麦粒灸通过调控凋亡因子半胱氨酸家族增强环磷酰胺对Hepa1-6肝癌荷瘤小鼠的抗肿瘤作用

程艳婷; 朱涛; 马艳竹; 丁彦泽; 孟立强; 薛聆; 冀来喜

doi:10.13702/j.1000-0607.20220820

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

麦粒灸通过调控凋亡因子半胱氨酸家族增强环磷酰胺对Hepa1-6肝癌荷瘤小鼠的抗肿瘤作用

机制探讨 | 更新时间：2023-09-18

- 麦粒灸通过调控凋亡因子半胱氨酸家族增强环磷酰胺对Hepa1-6肝癌荷瘤小鼠的抗肿瘤作用
- Moxibustion with seed-size moxa cone enhances anti-tumor effect of cyclophosphamide on Hepa1-6 hepatoma-bearing mice by regulating apoptosis factor cysteine family
- 针刺研究 2023年48卷第9期页码：914-922
- 作者机构：
  
  山西中医药大学第二临床学院，山西晋中030619
- 作者简介：
  
  程艳婷，博士，副教授，研究方向：艾灸效应机制研究。E-mail：280056257@qq.com
  冀来喜，教授，博士生导师，研究方向：新九针技术的开发应用研究。E-mail：tyjilaixi@126.com
- 基金信息：
  
  山西省自然科学基金项目(201901D111336);山西省中医药管理局项目(2023ZYYA015)
- DOI：10.13702/j.1000-0607.20220820
  中图分类号： R273
- 收稿日期：2022-07-20，
  
  修回日期：2022-08-11，
  
  纸质出版日期：2023-09-25
- 稿件说明：
移动端阅览
程艳婷,朱涛,马艳竹等.麦粒灸通过调控凋亡因子半胱氨酸家族增强环磷酰胺对Hepa1-6肝癌荷瘤小鼠的抗肿瘤作用[J].针刺研究,2023,48(09):914-922.

CHENG Yan-ting,ZHU Tao,MA Yan-zhu,et al.Moxibustion with seed-size moxa cone enhances anti-tumor effect of cyclophosphamide on Hepa1-6 hepatoma-bearing mice by regulating apoptosis factor cysteine family[J].Acupuncture Research,2023,48(09):914-922.
程艳婷,朱涛,马艳竹等.麦粒灸通过调控凋亡因子半胱氨酸家族增强环磷酰胺对Hepa1-6肝癌荷瘤小鼠的抗肿瘤作用[J].针刺研究,2023,48(09):914-922. DOI： 10.13702/j.1000-0607.20220820.

CHENG Yan-ting,ZHU Tao,MA Yan-zhu,et al.Moxibustion with seed-size moxa cone enhances anti-tumor effect of cyclophosphamide on Hepa1-6 hepatoma-bearing mice by regulating apoptosis factor cysteine family[J].Acupuncture Research,2023,48(09):914-922. DOI： 10.13702/j.1000-0607.20220820.

摘要

目的

探讨麦粒灸对Hepa1-6肝癌荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及对细胞凋亡的调控机制。

方法

将C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、麦粒灸组、环磷酰胺（CTX）组、麦粒灸＋CTX组，每组10只。将Hepa1-6肿瘤细胞接种于小鼠右侧腋后皮下建立Hepa1-6肝癌荷瘤小鼠模型。CTX组、麦粒灸＋CTX组小鼠给予腹腔注射CTX 30 mg/kg，1次/d，连续3 d；麦粒灸组、麦粒灸＋CTX组小鼠给予麦粒灸“大椎”及双侧“足三里”“三阴交”，每穴5壮，1次/d，连续10 d。观察荷瘤小鼠的生存状态评分和体质量变化，测量瘤体质量，计算抑瘤率；HE染色法观察肿瘤组织病理形态学变化；ELISA法检测血清白细胞介素（IL）-2、IL-4、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量；Western blot法和实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-3、Caspase-9蛋白及mRNA的表达。

结果

与对照组比较，治疗结束后麦粒灸组小鼠的生存状态评分、体质量、IL-2、TNF-α含量显著升高（

0.05，

0.01），瘤体质量、血清IL-4含量显著下降（

0.05）；CTX组小鼠生存状态评分、体质量及瘤体质量、血清IL-2、IL-4含量显著下降（

0.01，

0.05），TNF-α含量显著升高（

0.01）；3个治疗组肿瘤组织中Caspase-3、Caspase-9蛋白及mRNA表达显著升高（

0.05，

0.01）。与麦粒灸组比较，CTX组生存状态评分显著下降（

0.01），治疗结束后小鼠体质量、瘤体质量、血清IL-2含量显著下降（

0.01，

0.05）；与CTX组比较，治疗结束后麦粒灸+CTX组小鼠生存状态评分、体质量、血清IL-2、TNF-α含量、肿瘤组织中Caspase-3、Caspase-9的蛋白和mRNA表达显著升高（

0.01，

0.05），瘤体质量、血清IL-4含量显著下降（

0.05）。对照组肿瘤细胞核膜核仁清晰，分裂细胞多；麦粒灸组肿瘤细胞细胞核分裂较少，肿瘤坏死区较对照组增多；CTX组肿瘤细胞结构较模糊，坏死区较麦粒灸组增多；麦粒灸＋CTX组肿瘤细胞排列松散，核分裂减少，坏死区较CTX组明显增多。

结论

麦粒灸能够增强CTX的抗肿瘤作用，提高荷瘤小鼠生存质量，其机制可能与激活肿瘤组织中凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达有关。

Abstract

Objective

To observe the anti-tumor effect of moxibustion with seed-sized moxa cones on Hepa1-6 liver cancer bearing （HLCB） mice and its regulatory mechanism on cell apoptosis.

Methods

A total of 40 male C57BL/6 mice were randomly divided into control， moxibustion， cyclophosphamide （CTX） and moxibustion+CTX groups， with 10 mice in each group. The HLCB model was established by subcutaneous inoculation of Hepa1-6 cancer cells into the right armpit. Mice of the CTX and moxibustion+CTX groups were given intraperitoneal injection of CTX （30 mg/kg）， once daily for 3 days. Moxibustion with seed-sized moxa cones were applied to “Dazhui” （GV14）， bilateral“Zusanli” （ST36） and “Sanyinjiao” （SP6）， with 5 moxa cones for each acupoint， once daily for 10 consecutive days. The survival status scores and body weight of HLCB mice were observed， and the tumor weight and tumor inhibition rate were detected. HE staining was used to observe the morphological changes of tumor tissue. ELISA was used to detect the levels of serum interleukin （IL）-2， IL-4 and tumor necrosis factor-α （TNF-α）. Western blot and fluorescent quantitative real-time PCR were used to detect the protein and mRNA expressions of cysteine aspartate protease （Caspase） -3 and Caspase-9 in tumor tissues， separately.

Results

Compared with the control group， the survival status scores， body weight， serum IL-2 and TNF-α levels were significantly increased （

0.05，

0.01）， the tumor weight and serum IL-4 levels were significantly decreased （

0.05） in the moxibustion group；while the survival status， body weight， tumor weight， serum IL-2 and IL-4 levels were significantly decreased （

0.01，

0.05）， the content of TNF-α was significantly increased （

0.01） in the CTX group. The protein and mRNA expressions of Caspase-3 and Caspase-9 in the 3 trentment groups were significantly increased （

0.05，

0.01）. In comparison with the moxibustion group， the survival status scores， body weight and tumor weight， serum content of IL-2 were significantly decreased （

0.01，

0.05）. In contrast to the CTX group， the survival status scores， body weight， serum IL-2 and TNF-α content， and the expressions of Caspase-3 and Caspase-9 in tumor tissue were significantly increased （

0.01，

0.05）， and the tumor weight and serum IL-4 content were significantly decreased （

0.05） in the moxibustion+CTX group. Results of HE staining showed that the tumor cells in the control group had clear nuclear membranes and nucleoli， with more dividing cells； while less nuclear division and an increase in tumor necrosis areas were found in the 3 treatment groups.

Conclusion

Moxibustion with seed-size moxa cone can enhance the anti-tumor effect of CTX and improve the quality of life of HLCB mice， which may be related with its effect in activating the expressions of Caspase-3 and Caspase-9 in tumor tissue.

关键词

Keywords

references

SUN N ， LEE Y T ， ZHANG R Y ， et al . Purification of HCC-specific extracellular vesicles on nanosubstrates for early HCC detection by digital scoring ［J］. Nat Commun ， 2020 ， 11 （ 1 ）： 4489 .

XU M X ， ZHU S ， XU R Y ， et al . Identification of CELSR2 as a novel prognostic biomarker for hepatocellular carcinoma ［J］. BMC Cancer ， 2020 ， 20 （ 1 ）： 313 .

WANG D ， LI X F ， LI X F ， et al . Magnetic and pH dual-responsive nanoparticles for synergistic drug-resistant breast cancer chemo/photodynamic therapy ［J］. Int J Nanomedicine ， 2019 ， 14 ： 7665 - 7679 .

SUN D M ， PENG H B ， WANG S L ， et al . Synthesis of CaCO 3 nanobelts for drug delivery in cancer therapy ［J］. Nanoscale Res Lett ， 2015 ， 10 （ 1 ）： 948 .

王玲玲 . 麦粒灸临床特点及适宜病症［J］. 上海针灸杂志， 2013 ， 32 （ 11 ）： 889 - 891 .

WANG L L . Clinical characteristics of and indications for wheat-grain size cone moxibustion （in Chinese）［J］. Shanghai Journal of Acupuncture and Moxibustion ， 2013 ， 32 （ 11 ）： 889 - 891 .

谢锡亮 . 谢锡亮灸法：治疗·养生·保健［M］. 北京：人民军医出版社， 2007 ： 161 ， 297 - 299 .

XIE X L . Xie Xiliang’s moxibustion： treatment， health pre-servation and health care （in Chinese）［M］. Beijing ： People's Military Medical Press ， 2007 ： 161 ， 297 - 299 .

吴雨，王玉娟，李明，等 . 灸法治疗肿瘤的免疫机制研究进展［J］. 针刺研究， 2020 ， 45 （ 1 ）： 83 - 87 .

WU Y ， WANG Y J ， LI M ， et al . Advances in research on immune mechanism of moxibustion for treating tumor （in Chinese）［J］. Acupuncture Research ， 2020 ， 45 （ 1 ）： 83 - 87 .

徐红达，贾英杰，陈军，等 . 艾灸治疗化疗所致骨髓抑制的现状及经穴分析［J］. 肿瘤， 2014 ， 34 （ 6 ）： 564 - 568 .

XU H D ， JIA Y J ， CHEN J ， et al . Current advances in meri-dians and acupoints for moxibustion in patients with chemotherapy-induced myelosuppression （in Chinese）［J］. Tumor ， 2014 ， 34 （ 6 ）： 564 - 568 .

HU D ， SHEN W M ， GONG C Y ， et al . Grain-sized moxibustion promotes NK cell antitumour immunity by inhibiting adrenergic signalling in non-small cell lung cancer ［J］. J Cell Mol Med ， 2021 ， 25 （ 6 ）： 2900 - 2908 .

WANG P ， ZHU J ， XIE X L ， et al . Effects on the tumor specific growth factor and tumor necrosis factor α in rats' precancerous lesion of primary hepatocellular carcinoma by direct moxibustion at Ganshu （BL18） acupoint ［J］. Chin J Integr Med ， 2016 ， 22 （ 7 ）： 532 - 536 .

周忠信，吕明德，殷晓煜，等 . C57BL/6j小鼠接种Hepa1-6细胞诱导皮下肝癌模型的建立［J］. 广东医学， 2007 ， 28 （ 2 ）： 178 - 180 .

ZHOU Z X ， LU¨ M D ， YIN X Y ， et al . Establishment of subcutaneous hepatoma in C57BL/6j mice with Hepa1-6 cells （in Chinese）［J］. Guangdong Medical Journal ， 2007 ， 28 （ 2 ）： 178 - 180 .

朱芳芳，王焱皙，郜洁，等 . 基于自噬研究麒麟丸对环磷酰胺诱导的卵巢储备功能减退模型小鼠卵巢储备功能的影响［J］. 中华中医药杂志， 2021 ， 36 （ 4 ）： 1989 - 1994 .

ZHU F F ， WANG Y X ， GAO J ， et al . Effects of Qilin Pills on ovarian reserve function in cyclophosphamide-induced decreased orarian reserve mice model based on autophagy （in Chinese）［J］. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy ， 2021 ， 36 （ 4 ）： 1989 - 1994 .

李忠仁 . 实验针灸学［M］. 2版 . 北京：中国中医药出版社， 2007 ： 257 .

LI Z R . Experimental acupuncturolgy （in Chinese）［M］. 2 nd edition . Beijing ： China Press of Traditional Chinese Medicine ， 2007 ： 257 .

黄文娟，万茜，徐天舒 . 麦粒灸对Lewis荷瘤小鼠Th1/Th2型细胞因子的影响［J］. 针刺研究， 2014 ， 39 （ 6 ）： 477 - 481 .

HUANG W J ， WAN Q ， XU T S . Effect of moxa-grain-moxibustion on serum Th1/Th2 type cytokines in Lewis tumor-bearing mice （in Chinese）［J］. Acupuncture Research ， 2014 ， 39 （ 6 ）： 477 - 481 .

谭静，阳仁达，赵欢，等 . 艾灸对胃荷瘤大鼠瘤体增长的抑制作用［J］. 世界科学技术-中医药现代化， 2019 ， 21 （ 9 ）： 1994 - 2000 .

TAN J ， YANG R D ， ZHAO H ， et al . Inhibitory effect of moxibustion on tumor growth in rats with gastric tumor bea-ring （in Chinese）［J］. Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica-World Science and Techno-logy ， 2019 ， 21 （ 9 ）： 1994 - 2000 .

黄姗，万飞，孙景环，等 . 白桦脂醇对宫颈癌裸小鼠移植瘤的抑制作用［J］. 中国临床药理学杂志， 2020 ， 36 （ 23 ）： 3930 - 3933 .

HUANG S ， WAN F ， SUN J H ， et al . Inhibitory effect of betulin on cervical cancer nude mice transplantation tumors （in Chinese）［J］. The Chinese Journal of Clinical Pharmacology ， 2020 ， 36 （ 23 ）： 3930 - 3933 .

王大鹏，关徐涛，于冬冬 . 《黄帝内经》肿瘤病理论浅谈［J］. 新中医， 2021 ， 53 （ 6 ）： 85 - 88 .

WANG D P ， GUAN X T ， YU D D . Brief discussion on theory of tumor diseases in Huangdi Neijing （in Chinese）［J］. Journal of New Chinese Medicine ， 2021 ， 53 （ 6 ）： 85 - 88 .

王俊壹，程海波 . 癌毒病机理论与“固本清源”理论辨析［J］. 中华中医药杂志， 2019 ， 34 （ 10 ）： 4687 - 4690 .

WANG J Y ， CHENG H B . Analyses on the pathogenesis theory of cancer toxin andconsolidating body resistance and clearing the source theory （in Chinese）［J］. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy ， 2019 ， 34 （ 10 ）： 4687 - 4690 .

金纯纯，沈真如，席瑾，等 . 麦粒灸对薄型子宫内膜大鼠子宫自然杀伤细胞及蜕膜化的影响［J］. 针刺研究， 2022 ， 47 （ 2 ）： 101 - 107， 128 .

JIN C C ， SHEN Z R ， XI J ， et al . Effect of moxibustion with wheat-grain-sized moxa cones on uterine natural killer cells and decidualization in rats with thin endometrium （in Chinese）［J］. Acupuncture Research ， 2022 ， 47 （ 2 ）： 101 - 107， 128 .

徐静，黄艳，吴璐一，等 . Tim-3与胃癌肿瘤相关巨噬细胞的关系及艾灸调节作用的研究进展［J］. 上海针灸杂志， 2021 ， 40 （ 2 ）： 226 - 233 .

XU J ， HUANG Y ， WU L Y ， et al . Research progress on the relationship between Tim-3 and tumor-associated macrophages in gastric cancer and the regulatory effect of moxibustion （in Chinese）［J］. Shanghai Journal of Acupuncture and Moxibustion ， 2021 ， 40 （ 2 ）： 226 - 233 .

张敏，董勤，徐天舒 . 艾灸抗肿瘤化疗不良反应临床研究评述［J］. 肿瘤防治研究， 2014 ， 41 （ 1 ）： 83 - 86 .

ZHANG M ， DONG Q ， XU T S . Moxibustion on adverse reactions of tumor chemotherapy： a clinical research review （in Chinese）［J］. Cancer Research on Prevention and Treatment ， 2014 ， 41 （ 1 ）： 83 - 86 .

黄锦，李姗姗，王斌，等 . 针灸调节肿瘤免疫抑制的作用机制研究进展［J］. 针刺研究， 2020 ， 45 （ 9 ）： 767 - 770 .

HUANG J ， LI S S ， WANG B ， et al . Research advances in the mechanism of acupuncture in regulating tumor immunosuppression （in Chinese）［J］. Acupuncture Research ， 2020 ， 45 （ 9 ）： 767 - 770 .

ALOBEED O A ， ALKHAYAL K A ， ALSHEIKH A ， et al . Increased expression of tumor necrosis factor-α is associated with advanced colorectal cancer stages ［J］. World J Gastroenterol ， 2014 ， 20 （ 48 ）： 18390 - 18396 .

朱兵 . 论穴位与穴位特异性［J］. 中国针灸， 2021 ， 41 （ 9 ）： 943 - 950 .

ZHU B . On the acupoint and its specificity （in Chinese）［J］. Chinese Acupuncture & Moxibustion ， 2021 ， 41 （ 9 ）： 943 - 950 .

YANG S L ， ZHANG H . Optimization of the fermentation process of cordyceps sobolifera Se-CEPS and its anti-tumor activity in vivo ［J］. J Biol Eng ， 2016 ， 10 ： 8 .

YANG J M ， HAWKINS O E ， BARHAM W ， et al . Myeloid IKKβ promotes antitumor immunity by modulating CCL11 and the innate immune response ［J］. Cancer Res ， 2014 ， 74 （ 24 ）： 7274 - 7284 .

LUO L M ， LV M H ， ZHUANG X B ， et al . Irradiation increases the immunogenicity of lung cancer cells and irradiation-based tumor cell vaccine elicits tumor-specific T cell responses in vivo ［J］. Onco Targets Ther ， 2019 ， 12 ： 3805 - 3815 .

PALHARINI J G ， RICHTER A C ， SILVA M F ， et al . Eutirucallin： a lectin with antitumor and antimicrobial properties ［J］. Front Cell Infect Microbiol ， 2017 ， 7 ： 136 .

CHEN Y ， ZHANG J ， HUANG X ， et al . High leukocyte mitochondrial DNA content contributes to poor prognosis in glioma patients through its immunosuppressive effect ［J］. Br J Cancer ， 2015 ， 113 （ 1 ）： 99 - 106 .

国畅廓，刘安文 . IL-4/IL-4R与肿瘤关系的研究进展［J］. 生命的化学， 2017 ， 37 （ 3 ）： 413 - 418 .

GUO C K ， LIU A W . Research progress of IL-4/IL-4R and tumor （in Chinese）［J］. Chemistry of Life ， 2017 ， 37 （ 3 ）： 413 - 418 .

SOUZA H S P ， NEVES M S ， ELIA C C S ， et al . Distinct patterns of mucosal apoptosis in H pylori-associated gastric ulcer are associated with altered FasL and perforin cytotoxic pathways ［J］. World J Gastroenterol ， 2006 ， 12 （ 38 ）： 6133 - 6141 .

RUPARELIA N ， CHAI J T ， FISHER E A ， et al . Inflammatory processes in cardiovascular disease： a route to targeted therapies ［J］. Nat Rev Cardiol ， 2017 ， 14 （ 3 ）： 133 - 144 .

HOSOKAWA H ， TANAKA T ， ENDO Y ， et al . Akt1-mediated Gata3 phosphorylation controls the repression of IFNγ in memory-type Th2 cells ［J］. Nat Commun ， 2016 ， 7 ： 11289 .

YANG H B ， SONG W ， CHEN L Y ， et al . Differential expression and regulation of prohibitin during curcumin-induced apoptosis of immortalized human epidermal HaCaT cells ［J］. Int J Mol Med ， 2014 ， 33 （ 3 ）： 507 - 514 .

CHEN H W ， DONG Y ， HE X H ， et al . Paeoniflorin improves cardiac function and decreases adverse postinfarction left ventricular remodeling in a rat model of acute myocardial infarction ［J］. Drug Des Dev Ther ， 2018 ， 12 ： 823 - 836 .

YU X L ， ZHOU X ， FU C L ， et al . Celastrol induces apoptosis of human osteosarcoma cells via the mitochondrial apoptotic pathway ［J］. Oncol Rep ， 2015 ， 34 （ 3 ）： 1129 - 1136 .

浏览量

下载量

CNKI被引量

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

麦粒灸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤不同时期保护效应及Beclin 1表达的影响

电针对失坐骨神经大鼠腓肠肌细胞凋亡及相关蛋白的影响

针刀、电针和圆利针对膝骨关节炎模型兔股直肌Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响