0001), con indicadores superiores a los grupos tratados individualmente. Resultados del Experimento 2: en comparación con cirugía simulada + virus vacío, el grupo modelo + virus vacío mostró aumentos en factores inflamatorios séricos y en la cantidad de células inflamatorias en el ciego (P<0,0001), disminución en niveles de catecolaminas y metabolitos, y número de células FOXP3+/CD4+ (P<0,0001); en comparación con modelo + virus vacío, los grupos electroacupuntura + fármaco + virus vacío, electroacupuntura + fármaco + virus inhibidor y antibióticos + virus activador mostraron disminuciones en factores inflamatorios séricos y células inflamatorias (P<0,0001, P<0,01, P<0,05), incrementos en niveles de catecolaminas y metabolitos, y número de células FOXP3+/CD4+ (P<0,01, P<0,05, P<0,001, P<0,0001); en comparación con electroacupuntura + fármaco + virus vacío, el grupo electroacupuntura + fármaco + virus inhibidor revirtió estos indicadores (P<0,01, P<0,001, P<0,05, excepto 3-MT). Conclusión: La electroacupuntura en "Zusanli" combinada con antibióticos mostró la mejor eficacia terapéutica en ratones CLP, probablemente a través de la activación de neuronas colinérgicas en DMV, regulación del eje nervio vago-glándula suprarrenal favoreciendo la secreción de catecolaminas y supresión de la respuesta inflamatoria, aumentando así la tasa de supervivencia.

关键词

sepsis; electroacupuntura; Zusanli; eje nervio vago-glándula suprarrenal; reacción inflamatoria; regulación inmunológica

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