El objetivo es comparar las diferencias en los efectos de la intervención conductual e histológica de tres métodos de estimulación por electroacupuntura: un solo punto "Zusanli", un solo punto "Sanyinjiao", y la combinación de puntos ("Zusanli" + "Sanyinjiao") en un modelo de ratón con síndrome del intestino irritable (SII), así como las diferencias en la respuesta neuronal en el sistema nervioso periférico y central bajo diferentes métodos de estimulación, para proporcionar una base experimental para investigar el mecanismo neuronal de la intervención combinada de puntos en el SII. Métodos: se estableció un modelo animal de SII mediante perfusión rectal de poliglucano de levadura en ratones machos C57BL/6J, divididos al azar en grupo control, grupo modelo, grupo Zusanli, grupo Sanyinjiao y grupo combinado (20 ratones por grupo excepto el grupo modelo con 18 ratones). Tras 7 días consecutivos de estimulación por electroacupuntura (2 Hz/100 Hz, 1 mA, 15 min por sesión, una vez al día), se evaluó la hipersensibilidad mecánica abdominal (dolor referido) con las fibras de von Frey, la capacidad motora mediante el test de la barra rotatoria, y las características del comportamiento fino espontáneo en 3D con un análisis no supervisado basado en inteligencia artificial. Se observó la estructura tisular del colon y el nivel inflamatorio mediante tinción HE, y la expresión de factores inflamatorios en el tejido colónico se midió con Western blot, para evaluar la diferencia en la mejora de los síntomas del SII entre la estimulación de un punto y la estimulación combinada. Se utilizó un virus marcador para rastrear las neuronas de los ganglios de la raíz dorsal (DRG) que inervan los puntos "Zusanli" y "Sanyinjiao" en ratones C57BL/6J, y se registraron las respuestas de las neuronas DRG en ratones Thy1-GCaMP6s a la electroacupuntura (1 mA, 1 min) mediante imagen de calcio bicofotónica in vivo. Se empleó una técnica de marcaje neuronal dependiente de actividad para analizar las neuronas centrales activadas en ratones transgénicos (TRAP2; Ai14) tras electroacupuntura (2 Hz/100 Hz, 1 mA, 15 min). Resultados: en comparación con el grupo control, el grupo modelo mostró aumento en el número de retiros mecánicos abdominales y área bajo la curva (P<0.001, P<0.05), disminución de la capacidad motora (latencia de caída y velocidad en barra rotatoria al momento de caer) (P<0.01), agravamiento de daño tisular colónico y respuesta inflamatoria (P<0.001), aumento de expresión de IL-1β y TNF-α (P<0.001), y cambios en el comportamiento espontáneo (P<0.001, P<0.01, P<0.05); los tres métodos de estimulación por electroacupuntura mitigaron significativamente la hipersensibilidad mecánica abdominal en ratones modelo de SII (P<0.001, P<0.05, P<0.01), y la zona efectiva de intervención con estimulación combinada fue mayor que con estimulación de un solo punto. La estimulación combinada fue más efectiva para restaurar el daño tisular colónico causado por SII, reducir los niveles de expresión de TNF-α (P<0.05), acortar la duración de los arcos dorsales espontáneos y mejorar la transición entre diferentes comportamientos espontáneos (P<0.01, P<0.05). Las respuestas neuronales en DRG exhibieron alta heterogeneidad entre los tres métodos de estimulación, clasificándose en 3 categorías principales y 7 subcategorías basadas en características de actividad registradas. Además, la estimulación combinada activó un mayor número de neuronas DRG con mayor intensidad de señal de calcio en comparación con la estimulación de un solo punto (P<0.05). Por último, se observaron diferencias significativas en el número de neuronas activadas en diferentes regiones cerebrales bajo los tres métodos de estimulación, con la superposición máxima en el núcleo paraventricular del hipotálamo (PVN) entre neuronas activadas por la estimulación de puntos únicos "Zusanli" y "Sanyinjiao" y la estimulación combinada, y la superposición mínima en la corteza insular (IC), sugiriendo que la activación de neuronas IC requiere el efecto sinérgico de la estimulación combinada. Conclusión: la estimulación combinada "Zusanli" + "Sanyinjiao" mejora mejor la hipersensibilidad mecánica abdominal, daño estructural colónico, estado inflamatorio y cambios en el comportamiento espontáneo inducidos por dolor visceral en ratones modelo de SII en comparación con la estimulación de un solo punto, y esta ventaja probablemente se debe a la integración sinérgica de señales de electroacupuntura por neuronas periféricas y centrales.

combinación de puntos de acupuntura; electroacupuntura; síndrome del intestino irritable; Zusanli; Sanyinjiao