电针对多囊卵巢综合征大鼠卵巢细胞分泌功能及kisspeptin/kiss1r系统的影响

赵雪丹; 李之豪; 胡俊威; 陈跃来; 徐鸽

doi:10.13702/j.1000-0607.20220481

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

电针对多囊卵巢综合征大鼠卵巢细胞分泌功能及kisspeptin/kiss1r系统的影响

机制探讨 | 更新时间：2023-11-03

- 电针对多囊卵巢综合征大鼠卵巢细胞分泌功能及kisspeptin/kiss1r系统的影响
- Effects of electroacupuncture on the secretion function of ovarian cells and kisspeptin/kiss1r system in rats with polycystic ovarian syndrome
- 针刺研究 2023年48卷第8期页码：804-811
- 作者机构：
  
  1.上海中医药大学附属龙华医院，上海200032
  2.上海中医药大学教学实验中心，上海 201210
- 作者简介：
  
  赵雪丹，博士研究生，研究方向：针灸治疗多囊卵巢综合征。E-mail：ZXD_1822@163.com
  徐鸽，博士，讲师，研究方向：针灸治疗泌尿生殖疾病。E-mail：xg_lb@163.com
- 基金信息：
  
  上海市领军人才计划项目(2020013)
- DOI：10.13702/j.1000-0607.20220481
  中图分类号： R245.9⁺7
- 收稿日期：2022-04-25，
  
  修回日期：2022-11-11，
  
  纸质出版日期：2023-08-25
- 稿件说明：
移动端阅览
赵雪丹,李之豪,胡俊威等.电针对多囊卵巢综合征大鼠卵巢细胞分泌功能及kisspeptin/kiss1r系统的影响[J].针刺研究,2023,48(08):804-811.

ZHAO Xue-dan,LI Zhi-hao,HU Jun-wei,et al.Effects of electroacupuncture on the secretion function of ovarian cells and kisspeptin/kiss1r system in rats with polycystic ovarian syndrome[J].Acupuncture Research,2023,48(08):804-811.
赵雪丹,李之豪,胡俊威等.电针对多囊卵巢综合征大鼠卵巢细胞分泌功能及kisspeptin/kiss1r系统的影响[J].针刺研究,2023,48(08):804-811. DOI： 10.13702/j.1000-0607.20220481.

ZHAO Xue-dan,LI Zhi-hao,HU Jun-wei,et al.Effects of electroacupuncture on the secretion function of ovarian cells and kisspeptin/kiss1r system in rats with polycystic ovarian syndrome[J].Acupuncture Research,2023,48(08):804-811. DOI： 10.13702/j.1000-0607.20220481.

摘要

目的

观察电针对多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠卵巢颗粒细胞与膜细胞分泌激素功能及kisspeptin与kiss1r表达的影响，探讨电针改善PCOS大鼠卵巢功能障碍的机制。

方法

雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、电针组和氟他胺组，每组12只。采用0.1 mg/mL来曲唑（10 mL·kg

-1

·d

-1

）灌胃复制PCOS大鼠模型。电针组电针大鼠“关元”，每次20 min，氟他胺组给予氟他胺溶液（50 mg·kg

-1

·d

-1

）灌胃，两组均每日治疗1次，共治疗14 d。造模后和治疗后称量大鼠体质量及卵巢质量并计算卵巢指数；HE染色法观察大鼠卵巢组织形态改变；ELISA法检测血清睾酮（T）、促黄体生成素（LH）、雌二醇（E

）含量，卵巢颗粒细胞及膜细胞培养液中E

、T含量及卵巢组织kisspeptin的含量；免疫组织化学法检测大鼠卵巢中kisspeptin阳性表达；Western blot法检测卵巢组织kiss1r蛋白表达量。

结果

与对照组比较，模型组大鼠体质量、卵巢质量及卵巢指数，血清中T、LH及膜细胞培养液中T含量，卵巢中kisspeptin含量及阳性表达均升高（

0.01，

0.05），颗粒细胞培养液中E

含量降低（

0.01）。与模型组比较，电针组与氟他胺组大鼠体质量、卵巢质量及卵巢指数、血清中T与LH、膜细胞培养液中T、卵巢中kisspeptin含量与阳性表达均降低（

0.01，

0.05），颗粒细胞培养液中E

含量升高（

0.05，

0.01）。

结论

电针可调节PCOS大鼠血清性激素水平、卵巢颗粒细胞和膜细胞的分泌功能及卵巢kisspeptin蛋白表达，表现出与雄激素受体阻断干预类似的效应，提示电针对PCOS大鼠卵巢功能障碍的改善作用可能与kisspeptin/kiss1r系统有关。

Abstract

Objective

To observe the effects of electroacupuncture （EA） on hormone secretion function of ovarian granulosa cells and theca cells， as well as the expression changes of kisspeptin and kiss1r in rats with polycystic ovarian syndrome （PCOS）， so as to explore the mechanism of EA for relieving ovarian dysfunction in PCOS rats.

Methods

Forty-eight SD female rats were randomly divided into control group， model group， EA group and flutamide group， with 12 rats in each group. PCOS rat model was replicated with the gavage of letrozole （0.1 mg/mL， 10 mL·kg

-1

·d

-1

）. In the EA group， EA （2 Hz， 2 mA） was used to stimulate “Guanyuan” （CV4） for 20 min each time. In the flutamide group， flutamide solution （50 mg·kg

-1

·d

-1

） was administrated by gavage. The treatments were given once daily for 14 days in each group. After the modeling and treatment， the body and ovarian weights of the rats were measured， and the ovarian index was calculated. Using HE staining， the morphological changes of ovary were observed. ELISA was adopted to detect the contents of testosterone （T）， luteinizing hormone （LH） and estradiol （E

） in serum， the contents of E

and T in the culture medium of ovarian granulosa cells and theca cells， as well as the content of kisspeptin in the ovarian tissue. The positive expression of kisspeptin in ovary was observed by immunohistochemical method， and the protein expression of its receptor kiss1r was detected by Western blot.

Results

Compared with the control group， the body and ovarian weights， ovarian index， the contents of T and LH in serum and that of T in the culture medium of theca cells， as well as the content and positive expression of kisspeptin in ovary were all increased （

0.01，

0.05）； and the content of E

in the culture medium of granulosa cells was decreased （

0.01） in the model group. When compared with the model group， in the EA and flutamide groups， the body and ovarian weights， ovarian index， the contents of T and LH in serum and that of T in the culture medium of theca cells， as well as the content and expression of kisspeptin in ovary were all decreased （

0.01，

0.05）； and the content of E

in the culture medium of granulosa cells was increased （

0.05，

0.01）.

Conclusion

EA regulates the serum sex hormone levels， the secretion function of the ovarian granulosa cells and theca cells， and the ovarian kisspeptin/kiss1r protein expression in PCOS rats， showing the similar effect as receptor blockade intervention. It is suggested that the improvement of EA in ovarian dysfunction of PCOS rats may be related to the kisspeptin/kiss1r system.

关键词

Keywords

references

李继俊 . 妇产科内分泌治疗学［M］. 3版 . 北京：人民军医出版社， 2014 ： 22 .

LI J J . Endocrine therapeutics in obstetrics and gynecology （in Chinese）［M］. 3 rd edition . Beijing ： People’s Military Medical Press ， 2014 ： 22 .

STEPHENS S B Z ， DI GIORGIO N P ， LIAW R B ， et al . Estradiol-dependent and-independent stimulation of Kiss1 expression in the amygdala， BNST， and lateral septum of mice ［J］. Endocrinology ， 2018 ， 159 （ 9 ）： 3389 - 3402 .

沈凌宇，常雄飞，潘良，等 . 电针对多囊卵巢综合征大鼠下丘脑Kisspeptin蛋白表达的影响［J］. 针刺研究， 2021 ， 46 （ 2 ）： 106 - 110 .

SHEN L Y ， CHANG X F ， PAN L ， et al . Effect of electroacupuncture on expression of Kisspeptin protein in hypothalamus of rats with polycystic ovary syndrome （in Chinese）［J］. Acupuncture Research ， 2021 ， 46 （ 2 ）： 106 - 110 .

徐鸽，张安冬，王茜，等 . 电针不同穴位对多囊卵巢综合征大鼠卵泡发育及相关因素的影响［J］. 针刺研究， 2019 ， 44 （ 10 ）： 740 - 746， 751 .

XU G ， ZHANG A D ， WANG X ， et al . Effect of electroacupuncture at different acupoints on follicle development and related factors in serum and ovary tissues of PCOS rats （in Chinese）［J］. Acupuncture Research ， 2019 ， 44 （ 10 ）： 740 - 746， 751 .

徐鸽，王茜，张安冬，等 . 电针不同穴位对多囊卵巢综合征大鼠高雄激素血症及卵巢雄激素受体表达的影响［J］. 针刺研究， 2018 ， 43 （ 9 ）： 543 - 549 .

XU G ， WANG X ， ZHANG A D ， et al . Effect of electroacupuncture at different acupoints on steroid hormones and ova-rian androgen receptor expression in polycystic ovary syndrome rats （in Chinese）［J］. Acupuncture Research ， 2018 ， 43 （ 9 ）： 543 - 549 .

RYAN G E ， MALIK S ， MELLON P L . Antiandrogen treatment ameliorates reproductive and metabolic phenotypes in the letrozole-induced mouse model of PCOS ［J］. Endocrinology ， 2018 ， 159 （ 4 ）： 1734 - 1747 .

KAFALI H ， IRIADAM M ， OZARDALI I ， et al . Letrozole-induced polycystic ovaries in the rat： a new model for cystic ovarian disease ［J］. Arch Med Res ， 2004 ， 35 （ 2 ）： 103 - 108 .

余曙光，徐斌 . 实验针灸学［M］. 2版 . 北京：人民卫生出版社， 2016 .

YU S G ， XU B . Experimental acupuncturology （in Chinese）［M］. 2 nd edition . Beijing ： People’s Medical Publishing House ， 2016 .

潘伟，李豫峰 . 氟他胺和二甲双胍在难治性多囊卵巢综合征中的临床应用［J］. 中国妇幼保健， 2009 ， 24 （ 5 ）： 707 - 710 .

PAN W ， LI Y F . Clinical effect of flutamide and metformin on patients with complicated polycystic ovary syndrome （in Chinese）［J］. Maternal and Child Health Care of China ， 2009 ， 24 （ 5 ）： 707 - 710 .

EAGLESON C A ， GINGRICH M B ， PASTOR C L ， et al . Polycystic ovarian syndrome： evidence that flutamide restores sensitivity of the gonadotropin-releasing hormone pulse generator to inhibition by estradiol and progesterone ［J］. J Clin Endocrinol Metab ， 2000 ， 85 （ 11 ）： 4047 - 4052 .

许川，舒为群，张亮，等 . 大鼠卵巢颗粒细胞的原代培养与鉴定［J］. 癌变畸变突变， 2009 ， 21 （ 3 ）： 234 - 237 .

XU C ， SHU W Q ， ZHANG L ， et al . Culture and identification of granulosa cells from rat ovary （in Chinese）［J］. Carcinogenesis ， Teratogenesis & Mutagenesis， 2009 ， 21 （ 3 ）： 234 - 237 .

CHEN M H ， LI T ， DING C H ， et al . Growth differential factor-9 inhibits testosterone production in mouse theca interstitial cells ［J］. Fertil Steril ， 2013 ， 100 （ 5 ）： 1444 - 1450 .

TERAO Y ， KUMANO S ， TAKATSU Y ， et al . Expression of Kiss-1， a metastasis suppressor gene， in trophoblast giant cells of the rat placenta ［J］. Biochim Biophys Acta ， 2004 ， 1678 （ 2/3 ）： 102 - 110 .

HU K L ， ZHAO H C ， CHANG H M ， et al . Kisspeptin/kisspeptin receptor system in the ovary ［J］. Front Endocrinol ， 2017 ， 8 ： 365 .

GARCÍA-ORTEGA J ， PINTO F M ， FERNÁNDEZ-SÁNCHEZ M ， et al . Expression of neurokinin B/NK3 receptor and kisspeptin/KISS1 receptor in human granulosa cells ［J］. Hum Reprod ， 2014 ， 29 （ 12 ）： 2736 - 2746 .

钱晨曦，董杰，王晓红 . Kisspeptin及其受体KISS1R在女性生殖系统中的分布及局部调节作用研究进展［J］. 解放军医学院学报， 2021 ， 42 （ 10 ）： 1114 - 1117， 1129 .

QIAN C X ， DONG J ， WANG X H . Distribution and local regulatory effect of Kisspeptin/KISS1R in female reproductive system （in Chinese）［J］. Academic Journal of Chinese PLA Medical School ， 2021 ， 42 （ 10 ）： 1114 - 1117， 1129 .

DA COSTA C S ， OLIVEIRA T F ， FREITAS-LIMA L C ， et al . Subacute cadmium exposure disrupts the hypothalamic-pituitary-gonadal axis， leading to polycystic ovarian syndrome and premature ovarian failure features in female rats ［J］. Environ Pollut ， 2021 ， 269 ： 116154 .

MERHI Z ， THORNTON K ， BONNEY E ， et al . Ovarian kisspeptin expression is related to age and to monocyte chemoattractant protein-1 ［J］. J Assist Reprod Genet ， 2016 ， 33 （ 4 ）： 535 - 543 .

郭威 . Kisspeptin参与多嚢卵巢综合征患者颗粒细胞孕激素分泌的调节［D］. 郑州：郑州大学， 2015 .

GUO W . Kisspeptin participates in the regulation of progeste-rone secretion in granulosa cells derived from polycystic ova-rian syndrome patients （in Chinese）［D］. Zhengzhou ： Zhengzhou University ， 2015 .

FABOVÁ Z ， SIROTKIN A V . Interrelationships between kisspeptin and FSH in control of porcine ovarian cell functions ［J］. Domest Anim Endocrinol ， 2021 ， 74 ： 106520 .

翟君钰 . Kisspeptin与卵巢功能及排卵的关联性研究［D］. 济南：山东大学， 2014 .

ZHAI J Y . Association study between kisspeptin and ovulation （in Chinese）［D］. Jinan ： Shandong University ， 2014 .

YOUNG J ， GEORGE J T ， TELLO J A ， et al . Kisspeptin restores pulsatile LH secretion in patients with neurokinin B signaling deficiencies： physiological， pathophysiological and therapeutic implications ［J］. Neuroendocrinology ， 2013 ， 97 （ 2 ）： 193 - 202 .

郭威，姚桂东，辛志敏 . Kisspeptin对多囊卵巢综合征来源颗粒细胞雌孕激素分泌调节的研究［J］. 现代妇产科进展， 2019 ， 28 （ 3 ）： 190 - 193 .

GUO W ， YAO G D ， XIN Z M . Kisspeptin participates in the regulation of estrogen and progesterone secretion in granulosa cells derived from polycystic ovarian syndrome （in Chinese）［J］. Progress in Obstetrics and Gynecology ， 2019 ， 28 （ 3 ）： 190 - 193 .

HU K L ， ZHAO H C ， MIN Z Y ， et al . Increased expression of KISS1 and KISS1 receptor in human granulosa lutein cells-potential pathogenesis of polycystic ovary syndrome ［J］. Reprod Sci ， 2019 ， 26 （ 11 ）： 1429 - 1438 .

席瑾，金纯纯，沈真如，等 . 古代文献中针灸治疗不孕症选穴规律研究［J］. 南京中医药大学学报， 2019 ， 35 （ 6 ）： 719 - 723 .

XI J ， JIN C C ， SHEN Z R ， et al . Study on acupoint selection rules of treating infertility in ancient literature （in Chinese）［J］. Journal of Nanjing University of Traditional Chinese Medicine ， 2019 ， 35 （ 6 ）： 719 - 723 .

LIN Q P ， LIU Y ， XU J B ， et al . Effect of electroacupuncture combined with ginger-isolated moxibustion on endometrial receptivity in infertile patients with polycystic ovarian syndrome ［J］. World J Acupunct Moxibust ， 2022 ， 32 （ 1 ）： 15 - 20 .

浏览量

下载量

CNKI被引量

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

电针对多囊卵巢综合征大鼠下丘脑Kisspeptin蛋白表达的影响

电针不同穴位对多囊卵巢综合征大鼠卵泡发育及相关因素的影响

电针不同穴位对多囊卵巢综合征大鼠高雄激素血症及卵巢雄激素受体表达的影响