目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p、核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的影响，探讨艾灸治疗IBS-D的抗炎机制。方法:SD幼鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、吡咯烷二硫代甲酸铵盐(PDTC)组，每组12只。采用新生仔鼠母子分离联合醋酸灌肠刺激联合慢性束缚法复制IBS-D大鼠模型。艾灸组艾灸“天枢”“上巨虚”

每次20 min

每天1次，治疗7 d。PDTC组腹腔注射PDTC(50 mg·kg

(-1)

·d(-1)·d

(-1)

)

共治疗7 d。观察各组幼鼠体质量、稀便率和腹部回缩反射(AWR)最小容量阈值；HE染色法观察各组幼鼠结肠黏膜层病理形态；ELISA法检测各组幼鼠血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量；荧光定量PCR法检测各组幼鼠结肠组织中miR-345-3p、miR-216a-5p、NF-κB p65 mRNA表达水平；免疫荧光法检测各组幼鼠结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65表达水平。结果:与正常组比较，模型组稀便率升高(P

<

0.01)

体质量、AWR最小容量阈值降低(P

<

0.01)

结肠组织黏膜存在轻度炎性反应，血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量升高(P

<

0.01)

IL-4含量降低(P

<

0.01)

结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p相对表达量降低(P

<

0.01)

NF-κB p65 mRNA相对表达量升高(P

<

0.01)

结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值升高(P

<

0.01)。与模型组比较，艾灸组和PDTC组稀便率降低(P

<

0.01)

体质量、AWR最小容量阈值升高(P

<

0.01)

结肠组织黏膜炎性反应减轻，血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量降低(P

<

0.01)

IL-4含量升高(P

<

0.01)

结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p相对表达量升高(P

<

0.05)

NF-κB p65 mRNA相对表达量降低(P

<

0.01)

结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值降低(P

<

0.01)。与艾灸组比较，PDTC组血清IL-6含量降低(P

<

0.01)。结论:艾灸可以减轻IBS-D大鼠肠道炎性反应水平，降低内脏高敏感性，其机制可能与提高结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p表达水平，抑制NF-κB p65表达水平，从而降低炎性因子水平有关。Objective To observe the effect of moxibustion on the expression of miR-345-3p

miR-216a-5p and nuclear factor-κB p65(NF-κB p65) in colonic tissue of rats with diarrhea-predominant irritable bowel syndrome(IBS-D)

so as to explore its anti-inflammatory mechanism in relieving IBS-D. Methods SD rats were randomly divided into normal control(n=12)

model(n=12)

moxibustion(n=12) and ammonium pyrrolidine dithiocarbamate(PDTC

n=12) groups. The IBS-D model was established by neonatal mother-child separation combined with acetic acid enema stimulation and chronic binding methods. The rats in the moxibustion group received moxibustion stimulation of “Tianshu”(ST25) and “Shangjuxu”(ST37) for 20 min

once a day

for 7 days

and those of the PDTC group received intraperitoneal injection of PDTC(50 mg·kg(-1))

共治疗7 d。观察各组幼鼠体质量、稀便率和腹部回缩反射(AWR)最小容量阈值；HE染色法观察各组幼鼠结肠黏膜层病理形态；ELISA法检测各组幼鼠血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量；荧光定量PCR法检测各组幼鼠结肠组织中miR-345-3p、miR-216a-5p、NF-κB p65 mRNA表达水平；免疫荧光法检测各组幼鼠结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65表达水平。结果:与正常组比较，模型组稀便率升高(P

<

0.01)

体质量、AWR最小容量阈值降低(P

<

0.01)

结肠组织黏膜存在轻度炎性反应，血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量升高(P

<

0.01)

IL-4含量降低(P

<

0.01)

结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p相对表达量降低(P

<

0.01)

NF-κB p65 mRNA相对表达量升高(P

<

0.01)

结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值升高(P

<

0.01)。与模型组比较，艾灸组和PDTC组稀便率降低(P

<

0.01)

体质量、AWR最小容量阈值升高(P

<

0.01)

结肠组织黏膜炎性反应减轻，血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量降低(P

<

0.01)

IL-4含量升高(P

<

0.01)

结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p相对表达量升高(P

<

0.05)

NF-κB p65 mRNA相对表达量降低(P

<

0.01)

结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值降低(P

<

0.01)。与艾灸组比较，PDTC组血清IL-6含量降低(P

<

0.01)。结论:艾灸可以减轻IBS-D大鼠肠道炎性反应水平，降低内脏高敏感性，其机制可能与提高结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p表达水平，抑制NF-κB p65表达水平，从而降低炎性因子水平有关。