Las neuronas positivas para TH en la región ventrolateral anterior del bulbo raquídeo median la mejora de la motilidad intestinal inducida por electroacupuntura en ratones con estreñimiento funcional

Wang Dan ,  

He Zhaoxuan ,  

Yu Mingkai ,  

Wu Ruohan ,  

Deng Xiao ,  

Luo Yucai ,  

Li Yifan ,  

Lai Peng ,  

Yao Xiaoheng ,  

Yin Tao ,  

Zeng Fang ,  

摘要

El objetivo es investigar el papel de las neuronas positivas para tirosina hidroxilasa (TH) en la región ventrolateral anterior del bulbo raquídeo (RVLM) en la mejora del trastorno de la motilidad intestinal en ratones con estreñimiento funcional (FC) mediante electroacupuntura. Métodos: Primero, se utilizó un virus de rastreo transináptico para identificar las áreas cerebrales que proyectan al colon proximal. Luego, 18 ratones C57BL/6J fueron asignados aleatoriamente en tres grupos: grupo normal, grupo modelo y grupo de electroacupuntura, con 6 ratones en cada uno. Se indujo el modelo de FC mediante la administración oral de hidloruro de loperamida. El grupo de electroacupuntura recibió tratamiento en los puntos “Tianshu” y “Shangjuxu”, durante 5 días por ciclo, con un total de 2 ciclos. Se observaron las condiciones de defecación de los ratones y se midió el contenido de agua en las heces; se registró el tiempo de expulsión de la primera materia fecal negra; se midió la tasa de propulsión del intestino delgado; se cuantificó el contenido de TH en suero y colon mediante ELISA; se detectó la coexpresión de TH/c-Fos en el RVLM mediante inmunofluorescencia. Posteriormente, 12 ratones C57BL/6J fueron asignados aleatoriamente a los grupos virus de carga vacía + cloazapina-N-óxido (CNO) y virus inhibidor + CNO. Además, 18 ratones C57BL/6J se dividieron aleatoriamente en los grupos virus de carga vacía + CNO, electroacupuntura y virus activador + CNO + electroacupuntura, con 6 ratones por grupo. Se inyectaron los virus correspondientes en el área RVLM y, 21 días después de la expresión viral, se administró CNO por vía intraperitoneal (1 mg/kg). Los grupos de electroacupuntura y virus activador + CNO + electroacupuntura recibieron intervención de electroacupuntura 30 minutos después de la inyección de CNO, con el mismo método mencionado anteriormente. Se realizaron observaciones de defecación y evaluación de la motilidad intestinal con los mismos métodos. Finalmente, se utilizaron otros 18 ratones C57BL/6J, se inyectó el virus rAAV-hSyn-GCaMP6s en el área RVLM, y 21 días después de la transducción viral se dividieron aleatoriamente en grupo blanco, grupo control modelo y grupo modelo + electroacupuntura, con 6 ratones en cada uno. Se registraron los cambios en las señales de calcio neuronales en el área RVLM utilizando un sistema de grabación de fibra óptica multicanal. Resultados: El experimento de rastreo retrogrado con virus transináptico demostró conexiones sinápticas entre neuronas en el RVLM y el colon proximal. En comparación con el grupo normal, el grupo modelo mostró un retraso en el tiempo de expulsión de la primera materia fecal negra, reducción en el número total de heces, contenido de agua en heces y tasa de propulsión del intestino delgado (P<0,001, P<0,01). Además, el contenido de TH en suero y colon aumentó (P<0,01), así como el número de neuronas positivas para TH y c-Fos en el RVLM y las neuronas con coexpresión de TH/c-Fos (P<0,001). En comparación con el grupo modelo, el grupo de electroacupuntura tuvo un tiempo más corto de expulsión de la primera materia fecal negra, mayor número total de heces, contenido de agua en las heces y tasa de propulsión del intestino delgado (P<0,001, P<0,01). El contenido de TH en suero y colon fue menor (P<0,01), y el número de neuronas positivas para TH, c-Fos y coexpresoras en el RVLM disminuyó (P<0,001). Comparado con el grupo virus de carga vacía + CNO, el grupo de virus inhibidor + CNO mostró un tiempo más corto para la expulsión de la primera materia fecal negra, mayor número total de heces, contenido de agua y tasa de propulsión del intestino delgado (P<0,001, P<0,01). También comparado con el grupo virus de carga vacía + CNO, el grupo de electroacupuntura mostró los mismos resultados de mejoría (P<0,001, P<0,01). En comparación con el grupo de electroacupuntura, el grupo virus activador + CNO + electroacupuntura mostró un tiempo más largo para la expulsión de la primera materia fecal negra, menor número total de heces, contenido de agua y tasa de propulsión (P<0,001, P<0,01). Comparado con el grupo blanco, la actividad de la señal de Ca2+ en RVLM aumentó significativamente en el grupo control modelo (P<0,001). Comparado con el grupo control modelo, la actividad de la señal de Ca2+ en el grupo modelo + electroacupuntura disminuyó significativamente (P<0,001). Conclusión: Los puntos de acupuntura “Tianshu” y “Shangjuxu” pueden mejorar el trastorno de la motilidad intestinal en ratones con estreñimiento funcional mediante la inhibición de la actividad de las neuronas positivas para TH en el área RVLM.

关键词

Electroacupuntura; región ventrolateral anterior del bulbo raquídeo; neuronas de tirosina hidroxilasa; trastorno de la motilidad intestinal

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