摘要:目的 :观察坐骨神经分支选择性损伤(SNI)大鼠脊髓相应节段左旋精氨酸(L-Arg)转运体2(CAT-2)、一氧化氮合酶(NOS)与一氧化氮(NO)和环鸟苷酸(cGMP)的变化及电针对其的影响,探讨电针干预神经病理性痛的脊髓机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组和NOS抑制剂(LNAME)组,每组30只。采用SNI法制备神经病理性痛模型,假手术组仅分离不结扎。电针组电针大鼠损伤侧"委中""环跳"穴,频率2 Hz,波宽0. 6 ms,起始电流强度1 mA,每10 min递增1 mA,刺激时间30 min,1次/d,连续7 d;L-NAME组予L-NAME 60 mg·kg(-1)·d(-1)·d(-1)腹腔注射,连续7 d。造模前及SNI后10、16 d分别测定机械痛阈。RT-PCR法测定脊髓CAT-2 mRNA与诱导型NOS(iNOS)mRNA的表达,Western blot法测定脊髓iNOS的表达,硝酸/亚硝酸还原酶法与放射免疫分析法分别测定NO(NO_2(-1)腹腔注射,连续7 d。造模前及SNI后10、16 d分别测定机械痛阈。RT-PCR法测定脊髓CAT-2 mRNA与诱导型NOS(iNOS)mRNA的表达,Western blot法测定脊髓iNOS的表达,硝酸/亚硝酸还原酶法与放射免疫分析法分别测定NO(NO_2-/NO_3-/NO_3-)与cGMP的含量。结果:与假手术组比较,SNI后10 d其他各组机械痛阈值均降低(P<0. 01);与模型组比较,电针组和LNAME组SNI后16 d时机械痛阈值均升高(P<0. 01,P<0. 05)。与假手术组比较,模型组脊髓CAT-2mRNA、iNOS mRNA、iNOS蛋白表达及NO_2-)与cGMP的含量。结果:与假手术组比较,SNI后10 d其他各组机械痛阈值均降低(P<0. 01);与模型组比较,电针组和LNAME组SNI后16 d时机械痛阈值均升高(P<0. 01,P<0. 05)。与假手术组比较,模型组脊髓CAT-2mRNA、iNOS mRNA、iNOS蛋白表达及NO_2-/NO_3-/NO_3-与cGMP含量均升高(P<0. 01,P<0. 05);与模型组比较,电针组和L-NAME组脊髓CAT-2 mRNA、iNOS mRNA、iNOS蛋白表达及NO_2-与cGMP含量均升高(P<0. 01,P<0. 05);与模型组比较,电针组和L-NAME组脊髓CAT-2 mRNA、iNOS mRNA、iNOS蛋白表达及NO_2-/NO_3-/NO_3-与cGMP含量均下降(P<0. 05,P<0. 01),且L-NAME组CAT-2 mRNA、iNOS mRNA、iNOS蛋白表达比电针组降低更显著(P<0. 05)。结论:电针缓解疼痛的作用机制之一,可能是通过有效下调神经病理性痛状态下脊髓L-Arg/NO/cGMP通路的功能而实现的。ObjectiveTo observe the effect of electroacupuncture(EA)on changes of expression of L-Arg transporter 2(CAT-2)m RNA and nitric oxide synthase(i NOS)m RNA and protein and contents of NO and c GMP of L4—L6 segments of spinal cord in rats with spared nerve injury(SNI),so as to reveal its mechanism underlying reducing neuropathic pain.MethodsA total of 120 male SD rats were randomly divided into sham operation,model,EA and NOS inhibitor(N omega-Nitro-L-arginine methyl ester hydrochloride,L-NAME)groups,with 30 rats in each group. The neuropathic pain model was established by ligating and cutting the tibial nerve and the common peroneal nerve. EA(2 Hz,1—3 m A)was applied to"Weizhong"(BL40)and"Huantiao"(GB30)on the damaged hindlimb for 30 min,once daily from day 11 to 17 after SNI. Rats of the L-NAME group received i. p. of L-NAME(60 mg·kg-与cGMP含量均下降(P<0. 05,P<0. 01),且L-NAME组CAT-2 mRNA、iNOS mRNA、iNOS蛋白表达比电针组降低更显著(P<0. 05)。结论:电针缓解疼痛的作用机制之一,可能是通过有效下调神经病理性痛状态下脊髓L-Arg/NO/cGMP通路的功能而实现的。
摘要:目的:收集关于神经示踪技术应用于实验针灸研究的相关文献,总结分析其在腧穴、经脉、脏腑等方面的应用状况。方法:本研究以"示踪技术OR神经示踪技术OR示踪剂OR神经示踪剂OR示踪OR神经示踪"和"针灸OR针刺OR电针OR耳针OR眼针OR经脉OR穴区OR腧穴OR穴位注射"为检索词检索中国知网(CNKI,1979—2017)、万方数据知识平台(Wan-Fang Data,1990—2017)、维普资讯中文期刊服务平台(VIP Date,1989—2017);以"neural tracing technique OR neuroanatomical tracing OR neuronal tracers"and"acupuncture OR electroacupuncture OR auricular acupuncture OR eye acupuncture OR meridians OR acupuncture points OR acupoint injection"为关键词检索英文数据库PubMed(1997—2017)。结果:共收录与本研究相关的文献94篇。其中使用最多的神经示踪剂是辣根过氧化物酶和霍乱毒素亚单位B,采用的实验动物有大鼠、家兔、猫和猴等,示踪剂的注射部位以腧穴居多。示踪剂注射后动物的存活时间从1 d到12周不等,所标记的神经成分包括感觉、运动和自主神经系统相关的神经元及其神经纤维。这些文献主要揭示了腧穴和脏腑的神经支配具有区域性和节段性特征,二者之间存在密切的神经解剖学联系,而其相关的神经元和神经纤维的化学特征(通过免疫荧光组织化学染色显示)与针灸作用途径密切相关。结论:应用神经示踪技术可以从神经通路/环路及其相关化学性质等不同角度更加深入地了解针灸的作用途径,这也为该项技术在将来的实验针灸研究中发挥更大的作用奠定了基础。